梭梭14-3-3蛋白基因HaFT-1和HaFT-2克隆及表达分析

根据前期梭梭干旱转录组测序得到的Unigene序列,成功克隆2个梭梭14-3-3蛋白基因,分别命名为HaFT-1和HaFT-2,并对其进行基因表达分析。结果表明:HaFT-1基因在梭梭的根、种子中均可表达,且根中表达最强;HaFT-2基因在梭梭同化枝中表达最强,根的表达量次之。干旱胁迫后HaFT-1和HaFT-2基因的表达量均下调。本研究初步分析HaFT-1、HaFT-2基因的表达模式,为进一步研究该基因功能奠定基础。     

鹰嘴豆锌指蛋白基因ZE1的克隆及表达分析

利用一段从PEG胁迫的鹰嘴豆幼苗叶片所构建的cDNA文库中得到的EST序列,通过3'RACE方法克隆到一个鹰嘴豆C_2H_2型锌指蛋白基因ZF1,该基因不含内含子,编码一条244个氨基酸残基的多肽,含有两个典型的Cys2/His2锌指结构.其氨基酸序列含有一个可能的核定位型号,农杆菌介导的洋葱表皮细胞GFP瞬时表达实验表明,ZF1蛋白位于细胞核内.半定量RT-PCR分析表明,ZF1在鹰嘴豆的根、茎、叶、花、幼荚和幼胚中均有表达,在茎和叶中表达较弱,为组成型转录因子.半定量RT-PCR和实时荧光定量PCR检测结果显示,ZF1不但受高温及干旱诱导,而且还受6-苄基腺嘌呤(6-BA)、脱落酸(ABA)、乙烯利(Et)、赤霉素(GA_3)、吲哚-3-乙酸(IAA)、茉莉酸甲酯(MeJA)、水杨酸(SA)和氧胁迫诱导.这些结果表明,ZF1基因可能作为一个核调控因子参与植物的生长代谢以及多种生物与非生物胁迫的应答.     

淹水处理对不同水稻品种碳氮代谢的影响

采取不同淹水时间与淹水深度的处理，研究了４个水稻品种在孕穗期叶片中的碳、氮含量及其光合速率．结果表明：经淹水处理后，水稻叶片的光合速率和总糖含量及ｃ／Ｎ比均下降，而总氮含量上升，并且两个杂交稻品种对淹水处理的耐性较两个常规稻品种强．     

大豆籽粒大小的遗传及SSR标记分析

采用主基因+多基因混合遗传分离分析方法，联合分析J280082（小粒品种）×海系13（大粒品种），巴马九月黄（小粒品种）×海系13（大粒品种）2个组合的P1、P2、F1和F2四个群体，研究大豆籽粒大小的遗传规律，进而应用t测验和方差分析法分析并筛选与籽粒大小紧密连锁的SSR分子标记。结果表明：2个组合的大豆籽粒大小遗传都符合E-1模型，即籽粒大小性状均受两对主基因控制，并且有多基因效应，主基因效应表现为加性-显性-上位性效应；2组合主基因遗传率都较大，分别为74.3%、42.6%，多基因遗传率较小，分别为5.1%、14.4%。在J280082×海系13中有17个标记与大豆籽粒大小性状相关，在巴马九月黄×海系13群体中有12个标记与大豆籽粒大小性状相关；其中satt070（B2连锁群）、satt546（D1b连锁群）、satt302（H连锁群）、satt337（K连锁群）、satt373（L连锁群）、satt237（N连锁群）在两个群体中都表现出与大豆籽粒大小相关；satt302、satt070在两个群体中都有着较高的对籽粒大小性状变异的解释率(>8％)，可用于对大豆籽粒大小性状分子标记辅助育种选择。     

