高羊茅悬浮细胞系的建立及绿色植株的高频再生

将5个高羊茅品种的成熟种子经灭菌后，接种于含有不同浓度2，4—D和ABA的N4培养基上进行愈伤组织诱导。结果表明，不同浓度2，4—D和ABA对5个品种的愈伤组织诱导率有显著影响，以培养基中附加9mg/L 2，4—D和2mg/L ABA的诱导率最高。将经过数次继代改造后获得的高质量胚性愈伤置于AA液体培养基中进行悬浮培养，建立起来自3个品种的8个悬浮细胞系，其中6个悬浮细胞系经高渗预处理后能高频再生出绿色植株，基本克服了以往研究中再生白化植株的现象。     

水稻品种间蛋白质含量差异及其环境的影响

笔者用GQA—31型谷物品质分析仪测定了1274个水稻品种(系)的蛋白质含量,得到如下结果:稻米蛋白质含量表现为常态分布,1274个水稻品种(系)所测待的蛋白质含量最大值为14.2％,最小值为6.7％,平均值为10.85％,二九青、原丰早,广陆矮四号等几个当家品种位于中点附近,品种间存在极显著的差异,环境条件影响稻米的蛋白质含量,但各品种的波动趋势基本一致。24个供试品种的蛋白质含量在不同栽培方式、不同年份之间的相关系数分别为0.734和0.529,均达极显著。     

空间诱变和γ射线辐照与离体培养相结合对水稻生物学效应的研究

利用返回式人造卫星搭载早籼品种中优早 3号干种子 ,研究比较其用不同剂量γ射线辐照对水稻的生物学效应。结果表明 ,空间诱变对M1 代成苗率、苗高和结实率的生理损伤明显比γ射线辐照轻 ,M2 代诱发的叶绿素缺失、株高及抽穗期突变的频率不及 30 0Gyγ射线处理。对空间诱变种子进行离体培养 ,叶绿素缺失和株高突变的频率有较大提高。空间诱变种子的愈伤组织经辐照处理后 ,绿点分化率和绿苗分化率下降 ,M2 的叶绿素缺失、株高及抽穗期突变频率超过空间诱变与离体诱变单独处理之和 ,也不同程度高于 30 0Gyγ射线辐照     

转CBF1基因增强水稻的耐逆性

为改良水稻(Oryza sativaL.)的耐逆性,以来源于成熟种子的胚性愈伤组织为受体材料,通过农杆菌介导法将拟南芥(Arabidopsis thaliana)耐逆相关CBF1基因导入粳稻品种秀水11基因组,经GUS组织化学染色、PCR检测和Southern杂交分析验证,获得一批转基因植株。T1代检测结果显示,所转基因已遗传给后代,且大多数株系的分离比符合3∶1。试验表明,在高盐与高渗胁迫下,转基因株系较非转化对照具有显著或极显著生长优势,表现苗高负增长率较小,长出的根数较多,根长较长;经低温胁迫处理后,转基因株系的叶片相对电导率显著或极显著低于对照。这些结果证明水稻转基因株系的耐逆性得到了增强。     

大肠杆菌乙酰辅酶A羧化酶accD亚基表达载体的构建及遗传转化研究

为探索大肠杆菌异质型乙酰辅酶A羧化酶（ACCase）的β-CT亚基accD基因对油料作物含油量的影响,将目的基因E.coli accD（eaccD）与拟南芥Rubisco小亚基（rbcS）转运肽基因融合,构建以油菜Napin启动子驱动的种子特异表达载体。本试验应用农杆菌介导法,将该表达载体转入油菜,通过PCR检测获得了...     

广西局地西番莲病毒病的病原鉴定及优势病毒分析

 在广西采集表现斑驳、花叶症状疑似病毒病的西番莲叶片样品,利用小RNA测序技术,结合生物信息学分析,鉴定侵染西番莲的病毒种类。参考测序结果采用DAS-ELISA和RT-PCR方法对2015~2018年间采集的385份疑似病毒病样品进行检测,分析引发广西西番莲病毒病的优势病毒种类。结果显示:小RNA共获得20 921 061 clean reads,拼接获得560个contigs,其中99个contigs被注释为夜来香花叶病毒(telosma mosaic virus,TeMV),97个contigs被注释为黄瓜花叶病毒(cucumber mosaic virus,CMV),69个contigs被注释为东亚西番莲病毒(East Asian passiflora virus,EAPV),12个contigs被注释为大豆花叶病毒(soybean mosaic virus,SMV)。提取送测序的同批样品叶片的总RNA进行RT-PCR验证,可检测出TeMV、EAPV和CMV 3种病毒,未检出SMV。采用DAS-ELISA和RT-PCR对采集的样品进行检测,结果发现284份样品为阳性样品,检出率为73.76%,其中TeMV的检出率最高为64.16%,其次为EAPV和CMV,检出率分别为41.30%和11.43%;3种病毒存在复合侵染现象,其中TeMV+EAPV的检出率最高为24.94%,TeMV+CMV的检出率为4.16%,EAPV+CMV的检出率为0.26%,3种病毒复合侵染的检出率为4.94%。     

辐射处理对大豆悬浮细胞超微结构的影响

正常大豆Ｐｅｋｉｎｇ品种浮细胞具有典型的细胞结构，但经５００拉德γ射线照射后，细胞结构受到辐射损伤，表现为质体，线粒体等细胞相对减少，核膜扭曲，模糊，但经１个月继代培养后，细胞恢复正常的结构和功能，５０００拉德γ射线能使大豆悬浮细胞产生致死损伤，导致细胞器解体和细胞死亡，本实验未能观察到辐射击穿细胞的直接证据，但出现膜渗透性改变，质壁分离及其内质网膨大等现象，间接证明了细胞自身防御体系被打破，有利     

农杆菌介导高羊茅遗传转化体系的建立

为建立农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导高羊茅(Festuca arundinaceaSchreb.)遗传转化体系,以草坪型高羊茅品种凌志的胚性愈伤组织为受体材料,通过gus基因瞬时表达检测,研究了多种因素对农杆菌介导转化的影响。结果表明,农杆菌介导高羊茅胚性愈伤组织转化的适宜条件为:愈伤组织在含BAP和NAA各0.5mg/L的培养基上预培养3d;菌液浓度OD600值0.7,感染时间15min;农杆菌预培养基和悬浮培养基以及共培养基中添加100μmol/L的乙酰丁香酮;共培养温度23℃,共培养时间3d,共培养基pH值5.2。不同浓度潮霉素筛选效果试验表明,采用低浓度(50mg/L)潮霉素连续筛选,再生获得的转基因植株数最多,因此是最为可取的筛选方式。     

高羊茅成熟种子组织培养的影响因素研究:Ⅲ.多种因素对胚性愈伤组织分化的影响

研究了多种因素对高羊茅胚性愈伤组织分化的影响。结果表明，BAP在高羊茅胚性愈伤组织分化中的作用要比KT大，但两者配合使用效果更佳，其适宜组合为2．0mg／L BAP＋0．5mg／LKT。在该细胞分裂素水平下，生长素NAA宜用0.5mg／L。胚性愈伤组织先在蔗糖浓度较高的分化培养基上预分化，以及经高渗预分化后的致密愈伤组织在琼脂浓度较高的分化培养基上分化，都能较好地促进愈伤组织植株再生，蔗糖和琼脂的适宜浓度分别为60和10g／L。分化培养基中添加脯氨酸导致总的愈伤组织再生率降低，但同时有减少白化苗再生的趋势。