茶树八氢番茄红素脱氢酶cDNA全长克隆与表达分析

八氢番茄红素脱氢酶是类胡萝卜素生物合成途径的关键酶之一。本实验采用3’/5’RACE和RTPCR技术成功扩增出茶树八氢番茄红素脱氢酶基因（PDS）的3’端和5’端序列,序列拼接获得全长cDNA序列,命名为CsPDS,并将其登录至GenBank,登录号KF646537。经生物信息学分析,所得基因cDNA序列全长为2295 bp,开放阅读框（ORF）1749 bp,编码582个氨基酸,预测分子量约为64.86 kDa,理论等电点（PI）为6.77,属于亲水性蛋白。该基因编码的氨基酸序列与柿树PDS序列的同源性达到87%,多序列比对表明茶树PDS具有高度保守区域,基于邻接法的进化树显示与柿树、葡萄的亲缘关系最近。实时荧光定量PCR分析结果显示,CsPDS在‘黄金芽’体内表达没有受抑制,表明‘黄金芽’黄色白化可能不是在CsPDS基因转录水平异常而引起。     

茶树催发素对茶树新梢化学成分和品质的影响

于春茶萌发前用茶树催发素喷施茶树树冠，分析喷施后茶树新梢化学成分含量和组成的变化。结果表明，供试的３个茶树品种喷施茶树催发素后，鲜叶化学成分向有利于绿茶品质的方向变化。氨基酸提高１６．８％，维生素Ｃ提高２０．４％，咖啡碱降低１７．４％，茶多酚降低９．４６％，酚氨比下降１９．６％，儿茶素品质指数提高１４．５％。差异均达到显著水平。鲜叶的内质评分提高５．８％     

茶树农杆菌转化系统和基因枪转化系统的优化

在用农杆菌浸染前,将茶树外植体预培养在含有PVP(polyvinylpyrrolidone,16g/L)的预培养基上2-3d可提高转化频率。优化后的茶树基因枪转化体系,即制弹程序:60 mg/1ml钨粉悬浮液10 l中加入1.6 l质粒DNA(1 g/l),再分别加入0.1 mol/L的亚精胺4 l,2.5 mol/L 的CaCl2 15 l,最后定容至48 l;每次轰击上样量为8-10 l。基因枪转化后抗性筛选2个月,抗性愈伤组织存活率为5.0%~12.1%。     

茶树根系HGMR基因克隆及表达分析

采用SSH技术分析了VA菌根处理后福鼎大白茶根系基因差异表达情况,获得了差异序列,序列比对显示,在上调表达序列中包含了3-羟基-3-甲戊二酸单酰辅酶A还原酶（3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A reductase,HMGR）。采用RACE技术获得了HGMR基因全长序列,HGMR基因长2 420 bp,具有1 773 bp开放阅读框（163^rd~1935^th）,编码590个氨基酸。分子生物信息学分析表明,HGMR蛋白分子量约63.5 kD,等电点为6.8,定位于线粒体膜或者内质网膜。研究还显示,HGMR在茶树叶片中表达强度存在明显的品种差异,同时,HGMR对生物性和非生物性胁迫均有明显响应。     

发根农杆菌介导的茶树发根高频诱导与遗传转化

以两种野生型发根农杆菌菌株、三种共培养培养基和六种外植体为试材,建立了茶树发根高频诱导体系,最高发根诱导频率达30%以上。最佳发根诱导体系为：OD₆₀₀为0.5~0.8的发根农杆菌菌液侵染已培养60~70βd苗龄无菌苗茎段10~50βmin,在添加100βmmol/L乙酰丁香酮的YMB固体培养基上共培养2βd,在含500βmg/L头胞噻肟钠的MS培养基上诱导发根。发根在不含激素的LG₀培养基上生长迅速,产生大量侧枝和根毛。PCR证实,发根农杆菌Ri质粒T-DNA的rolA、rolB和rolC基因已经插入到发根基因组DNA中。应用此发根诱导体系,以含携带Bt基因的双元载体质粒pCAMBIA2301的发根农杆菌15834,侵染茶树外植体诱导出发根,PCR和GUS组织化学染色证实外源基因已经插入到基因组DNA中并获得表达。     

中国与韩国市售炒青绿茶品质特点比较研究

从韩国和中国市场收集的炒青绿茶样品,通过感官品质审评、化学成分和茶汤色差分析,比较两国绿茶的品质特点和化学成分含量差异。结果显示,两国炒青绿茶的感官品质无显著差异;韩国市场销售的炒青绿茶样含水量和咖啡因含量低于中国绿茶,而氨基酸和水浸出物含量高于中国绿茶。韩国绿茶样品汤明度高于中国绿茶,但色度比中国绿茶样品低。     

安吉白茶阶段性返白过程中的生理生化变化

对安吉白茶春季返白过程中保护性酶活力及其生化成分的变化作了检测,结果表明,安吉白茶芽梢在早春返白过程中,过氧化物酶（ＰＯＤ）活力升高,而超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）Ｄ、过氧化氢酶（ＣＡＴ）活力降低,脂质过氧化产物丙二醛（ＭＤＡ）、叶绿素（Ｃｈｌ）、儿茶素、咖啡因等含量则下降,芽梢复绿后,ＰＯＤ活力降低,ＣＡＴ、ＳＯＤ活力回叶绿素,ＭＤＡ、儿茶素和咖啡因含量也上升。     

茶树快速育苗方法研究

针对茶树无性系育苗周期长以致不适应茶产业快速发展需求的问题,本研究开发了一种基质育苗技术,将育苗周期由传统的14-18个月缩短到2个月,加速茶树育种进程.同时,对40个不同茶树品种的扦插发根特性进行了比较研究,证明'浙农121'发根最快,而'竹枝春'发根最困难,为品种推广提供有用资料.     

中草药复合饲料添加剂的研究与应用

随着畜牧业生产的发展,畜牧科技人员已越来越重视饲料添加剂在畜牧饲养业上的作用,使饲料添加剂的研究与应用日新月异。特别是当前矿物质、常微量元素、化学物质等产品在市场到处皆有,牲畜长期应用后,均能使人畜造成直接或间接的不良副作用的情况下,研究中草药饲料添加剂是摆在畜牧科技人员面前的当务之急。因中草药届天然绿色产品,含有丰富的蛋白质、维生素、矿物质和生物硷及忒类,还有未知促长因子等成分,具有营养保健、抗病促长等多种功能,且对机体基本无残留、无抗药性和耐药性,再适当补充必需微量元素,可以制成一种具有中国…     

茶树原生质体制备体系的研究进展

原生质体作为植物基础研究的重要材料,近年来得到了广泛的应用.但茶树原生质体研究极少,本文简要回顾了植物原生质体制备的国内外发展历程,总结了茶树原生质体的研究现状,结合原生质体制备体系的各个环节讨论了现有茶树原生质体制备体系中存在的问题,并为改良茶树原生质体制备体系提出了一些建议.