两种一步法RNA提取试剂的比较

RNA的提取在生物医学研究和临床检测上应用广泛。本文分别用进口Invitrogen公司生产的以及我们自己研制的一步法RNA提取试剂，提取大肠杆菌RNA、鸡肌肉组织RNA和尿囊液RNA，通过核酸电泳和荧光定量RT-PCR进行比较。结果表明用我们自己研制的和进口的试剂提取的RNA都不含有DNA；这些RNA都可以作为模板进行RT-PCR检测，并且在数量上相互之间没有明显差异。说明我们自己研制的一步法RNA提取试剂可以取代进口试剂。此外，本文还讨论了此类试剂一些评定方法。     

结核分枝杆菌分泌蛋白ESAT-6、CFP10基因的克隆、鉴定及其原核表达

以人型结核分枝杆菌 H37RV株基因组 DNA为模板 ,应用 PCR法对 ESAT- 6和 CFP10基因进行扩增 ,产物经纯化后与载体 PMD18- T连接、转化及酶切鉴定 ,亚克隆到原核表达载体 PGEX- 6 P- 1,构建原核重组表达质粒 ,转化入大肠杆菌 BL2 1中 ,以 1mmol/L IPTG诱导 ,进行 SDS- PAGE电泳。结果表明 ,ESAT- 6和 CFP10基因表达的融合蛋白相对分子质量分别为 32 0 0 0和 36 0 0 0 ,与实测相符。重组结核杆菌分泌蛋白 ESAT- 6和 CFP10的成功表达为结核病诊断及重组疫苗的构建打下了基础     

“蛋禽安”免疫罗曼蛋种鸡免疫保护期的测定

“蛋禽安”鸡新城疫、传染性支气管炎、产蛋下降综合征三联油乳剂灭活苗，瑞普(保定)生物药业有限公司生产，批号030205。     

猪胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白(OMP)5′末端保守区基因的克隆、表达及其免疫活性研究

以猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型25-4株基因组DNA为模板,PCR方法扩增外膜蛋白(OMP)5′末端保守区基因片段(OMPc),酶切及核苷酸序列分析鉴定后,与原核表达载体质粒pGEX-6P-1进行连接,构建成重组表达载体pGEX-OM-Pc,转入大肠杆菌BL21中,以IPTG进行诱导,SDS-PAGE电泳分析发现,转化了重组质粒的菌株所表达的融合蛋白相对分子量为34 kD,与实际预测相符,命名为GST-OMPc.GST亲和层析柱进行纯化,ELISA方法对纯化蛋白进行检测.结果表明:纯化蛋白GST-OMPc能够与兔抗猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型的阳性血清反应.OMPc蛋白的成功表达为其功能的研究打下基础.     

四川猪链球菌Ⅱ型分离株生物学特性的初步研究

猪链球菌Ⅱ型是导致许多国家猪链球菌病的主要病原，自90年代晚期江苏发生猪链球菌Ⅱ型感染以来已成为我国引起人畜共患病的一种重要的新病原菌。最近在四川省部分地区发生了不明原因的猪源人畜共患病，且具有较高的死亡率。我们从病死猪的病料中成功分离到三株猪链球菌分离株，经革兰氏染色、生化试验、血清凝集试验和PCR鉴定，最终证实为猪链球菌Ⅱ型。通过对其毒力因子进行鉴定．结果发现MRP和EF均为阳性。进一步的药敏试验证实：分离菌株对氨苄青霉素、先锋霉素Ⅳ、羧苄青霉素、复方新诺明、头孢肤肟等抗菌药高度敏感。     

基于地理探测器的陕南地区气候变化风险应对感知影响机理

以陕南地区为案例,基于2015—2019年公众气候变化风险应对感知大规模问卷调查数据,分别从基本状况、人地观与风险观、环境感知和应对行为4个方面,借助地理探测器方法揭示了气候变化应对风险感知特征与影响机理。结果表明,应对效果感知因子的因子解释力最大(0.979)。气候变化风险应对效果感知和风险观念交互后因子影响力最强,达1.000。气候变化原因感知、气候变化问题关心度、应对效果感知、产业结构调整感知、节能减排效果感知和居住环境对气候变化风险应对感知存在明显的控制作用。     

SPME-GC/MS联合分析法测定食用菊花花朵挥发性成分

采用固相微萃取技术萃取食用菊花花朵挥发性成分,利用气相色谱-质谱联用技术进行分析,并用峰面积归一化法得出各组分的相对百分含量。结果表明,共鉴定出51种挥发性成分,包括烯类、酯类、醇类,还有少量酸、杂环类和烷类物质,其中主要成分为单萜类化合物α-蒎烯、β-月桂烯、α-松油烯、β-蒎烯、γ-松油烯等,相对含量分别为74.04%、5.24%、3.96%、3.44%、2.01%,共占总相对含量的88.69%。     

关键工序对造纸法再造烟叶主要化学成分的影响

为研究生产过程中关键工序对造纸法再造烟叶主要化学成分(常规成分和主要细胞壁物质)的影响,采用连续流动分析法和洗涤剂法分析在制品固形物中主要化学成分的变化规律。结果表明:烟梗的钾、氯和纤维素含量高于烟末,总碱和半纤维素含量低于烟末,针叶木、阔叶木的主要成分为纤维素和半纤维素。洗梗会降低烟梗中61%～77%的常规成分,且钾、氯的溶出量高于水溶性总糖和总植物碱,提取段可溶物主要在1、2级提取过程中溶出。在制浆抄造工序,浆料中常规成分溶出较少,制浆会降低半纤维素含量,抄造过程中约19%浆料流失。涂布能提高样品中常规成分含量,降低细胞壁物质含量,是调控产品感官质量的主要工序,涂布后工序对在制品的主要化学成分影响较小。控制关键工序的主要化学成分对调控产品质量具有重要意义。     

基于TM影像的黄陵县土地利用变化动态监测

以1987年和2002年两期TM影像为信息源,应用计算机自动识别分类与GIS空间分析相结合的方法,提取了黄陵县不同时期的土地利用现状信息及其动态变化。结果表明:研究区森林覆盖率高,林地占区域土地总面积的70%以上;耕地面积较小,占地比例不到7%。1987年至2002年,耕地和草地面积明显减少,园地增加突出,林地、居民点及工矿用地略有增长,其中面积变化最大的是耕地,减少111.13 km2;变化率最大的是园地,达到329.44%。     

猪瘟E2灭活疫苗与活疫苗免疫效果比较

猪瘟又称经典猪瘟或古典猪瘟,是猪的一种急性、发热接触性传染病,在自然条件下只感染猪.该病流行范围很广,而且致死率极高,给世界养猪业造成严重危害.目前,猪瘟流行地区或国家主要采用接种C株弱毒疫苗的方法作为预防猪瘟的主要策略,但接种弱毒疫苗的传统预防控制方法无法区别疫苗免疫抗体和自然野毒感染抗体,为了采用血清学方法净化消灭...