茶树修剪物对茶园土壤真菌群落多样性影响研究

茶树修剪物直接还田是茶园管理中常见的栽培措施。本文通过提取不同处理的土壤样品总DNA,以未处理土壤样品为对照,利用变性梯度凝胶电泳（PCR-DGGE）,研究添加茶树修剪物对茶园土壤真菌群落结构多样性的影响。结果显示,各处理土壤样品的DGGE图谱中发现许多公共条带,这些共有条带主要属于Pezizomycotina门、Basidiomycota门、Mortierellomycotina门和Mucoromycotina门;通过DGGE的条带数和亮度进行真菌群落多样性各项指标的比较,显示各处理的丰富度指数和香农-威纳指数均低于对照,表明茶树修剪物的降解产物和茶树本身固有的酚类物质对茶园的真菌群落有一定的抑制作用。     

中国茶组植物种质资源遗传多样性的RAPD分析

采用RAPD技术分析了中国茶组植物23个种质资源的遗传多样性。筛选的11个随机引物扩增出135条RAPD谱带, 其中有多态带123条, 平均多态性为91.11%。聚类分析表明, 广南茶与大苞茶之间的遗传距离最小(0.1378) , 汝城白毛茶与厚轴茶之间的遗传距离最大(0.8995) , 应用UPGMA聚类分析法构建了DNA分子系统树图, 并据此讨论了茶组植物的分类。     

地肤子皂苷抗变态反应作用及其量效关系的研究

4-AP致小鼠过敏性皮肤瘙痒模型和组胺致小鼠足肿胀试验,结果表明,地肤子总皂苷抗4-AP致小鼠过敏性皮肤瘙痒和组胺所致小鼠足肿胀,地肤子皂苷32 mg/kg剂量表现出药效,随着灌胃剂量的增大,其抗变态反应作用也逐步增大,150 mg/kg剂量几近完全抑制变态反应。地肤子总皂苷抑制速发型变态反应,其作用机制可能与稳定肥大细胞膜、减少组胺的释放及对抗过敏介质的致炎作用有关,而且其抗变态反应作用具有量效关系,32 mg/kg为其有效阈剂量,150 mg/kg为其良效剂量。     

苏北茶园管理技术（下）

（5）蓬面撒草。冬季霜冻和寒风直接侵袭茶树树冠,尤其是采摘蓬面最易受到冻害,在蓬面上适当撒草,可以使蓬面枝叶受到保护,减轻霜冻,缓解寒风侵袭,从而减少叶层水分散发,并减少蓬面的昼夜温差,起到良好的防冻效果。蓬面撒草时间在＂小雪＂前后进行,应做到盖而不严,以稀疏见到叶子为宜,使蓬面受光照叶片达30%－40%,物料以鲜松枝或稻草为佳。     

提高油茶座果率的实用技术探讨

油茶落果严重,是导致油茶产量低的主要原因之一,严重阻碍油茶产业的发展,影响经济效益。可从保护引放传粉昆虫,喷洒微量元素、生长调节剂,病虫害防治等方面采取措施,以提高油茶坐果率。     

茶树雌蕊总蛋白质双向电泳分离体系的建立

为建立一套适合茶树雌蕊总蛋白质分离的双向电泳体系,对茶树雌蕊总蛋白的提取方法、SDS-PAGE凝胶浓度、聚焦条件和IPG胶条pH范围等进行了比较优化。结果表明,TCA/丙酮-clean up kit法提取总蛋白,用17 cm pH 5~8 IPG胶条,13%SDS-聚丙烯酰胺凝胶进行分离,用考马斯亮蓝R250染色,可以获得清晰、分辨率高、重复性好的双向电泳图谱,共检测到约1200个蛋白点,主要分布在pH 5~8,相对分子量14~117 kD范围内,碱性蛋白得到有效分离,可以满足茶树雌蕊的蛋白组学分析和研究。     

论江苏省茶树品种的选育与推广

江苏省茶树品种选育应以绿茶为主，以“香、鲜、醇、早、抗、特”为品种选育目标，成分育种主攻高氨基酸和高香型两个方向；在江苏省茶树品种选育策略上，适宜采用系统选育法、有性杂交法、航天诱变育种、现代生物技术育种及辅助育种等方法。     

早生高产优质茶树新品种苏茶早的选育

苏茶早是经系统选育途径育成的早生优质抗寒茶树良种.品比试验结果表明:苏茶早春季新梢萌发期较对照品种福鼎大白早3 d;产量达到237.2 kg/667m2,较福鼎大白高17%;一芽二叶原料中茶多酚含量25.43%、氨基酸含量4.48%、咖啡碱含量3.95%,生化成分含量高,各成分比例协调,绿茶品质优异;抗寒抗旱性均强,适应性强;抗病虫鉴定结果与福鼎大白相当.     

叶面喷施氨基酸对茶叶中γ-氨基丁酸含量的影响

用不同种类、不同浓度氨基酸喷施茶树,采摘鲜叶并进行真空厌氧处理。比较分析不同处理对茶叶中γ-氨基丁酸(GABA)生物合成量、厌氧处理对茶样中各氨基酸含量以及施肥时间对GABA合成的影响。结果表明,茶树喷施氨基酸后,经真空厌氧处理茶鲜叶中γ-氨基丁酸含量明显上升,6种氨基酸对GABA合成的影响作用由高到低为谷氨酸、天冬氨酸、谷氨酰胺、苯丙氨酸、甘氨酸、丙氨酸。茶鲜叶中氨基酸含量尤其是谷氨酸、天冬氨酸及茶氨酸含量高低可以作为评价GABA合成作用的指标;叶面喷施谷氨酸5d时,茶鲜叶中氨基酸总量以及谷氨酸、天冬氨酸和茶氨酸增加总量最高。综合分析确定施0.5%谷氨酸叶面肥5d后,采摘一芽二、三叶鲜叶,常温下厌氧处理8h,是生产γ-氨基丁酸茶的理想方法。     

两种原核表达载体对CsPPO蛋白表达活性的影响

为了选择合适载体,获得稳定表达且具有高活性的可溶性茶树多酚氧化酶,本研究以茶树叶片为材料,克隆茶树多酚氧化酶基因（CsPPO）,切除含43个氨基酸和70个氨基酸的肽段后分别与pET32a载体、pMAL-c5X载体进行重组构建原核表达载体,分别命名为pET32a-CsPPO₄₃、pET32a-CsPPO₇₀、pMALc5X-Cs PPO₄₃、pMALc5X-CsPPO₇₀,利用E. coil Transetta（DE3）菌株进行表达,经SDS-PAGE电泳检验,pMAL-c5X载体表达的目的蛋白易于提取,大量出现在上清液中;而pET32a载体表达后蛋白则基本存在于沉淀中。利用邻苯二酚、ECG、EC 3种底物在410βnm处检测CsPPO蛋白活性发现,pMALc5X-CsPPO对不同底物反应时酶活性随时间增加均呈现明显“S”型变化,表明茶树PPO氧化儿茶素类的反应并不是匀速过程。pMALc5X-CsPPO₄₃比活力比pMALc5X-CsPPO₇₀的高,其中pMALc5X-CsPPO₄₃与EC反应时酶比活力最高,最大比活力为1.45×10⁶β U·mg^-1。因此,可利用pMALc5X-CsPPO₄₃合成工业用PPO,为进一步研究其与儿茶素的反应机理,利用体外酶法高效获得茶黄素奠定基础。