鹰嘴豆不同品种种子α 淀粉酶抑制剂抑制活性

研究新疆34个不同鹰嘴豆品种种子α 淀粉酶抑制剂抑制活性的差异。结果表明，多数Kabuli和Desil品种间α 淀粉酶抑制剂抑制活性存在显著差异（P<0.05），且34个品种的α 淀粉酶抑制剂的抑制活性在品种间呈偏态分布；Kabuli品种蛋白质含量与α 淀粉酶抑制剂抑制活性呈极显著（P<0.01）正相关，说明品种蛋白质含量越高，其α 淀粉酶抑制剂含量也越高；而品种淀粉含量与α 淀粉酶抑制剂抑制活性呈显著（P<0.05）负相关，说明品种淀粉含量越高，α 淀粉酶抑制剂含量越低；偏相关分析表明，α 淀粉酶抑制剂与蛋白质和淀粉含量之间均有一定的线性关系；通过系统聚类法把34个鹰嘴豆品种聚为4类，其品种数分别为1、7、12和14。     

大豆种子贮藏蛋白亚基含量变异种质的筛选与创制

以1 400份大豆品种(系)资源为材料,利用SDS-PAGE,分析贮藏蛋白11S和7S组分及其亚基含量与亚基缺失情况,并采用0.2%,0.4%EMS分别处理南农493-1和南农99C-6两个品种种子,利用60Co γ射线处理76个品种(系)种子,处理之后及时播种,单株收获,SDS-PAGE检测M2代和M3代种子贮藏蛋白亚基.结果表明,1 400份参试品种(系)的11S/7S值范围0.44～3.64,平均值1.68±0.37,并鉴定出34份亚基含量特异材料,其中包括α′和α亚基含量低、β亚基含量低、A3B4亚基缺失、A5A4B3亚基缺失和A1aB1b亚基缺失种质.理化诱变结果表明,化学诱变率约为2.92%,物理诱变率约为5.71%,对大豆蛋白的诱变效果,0.4%EMS处理优于0.2% EMS处理,而60Co γ射线慢照射处理优于化学诱变处理,并从M3代种子中筛选出了211粒亚基变异种质.     

烤烟新品种湘烟7号高效制种技术研究

研究了施肥水平、单株留果数和蒴果采摘期对湘烟7号种子产量及质量的影响，以期为提高繁种质量和种子活力提供依据。结果表明：随着施氮水平提高，种子更加饱满，但种子活力以纯氮用量为195 kg/hm²时较理想；增施钾肥和磷肥有利于提高湘烟7号种子产量，其中钾肥对种子产量和质量的影响较大，肥料配比以m(N)︰m(P₂O₅)︰m(K₂O)=1︰(1～1.2)︰(2.5～3.0)较理想；增加蒴果留果数有利于提高湘烟7号种子产量，但种子活力以单株留蒴果数为100～160个时较理想；80%蒴果颜色由黄转褐时采摘有利于提高湘烟7号种子产量和质量。综合考虑种子产量和质量，湘烟7号种子繁育的施氮量以180～195 kg/hm²为宜，最适氮磷钾配比为m(N)︰m(P₂O₅)︰m(K₂O)=1︰(1～1.2)︰(2.5～3.0)，最适单株留蒴果数为160个，蒴果采摘时期以80%蒴果由黄转褐时最佳。     

梭梭NAC转录因子HaNAC38功能及特性分析

从梭梭干旱转录组中获得与干旱相关的NAC转录因子基因HaNAC38，为了研究其功能，以过表达HaNAC38基因拟南芥纯合株系作为对象，比较转基因株系与野生型间的差异，并利用酵母单杂交技术对HaNAC38转录因子可能结合的DNA核心序列进行验证。结果表明，在自然干旱和模拟盐胁迫条件下，过表达HaNAC38基因拟南芥株系生长状况显著优于野生型拟南芥。过表达HaNAC38基因拟南芥株系的种子发芽率、幼苗叶片脯氨酸含量及过氧化氢酶活性均显著高于野生型拟南芥株系，丙二醛含量和过氧化氢含量显著低于野生型拟南芥。由此表明HaNAC38显著增强了拟南芥对于干旱和盐胁迫的耐受能力。酵母单杂交试验结果表明，HaNAC38转录因子可以在酵母体内特异性结合TTGCGT核心序列，并激活下游报告基因的表达。以上结果为明确梭梭HaNAC38转录因子的功能及其调控网络奠定了基础。