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EPSP 合成酶的特性及新抑制剂的研究进展 总被引:4,自引:0,他引:4
概述了EPSP 合成酶的生理作用。高等植物前体EPSP 合成酶进入叶绿体后, 经剪切而成成熟EPSP 合成酶并定位于叶绿体内质膜上; EPSP 合成酶的三维结构上存在三个活性区域, 改变活性区域的氨基酸残基可对草甘膦产生抗性, 同时表明了酶与草甘膦的结合位点; 不同生物的EPSP 合成酶有高的同源性。EPSP 合成酶催化底物反应机理为: PEP 首先与酶形成过渡态, 而后和S3P 形成缩酮四面体, 最后生成EPSP。草甘膦与EPSP 合成酶、EPSP形成三元复合物而阻断了EPSP 合成酶的催化作用; 以EPSP 和S3P ·glypho sate 为分子模型, 设计合成的化合物对EPSP 合成酶的活性有抑制作用。 相似文献
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克隆内蒙古白绒山羊胸腺素β4基因并稳定转染胎儿成纤维细胞 #br# 总被引:1,自引:1,他引:1
【目的】克隆内蒙古白绒山羊胸腺素β4(thymosin beta 4,Tβ4) 基因,构建皮肤特异性表达载体,转染内蒙古白绒山羊胎儿成纤维细胞,筛选出稳定表达红色荧光蛋白并可用于核移植的转基因细胞克隆。【方法】通过RT-PCR克隆Tβ4基因cDNA序列,然后与KAP6-1基因启动子片段以及红色荧光蛋白表达元件连接构成Tβ皮肤特异性表达载体pCDsRed-KT。外源表达载体以lipofectamineTM 2 000介导转染胎儿成纤维细胞,通过G418筛选获得稳定转染的细胞克隆。PCR鉴定外源基因在细胞基因组中的整合。【结果】 克隆了内蒙古白绒山羊Tβ4基因,cDNA全长142 bp,其中包含135 bp的完整ORF,编码44个氨基酸残基,氨基酸序列与已报道的牛胸腺素β4(XM002706880.1)同源性为100%。测序显示构建的表达载体pCDsRed-KT中,Tβ4基因正确连接在皮肤特异性启动子KAP6-1下游,顺序连接CMV启动子和红色荧光蛋白基因,载体构建正确。PCR检测显示外源KAP6-1启动子和Tβ4基因整合到细胞基因组中,筛选出的转基因细胞高效表达红色荧光蛋白。【结论】克隆得到内蒙古白绒山羊Tβ4基因并构建成功其真核表达载体,可稳定转染绒山羊胎儿成纤维细胞,为下一步通过核移植方法获得转胸腺素β4基因绒山羊提供了条件。 相似文献
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中华寿桃多酚氧化酶的特性研究 总被引:5,自引:0,他引:5
【目的】对分离纯化后的中华寿桃果肉多酚氧化酶的酶学性质进行研究,探讨中华寿桃果肉褐变机理。【方法】以邻苯二酚为作用底物,用分光光度法在420 nm下测定不同pH、反应温度、底物浓度条件下桃果肉的多酚氧化酶(PPO)活性。【结果】中华寿桃果肉66 kD的PPO最适pH约为6.5,最适反应温度为60℃左右,该酶对温度有较强稳定性;该酶最适作用底物为绿原酸、儿茶酚和对羟基苯甲酸;FeSO4、EDTA和抗坏血酸等化合物可以抑制PPO活性,CaCl2、CuSO4和MnSO4等则起促进作用。【结论】该酶耐热能力强,适度低温、酸性条件、抗坏血酸处理等可以抑制该酶活性。 相似文献
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徐芳菲冯惠柳李蕾初赛君于晶娄子恒曹志强 《人参研究》2021,33(5):15-18
目的建立黑三七中总皂苷的含量测定方法。方法采用紫外分光光度法在544nm波长处测定黑三七中总皂苷的含量。结果10批黑三七中总皂苷的含量为3.24%~6.37%;方法学研究结果表明,本方法总皂苷质量在10.62~106.20μg范围内,线性关系良好,具有较好的精密度、重复性和准确度。结论总皂苷作为黑三七中的主要活性成分,含量较高,是黑三七质量评定的重要依据。本文建立的含量测定方法简便易行、专属性强、准确可靠,为黑三七的质量要求提供了重要的依据。 相似文献
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