花生DNA的五种改良CTAB提取方法的比较分析及其应用

花生是世界上重要的油料作物和经济作物之一,也是最重要的植物食用油来源之一,但花生分子标记和功能基因组学等分子生物学研究较落后。因此,本研究旨在建立适合自身的花生基因组DNA的提取方法,为开展花生分子标记研究和分子生物学研究提供帮助。本研究使用了5种改良CTAB法提取花生基因组DNA,所得DNA的纯度和浓度分别通过琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测,再利用8种分子标记技术的48条单引物和4对转座子保守区扩增引物对提取获得的花生基因组DNA的质量进行扩增验证和应用。结果表明:(1)综合花生基因组DNA的质量检测数据以及花生分子标记技术和转座子保守区的扩增验证结果来看,五种改良CTAB法的DNA提取效果表现依次为:方法一>方法五>方法四>方法三>方法二,其中方法一为最佳首选,方法五和方法四的提取效果也好,但是由于其有利用到强腐蚀性的平衡酚,不安全且不环保,所以不推荐;(2)在花生上建立了8种分子标记技术和4类转座子保守区的扩增体系;(3)克隆获得了花生4类转座子保守区序列。本研究为今后开展花生分子标记研究及转座子的克隆鉴定利用提供了帮助。     

甜菜夜蛾生物学特性及药效测定

甜菜夜蛾在福建１ａ发生８代,世代重叠,以蛹在菜地的松土中越冬．雌雄性比为１１．３,每雌平均产卵量为５２４～６０８粒．通过实验,测定了不同温度下,甜菜夜蛾各虫态的发育历期、发育起点温度和有效积温．通过１６种杀虫剂对甜菜夜蛾的室内药效测定表明,抑太保和拉维因对甜菜夜蛾防治效果分别为９６．６％和９３．１％,其它杀虫剂防治效果不明显．     

苏云金杆菌摇瓶发酵培养基

采用正交试验法 ,对苏云金芽孢杆菌高毒力菌株 TS1 6进行了摇瓶发酵培养基筛选试验 .结果表明 ,不同原料对发酵液毒力的影响相差很大 ,在几种培养基组分中以鱼粉对发酵液的影响最大 .试验所得的最佳培养基组合为 :黄豆饼粉 3 2 g· L- 1 、玉米粉 1 4g· L- 1 、花生饼粉 3 2 g· L- 1 、鱼粉 1 4g· L- 1 、蛋白胨 4g· L- 1 、酵母 6g· L- 1 、Fe SO4 · 7H2 O 0 .0 4g· L- 1 、Zn-SO4 · 7H2 O 0 .0 8g· L- 1 .     

潮阳区水果业发展中存在的问题及其对策

汕头市潮阳区地处粤东沿海，属南亚热带季风气候，光照充足，雨量充沛，气候温和，四季常青。境内地势自西北向东南倾斜，大南山小北山中间为练江平原，小北山东北侧为榕江平原，自然条件优越，适宜多种果树生长。全区有耕地面积24．7万多亩，山地面积32．1多万亩，果树资源丰富，栽培历史悠久，早在唐宪宗年间，灵山寺便有千丛果（荔枝）的记述。据调查，潮阳区现有果树资源21个科，130余个品种。近几年来，水果业发展迅速，形成了西胪乌酥杨梅，金灶灶香牌香蕉、三捻橄榄、     

苏云金杆菌新菌株WB9cry1基因型的PCR—RFLP分析

利用PCR-RFLP技术对Bt新菌株WB9的cry1基因型进行分析，结果表明该菌株含有crylAg、crylAb,cry1Cb,cry1Fa和cry1Ga5种cry1基因型，且cry1Ab的酶切产物不同于正常的cry1Ab。采用特异引物对G1/G2扩增，也证明WB9含有cry1Ab基因，在此基础上，再利用引物对G1/K3un2进行扩增，其产物经回收纯化后用EcoRⅠ/XbaⅠ双酶切分析，结果也表明WB9所含的cry1Ab与众不同，无大片段出现且有一条400-500bp的特异片段。     

苏云金芽胞杆菌cry2Ac4基因在 大肠杆菌中的表达

在大肠杆菌中表达苏云金芽胞杆菌（Bacillus thuringiensis,简称Bt）cry2Ac4基因;笔者以含有Bt WB9菌株cry2Ac4基因的质粒pMD2Ac为模板,利用cry2Ac4基因的特异引物对(ET-F/ET-R)扩增获得该基因,进而将cry2Ac4基因与pET-29a原核表达载体连接;成功构建了重组表达载体并转化大肠杆菌JM109,从阳性转化子中提取重组表达质粒pET-29a-cry2Ac4,再转化大肠杆菌BL21（DE3）pLysS,经IPTG诱导后,对诱导表达产物进行了SDS-PAGE检测;cry2Ac4基因编码的约70kDa蛋白在大肠杆菌中得到了高效表达。     

