细粒棘球绦虫抗原B的研究进展

细粒棘球绦虫抗原B(AgB)是血清学诊断棘球蚴病最重要的抗原,也是目前研究最多的抗原之一。深入研究抗原B对棘球蚴病的血清学诊断、流行病学研究、综合防控和疫苗的研究开发具有重要的意义。文章针对近年来关于抗原B的分子生物学特征、免疫学特性及在人和动物等中间宿主的血清学诊断方面的研究进展进行综述。     

天然放牧条件下性别对苏尼特羊肌肉组织中胆固醇、脂肪酸含量和血清生化指标的影响

试验旨在研究不同性别的苏尼特羊血清生化指标及肌肉组织中脂肪酸与胆固醇含量存在的差异.试验选择在天然草场放牧的8月龄羯羔、母羔各8只,禁食12h、禁水2h进行屠宰,测定背最长肌、臂三头肌、股二头肌、臀肌中的脂肪酸、胆固醇等指标.结果 显示,母羔血清中白蛋白(ALB)和钙(Ca)含量显著高于羯羔(P＜0.05),而碱性磷酸...     

不同发酵温度对液体发酵饲料营养成分、挥发性脂肪酸和活菌数的影响

文章旨在研究不同发酵温度对液体发酵饲料营养成分、挥发性脂肪酸和活菌数的影响。试验分别设定20、25、30℃三个发酵温度,每个发酵温度设置6个重复,厌氧发酵24?h。试验结果表明,随着发酵温度的升高,饲料中粗蛋白质含量显著提高（P <0.05）,粗纤维含量无显著变化（P> 0.05）,但总能显著降低（P <0.05）;25和30℃发酵时,液体饲料中乳酸含量显著高于20℃组（P <0.05）,但25和30℃之间差异不显著（P> 0.05）;而挥发性脂肪酸方面,25和30℃发酵时,饲料中乙酸和丙酸含量显著高于20℃发酵组（P <0.05）,而25和30℃之间的丙酸含量差异不显著（P> 0.05）,乙酸含量25℃发酵组高于30℃发酵组（P <0.05）。丁酸含量则随发酵温度升高而显著降低（P <0.05）;液体饲料中的乳酸菌和酵母菌活菌数显著升高（P <0.05）,其中25和30℃发酵组酵母菌活菌数无显著差异（P> 0.05）;液体饲料中均未检出沙门氏菌和大肠杆菌。     

SPF种猪场通过冷冻精液方式引种试验

为了评估冷冻精液技术作为SPF猪引种方式的可行性,北京市SPF猪育种管理中心通过冷冻精液方式进行一次SPF猪引种工作,通过冷冻精液和常温精液对比,冷冻精液组母猪窝总产仔数和窝产活仔数分别比常温精液组低10.7%和15.5%(P<0.01),窝产死胎数比常温精液组高0.38头(P<0.01),分娩率比常温精液组低10.77个百分点(P<0.05)。虽然冷冻精液和常温精液配种成绩还有差异,但是通过冷冻精液方式使北京市SPF猪育种管理中心成功引入102头待选后备猪。试验说明冷冻精液技术可以在种猪场和繁育机构进行推广。     

抗犬瘟热病毒VHH抗体噬菌体库的构建与筛选

为构建特异性犬瘟热病毒（CDV）的纳米抗体库,获得抗CDV的VHH抗体,本试验利用CDV免疫羊驼,四免后采集外周血淋巴细胞,提取总RNA反转录为cDNA,利用巢式PCR扩增纳米抗体序列。将目的片段连接至pComb3x噬菌体展示载体,并电转至TG1宿主菌,挑取40个克隆进行菌液PCR验证,随机挑选13个阳性单克隆进行测序,计算抗体库库容量,加入辅助噬菌粒拯救获得的噬菌体展示抗体库。经过3轮淘选,富集对CDV结合力高的噬菌体。利用毕赤酵母系统表达两株结合力高的噬菌体,经Ni柱纯化后,利用ELISA进行噬菌体结合力的鉴定。结果表明,四免后羊驼血清效价达1：25 000,达到建库要求,构建的噬菌体展示文库库容量达3.41×10⁹ PFU。经过3轮淘选,特异性抗体库经稀释100倍后,ELISA检测仍为阳性,表明特异性结合CDV的噬菌体得到明显的富集。ELISA结果表明,两株纯化的纳米抗体与CDV的反应性显著高于对照组。以上结果提示,本研究成功筛选出2株特异性结合CDV的VHH抗体,为VHH抗体在犬瘟热的诊断和治疗方面的应用奠定了基础。     

