结核分枝杆菌CFP10-ESAT6融合蛋白的真核表达及其牛结核病诊断价值评价

本研究旨在利用毕赤酵母(Pichia pastoris)系统融合表达结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)的培养滤液蛋白10(culture filter protein 10,CFP10)和早期分泌抗原靶6蛋白(earlier secreted antigen target 6,ESAT6),并评价其作为牛结核病外周血γ-干扰素(interferon gamma,IFN-γ)体外释放实验特异性刺激剂来诊断牛结核病的应用潜能.通过PCR扩增cfp1 0-esat6融合基因,构建pPICZα A-(cfp10-esat6)重组质粒,电转化毕赤酵母GSll5,添加甲醇至终浓度1.0％,诱导3d,取培养上清进行SDS-PAGE分析,镍离子金属螯合亲和层析柱纯化目的蛋白,Western blot分析重组蛋白的免疫反应性;取纯化的融合蛋白CFP10-ESAT6作为刺激剂用于牛结核病外周血IFN-γ体外释放实验,评价其牛结核病诊断价值.结果表明,目的蛋白(33kD)被成功分泌表达,该融合蛋白与抗CFP10、ESAT6、组氨酸标签和c-Myc4种单抗均发生特异性反应,具有较好的免疫反应性.165份奶牛外周血样品的IFN-γ检测结果表明,CFP 10-ESAT6融合蛋白与结核菌素纯蛋白衍生物(purified protein derivative,PPD)作为刺激剂,二者阳性符合率为82.3％,阴性符合率为78.8％.本研究利用酵母表达系统成功表达CFP10-ESAT6融合蛋白,并表现出更高的生物学活性,在牛结核病外周血IFN-γ体外释放实验中可作为候选刺激剂,并能克服混合感染导致的PPD漏检问题,从而进一步提高检测的敏感性和特异性.     

玉米秆青贮技术

玉米秆青贮技术陈祥（唐河县畜牧兽医站４７３４００）玉米秆青贮是节省饲料（每５公斤青贮饲料相当于１公斤玉米），解决冬季养牛缺青的有效途径之一，特别是近年来，粮食、饲料价格大幅度上涨，养牛业经济效益较低的情况下，更是倍受青睐。现把我站多年来推广玉米秆青贮...     

桃树立地肥培条件与流胶病发生的关系

桃树流胶病是一种严重枝干病害,发生极为普遍,目前已知在江苏、浙江、上海、广东、云南、河北、安徽等省(市),均有不同程度的发生为害,罹病植株树势逐年削弱,产量下降,以致因病情日趋严重而枯死。据笔者研究,本病是由一种病原真菌为害所致。为研究病害发生的生态条件,1985年在桃树生长后期,选择我省桃主要产区的无锡太湖及镇扬丘陵两地区不同地貌类型进行考察,比较其病害发生因素,为综合防治提供科学依据。     

玉米自交系抗倒伏性状选择的初步探索

玉米拔节后,在风雨袭击下,很易发生倒伏.倒伏的玉米,破坏了地上部合理的群体结构,使通风透光不良,水肥气热失调,对光能利用显著减少,对产量的提高有很大的影响.因此应重视对玉米抗倒伏性状的选择.     

从《水利发展“十二五”规划》看我国农村水利的主要任务与对策

"十二五"期间,我国农村水利到底做什么?解决什么问题?这是摆在水利人面前的一个新问题,他关系到整个农村水利的社会效益。《水利发展"十二五"规划》中明确了"十二五"期间水利发展的主要目标、水利建设的主要任务、水利改革管理的主要任务,提出了解决农村安全饮水问题的主要对策。     

绿壳蛋鸡ESR1基因与早期产蛋性能的关联性研究

为了提高绿壳蛋鸡的产蛋性能,筛选出有利的分子辅助标记,试验采用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)和DNA测序技术对124只长顺绿壳蛋鸡雌激素受体1(ESR1)基因进行多态性分析,并与其产蛋性能进行关联性分析。结果表明:绿壳蛋鸡群体ESR1基因In4片段出现CC、CD和DD 3种基因型,其中C为优势等位基因,该位点群体遗传处于Hardy-Weinberg非平衡状态(P<0.05),多态信息含量(PIC)为0.359 5,遗传杂合度(He)和有效等位基因数(Ne)分别为0.474 6,1.903 3。基因型与产蛋性能关联性分析显示,3种基因型个体间的开产体重、开产蛋重、平均连产天数差异均不显著(P>0.05),而CC与DD基因型个体的开产日龄和300日龄产蛋量均存在显著差异(P<0.05)。在该试验群体中,选择DD基因型个体可增加产蛋量,提高产蛋性能。     

印楝素的分离提纯及其应用的专利分析

印楝素是目前世界上最优秀的植物源农药,对全球作物保护和生态安全发挥了重要的作用。本文从印楝素国内外申请量趋势、区域分布、技术分支和主要申请人等方面进行专利分析,以梳理其技术发展过程。     

中职数学立体几何教学策略探讨

中职数学的教学要围绕挖掘和利用学生的潜能进行,提高学生学习的能力,为专业课的学习提供帮助。     

河蟹育肥做好“三合理”

河蟹在完成最后一次脱壳以后,再经过15～30天的培育就可以起捕上市了。这段时间一般称为河蟹育肥期,河蟹育肥期生产管理的好坏直接影响到河蟹品质和上市规格,对养殖效益的影响很大。怎样才能使上市的河蟹肥满度达到最佳?笔者通过自己的养殖经验和对大量养殖户的了解、分析,总结出必须要合理做好以下三方面的工作。     

动物科学专业《细胞分子生物学》实验课程教学改革实践——以绿色荧光蛋白基因表达实验为例

为提升细胞分子生物学实验课程的教学效果,贵州大学动物科学专业以开设的绿色荧光蛋白基因表达的综合性实验为例,从实验方案的设计与实施、实验课程教学改革效果、存在的问题与解决方法等方面展开分析,发现了连续性主题实验在加强学生实践操作和动手能力、培养学生科研思维、发现并解决问题及提高学生实践创新能力中的重要作用。同时,实验课程教学综合运用启发式和讨论式教学方法,达到了教学相长的良好效果,为细胞分子生物学实验课程的教学改革提供了较好的参考。