两种根癌土壤杆菌介导的荧光素酶在植物体内表达分析

根据报道的荧光素酶(Luciferase,Luc)基因设计引物,PCR扩增获得Luc基因,经BamH I和Pst I酶切连接到栽体pCHF3上,成功构建植物表达栽体pCHF3-Luc.将pCHF3-Luc分别转入根癌土壤杆菌株EHAl05和LBA4404细胞内,利用根癌土壤杆菌渗入法导入本氏烟和大麦,荧光检测仪内检测本氏烟和大麦叶片中瞬时表达的Luc活性.结果表明:两种根癌土壤杆菌介导的Luc可以在本氏烟中成功表达,而在大麦中不能表达;利用根癌土壤杆菌渗入法在本氏烟中表达外源基因时,EHA105菌株优于LBA4404菌株.     

柑桔黄龙病病原16S rDNA克隆、测序及实时荧光PCR检测方法的建立

克隆并测定了中国柑桔黄龙病病原16SrDNA基因序列，经同源性比较，表明属于柑桔黄龙病菌(Liberobacter asiaticum)亚洲种中一个新株系(中国厦门株系)。依据获得的16SrDNA特异序列，建立了柑桔黄龙病病菌检测的实时荧光PCR方法，并应用此方法对柑桔样品进行了检测。结果显示，该检测方法具有快速、特异、敏感、重复性好等优点。该方法为柑桔黄龙病的检测，特别是早期诊断、检疫和病害的综合治理奠定了基础。     

深圳局截获大豆细菌性疫病菌

2010年11月,深圳检验检疫局动植中心植验室对一批加拿大进口大豆样品进行分离培养后,其生理生化BIOLOG测定、16S rDNA序列扩增测序、特异性引物PCR扩增电泳以及致病性试验结果表明为大豆     

斑马片病入侵中国的风险分析及管理对策

根据国际植物检疫措施标准(ISPM)第2号有害生物风险分析框架和第11号检疫性有害生物风险分析程序,从斑马片病的国内外分布状况、潜在危害性、受害栽培作物的经济重要性、传播扩散的可能性及危险性管理难度5个方面对其在中国的风险性进行了多指标方法分析。结果表明,斑马片病在中国的综合风险值R为2.48,其病原Candidatus Liberibacter solanacearum为高度危险的有害生物。针对该病提出了相应的风险管理对策。     

利用双重PCR-DHPLC技术检测水稻细菌性谷枯病菌的研究

本研究建立了一种应用双重PCR结合变性高效液相色谱技术(polymerase chain reaction-denatured high performanceliquid chromatography,PCR-DHPLC)检测水稻细菌性谷枯病菌的方法。根据水稻细菌性谷枯病菌ITS序列(internal tran-scribed spacer)和gyrB基因序列,设计两对特异性PCR检测引物,对水稻细菌性谷枯病菌株和非水稻细菌性谷枯病菌株分别进行PCR-DHPLC及双重PCR-DHPLC检测,同时进行检测灵敏度及阳性菌株的同源性分析。结果显示,PCR-DHPLC检测的特异性强,灵敏度为菌浓度4×102cfu/mL,7株水稻细菌性谷枯病菌PCR产物同源性一致。该方法能简便、灵敏、高特异性地对水稻细菌性谷枯病菌进行高通量的自动化检测。     

植原体病害研究概况

植原体原名类菌原体,是一类重要的植物病原物,归属于细菌,无细胞壁,专性寄生于植物韧皮部。在菌体大小、结构以及遗传进化上与菌原体、螺原体十分相似。世界范围内植原体已引起千余种植物病害,主要表现为丛枝、黄化、节间缩短等。植原体病原主要依靠吸食植物韧皮部的昆虫介体传播,如叶蝉、木虱等。本文主要对植原体的病原学、遗传进化与基因组、致病机理以及防控进行综述。     

山东省黄瓜绿斑驳花叶病毒病田间调查与检测鉴定

2008～2011年在山东省葫芦科作物主产区进行了黄瓜绿斑驳花叶病毒病的田间调查,并对疑似样品进行DAS-ELISA和RT-PCR检测.结果发现,该病害每年在山东省均有不同程度的发生,已给山东省葫芦科作物的生产造成严重威胁,必须采取切实可行的措施,严防其扩散传播,保护农业生产安全.     

马铃薯斑纹片病菌检测技术研究进展

马铃薯斑纹片病是茄科、伞形科作物一种重要病害,其病原为Candidatus Liberibacter solanacearum,快速、灵敏、特异的检测技术对该病害的发现、预警和防治都具有重要意义。本文综述了国外关于马铃薯斑纹片病菌检测方法的研究进展,重点介绍了以PCR、实时荧光PCR、多重PCR、LAMP等为代表的分子生物学检测技术在马铃薯斑纹片病菌检测中的应用,并分析了各种技术的优缺点,为该病原菌的检测及防控技术研究提供参考。     

玉米粗缩病发生与防治

玉米粗缩病是目前普遍发生的一种灰飞虱持久性传播病毒病。本文描述了该病发病症状、越冬寄主、传播途径,提出了一套有效防治模式;耐病品种十防毒杀虱剂(病毒必克+吡虫啉),喷雾两次,综合防效可达到90%左右,防治要点是在灰飞虱迁飞高峰及时喷药,病毒必克与吡虫啉须用时混配,不宜久置。     

密执安棒形杆菌的DNA条形码基因筛选与评价

密执安棒形杆菌是一种重要的植物病原细菌,其包含了能引起不同植物病害的5个亚种。近年来迅速发展起的DNA条形码技术给植物病原细菌快速准确的检测鉴定提供了新思路,本文对棒形杆菌属的4条候选DNA条形码基因进行PCR扩增测序,并从扩增及测序成功率、种内及种间遗传距离、barcoding gap及NJ树等几个方面进行比较,结果表明gyr B基因最适合进行该属内种及亚种的区分,cpn60基因可作为该属分类鉴定的有效补充。