利用酵母双杂交技术筛选和鉴定非洲猪瘟病毒E120R蛋白的互作宿主蛋白

【目的】 探讨非洲猪瘟病毒（African swine fever virus,ASFV）衣壳蛋白E120R在病毒感染中的作用,确定与E120R蛋白互作的宿主蛋白。【方法】 将ASFV分离株CADC_HN09株E120R基因合成并克隆于pGBKT7表达载体,获得pGBKT7-E120R诱饵质粒,同时构建E120R基因截短表达质粒pGBKT7-E120R-1（1－61位氨基酸）和pGBKT7-E120R-2（62－122位氨基酸）。经毒性和自激活性检测后,通过酵母双杂交技术对骨髓巨噬细胞（BMDMs） cDNA均一化酵母文库进行初步筛选,以获得与ASFV E120R蛋白互作的蛋白。通过NCBI数据库进行序列比对并经免疫共沉淀试验验证,确定互作的宿主蛋白。筛选的宿主蛋白经webgenstal在线分析网站初步进行GO功能和KEGG通路富集分析,以确定所筛选的宿主蛋白参与的生物过程与信号通路。【结果】 诱饵质粒pGBKT7-E120R-2无毒性和自激活性,可用于文库筛选。通过酵母双杂交系统从BMDMs cDNA均一化酵母文库中初步筛选到46个阳性克隆并进行回转验证,经NCBI数据库序列比对分析共获得29个宿主蛋白。免疫共沉淀试验结果显示,多聚胞嘧啶结合蛋白2（PCBP2）和干扰素刺激基因15（ISG15）均与E120R蛋白存在互作。GO功能富集分析表明,所筛选的宿主蛋白可参与代谢过程、生物调节、应激反应等生物过程;KEGG通路富集分析表明,这些宿主蛋白可参与抗原呈递、铁死亡和坏死性凋亡等多条信号通路。【结论】 ASFV E120R蛋白可与宿主免疫应答、细胞死亡等信号通路相关的多种宿主蛋白互作,为进一步研究ASFV E120R蛋白在病毒感染过程中的作用提供了重要理论依据。     

羊C3d基因与细粒棘球蚴EG95s基因在杆状病毒中的串联表达

本研究通过构建含有3拷贝羊C3d基因与细粒棘球蚴EG95s基因的重组杆状病毒,旨在通过昆虫细胞表达EG95-(C3d)3重组融合蛋白,为原核表达和真核表达EG95-(C3d)3重组融合蛋白的免疫效果的比较奠定了基础.将细粒棘球蚴EG95s基因与3拷贝羊C3d基因串联,插入pTarget载体,获得重组质粒pTarget-EG95-(C3d)3,利用BamH Ⅰ和Xba Ⅰ双酶切位点将目的基因EG95-(C3d)3克隆至Bac-to-Bac系统的转移载体pFastBac-Hta中,获得pFastBacHta-EG95-(C3d)3重组质粒,将该重组质粒转化含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac中进行转座重组,获得携带3拷贝羊C3d基因与细粒棘球蚴EG95s基因的重组转座子rBacmid-EG95-(C3d)3,转染Sf9昆虫细胞后获得EG95-(C3d)3重组杆状病毒,并表达EG95-(C3d)3重组融合蛋白,采用SDS-PAGE和Western blotting进行重组蛋白的鉴定.同时利用昆虫细胞表达蛋白对羊棘球蚴病特异性抗体进行检测.结果表明,获得了EG95-(C3d)3重组杆状病毒,且EG95-(C3d)3重组融合蛋白在Sf9昆虫细胞得到了正确表达,大小约为132 ku,Western blotting鉴定结果显示表达的EG95-(C3d)3重组融合蛋白能与细粒棘球蚴阳性血清产生特异性反应,表明EG95-(C3d)3基因表达产物具有免疫活性.同时表达蛋白对羊棘球蚴病特异性抗体有良好的敏感性.EG95-(C3d)3基因在昆虫细胞获得表达,为原核表达和真核表达EG95-(C3d)3重组融合蛋白的免疫效果的比较,及细粒棘球蚴病的高效检测方法的建立奠定了基础.     

壳寡糖对奶牛外周血单个核细胞抗氧化功能的促进作用

本试验以奶牛外周血单个核细胞(PBMC)为模型,旨在研究不同剂量壳寡糖(COS)对细胞活力、抗氧化功能和炎症因子含量的影响.采用单因素随机试验设计,将体外分离得到的PBMC随机分为5组,每组6个重复,对照组(CON组)细胞培养液中不添加COS;COS40、COS80、COS160和COS320组在细胞培养液中分别添加4...     

东社所:应用绩效考核 提升供电所管理水平

东社乡供电所,隶属于国网山西滨河供电公司,成立于2002年7月,坐落于太原市万柏林区东社村太原科技大学旁,现有员工10人,下设一长三员两个班组。担负着两个街办13个村9153户客户的用电服务任务,其中：居民客户8796户、动力客户357户,服务着太原科技大学、中车集团、保利百合等大型企业客户。截至2017年末,东社乡供电所售电量完成74．66GWh,户均配变容量为2．45kVA,10kV线损率4．78％,低压线损率3．32％,低压合格台区占比达到100％。2017年1月被山西省电力公司授予“四星级供电所”称号;2017年12月被山西省电力公司授予“全能型供电所”称号。