花生新品种桂花33的选育及其栽培技术

[目的]选育高油、高产且适应性广的花生新品种,为广西花生产业的可持续发展提供良种和技术支持.[方法]以优异种质0442/3001-18为母本、(025春/26×汕油162)F5代为父本,通过有性杂交,采用多代定向选择结合系谱选育法,并经过区域试验和生产试验综合考察,选育出花生新品种桂花33.[结果]桂花33株型直立紧凑、生长势强,耐旱、抗倒伏性强,抗叶斑病、中抗青枯病.2011~2012年品比试验发现,荚果平均产量4149.05 kg/ha,分别比对照汕油523和桂花21增产10.68%和12.31%.在2013~2014年广西花生区域试验中,荚果平均产量4281.23 kg/ha,籽仁平均产量2759.10 kg/ha,分别比对照桂花21增产7.81%和7.70%;平均粗脂肪含量55.57%,蛋白质含量26.15%,饱果率84.87%,双仁果率82.82%,百果重189.5 g,百仁重74.7 g,出仁率65.05%.在广西武鸣生产试验中,荚果平均产量4193.50 kg/ha,比当地主栽品种桂花17增产12.06%;在武宣县和北流市生产试验中,荚果平均产量分别为4050.50和4237.60kg/ha.于2015年6月通过广西农作物品种审定委员会审定,是目前华南花生产区育成且油含量最高的花生品种.[结论]桂花33油含量高、产量高、适应性广,综合性状优良,适宜在我国南方各主要花生产区推广种植,栽培上应注意在生长中后期适当进行苗情控制.     

农药对虫生真菌粉虱座壳孢孢子萌发和菌丝生长的影响

虫生真菌粉虱座壳孢Aschersonia aleyrodis是大有前途的粉虱和介壳虫杀虫剂。用6种大田常用农药在推荐浓度下，研究其在25℃下对座壳孢菌孢子萌发和菌丝生长的影响，发现甲氰菊酯和克螨特抑制其孢子萌发和菌丝生长，表明二者与本菌极不相容。吡虫啉、水胺硫磷和双甲脒能促进孢子萌发且后两者亦可加速菌丝生长，多菌灵对其孢子萌发起暂时促进作用然而抑制其菌丝生长。     

高油酸花生新品种桂花37的选育

[目的]选育出适合我国南方生态气候条件种植的珍珠豆型高油酸花生新品种,为南方花生产区高油酸花生生产发展提供优良品种.[方法]将从美国引进的高油酸种质SunOleic 95R分别与我国珍珠豆型高产、抗病品种汕油162、粤油13和粤油45进行杂交,从杂交后代材料中筛选得到符合育种目标的高油酸品系,并进行区域试验和生产试验.[结果]选育的桂花37属珍珠豆型花生品种,油酸含量82.90%,亚油酸含量2.60%,油亚比(O/L)32.34,且高抗青枯病、抗叶斑病和锈病.在国家(南方片)花生区域试验和广西花生品种区域试验中,荚果产量分别为3670.35和3814.05 kg/ha,分别比对照品种(汕油523和桂花21)减产6.02%和2.26%;在广西北流生产试验中,平均荚果产量5570.70 kg/ha,与所有参试品种的平均产量(5550.36 kg/ha)相比,桂花37增产0.37%.2016年6月桂花37通过广西农作物品种审定委员会审定.[结论]选育的珍珠豆型花生新品种桂花37的油酸含量高且抗病性强,适合在我国南方花生产区推广种植.     

响应面分析法对苏云金芽孢杆菌LLP29-M19漂浮剂的优化

利用细胞固定化制备苏云金芽胞杆菌LLP29-M19漂浮剂,为提高其漂浮效果,应用数学统计方法对该菌株漂浮剂配方进行优化．通过单因素试验确定海藻酸钠质量分数为1．0％,CaCl2质量分数为2．0％,空心玻璃微珠质量分数为3．5％;采用Plackett-Burman设计对影响该漂浮剂漂浮效果的8个因素进行筛选,确定漂浮剂配方中的3个重要影响因子为CaCl2、固定化时间和黑色素;通过最陡爬坡试验逼近以上3个因子的最大响应区域后,采用响应面分析获得这3个重要因子的最佳条件,确定LLP29-M19漂浮剂最佳配方：海藻酸钠0．80％、CaCl2 4．90％、空心玻璃微珠3．2％、菌粉3．0％、黑色素0．012％、苯甲酸钠0．3％、小白鼠饲料0．5％,固定化时间4．74h．优化后的漂浮剂漂浮效果为1698．25,与响应面数学模型预测值的误差仅1．8％,比初始漂浮剂配方漂浮效果（64．5）提高了25．32倍．