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试验旨在研究猪蛋白质二硫化物异构酶(protein disulfide isomerase A4,PDIA4)基因的密码子使用特性及其与其他物种密码子使用的差异。试验以香猪子宫组织为试验材料,采用RT-PCR方法扩增获得猪PDIA4基因,参考从NCBI数据库中下载的18个不同物种PDIA4基因序列,对猪PDIA4基因的密码子使用特性及其与其他物种密码子的使用差异和进化关系进行分析,同时对猪PDIA4基因与4个模式生物密码子使用偏性进行比较。结果表明,猪PDIA4基因编码区长1 941 bp,共编码646个氨基酸。与NCBI数据库公布的野猪PDIA4基因(GenBank登录号:NM_001267834.1)的相似性达99%。猪PDIA4基因偏好使用G/C结尾的密码子,27种密码子为猪PDIA4基因的偏好密码子(RSCU1),其中使用频率最高的前3个密码子分别为CTG(RSCU=3.69)、GCC(RSCU=2.31)和CGC(RSCU=2.29)。比较19个物种PDIA4基因发现,不同物种间PDIA4基因的有效密码子数(ENc)、密码子适应指数(CAI)、GC含量以及T、C、A、G、G+C在密码子第3位含量(T3s、C3s、A3s、G3s、GC3s)均存在差异,且密码子偏好以G/C结尾;聚类分析发现,基于CDS序列的系统进化树更符合19个物种的真实分类系统。在密码子使用频率上,猪PDIA4基因与小鼠基因组间密码子使用偏好程度更为接近,故小鼠更适合作为猪PDIA4基因的遗传转化和异源表达的受体系统。 相似文献
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为建立一种快速检测猪圆环病毒2型(PCV2)抗体的方法,本研究通过基因合成PCV2的Rep编码序列,将其克隆至pET-28a(+)并在E.coli中表达,表达的重组Rep蛋白经Ni2+亲和纯化.采用纯化的目的蛋白作为包被抗原,建立检测PCV2 Rep蛋白抗体的间接ELISA方法.结果表明最佳抗原包被浓度为200 ng/孔,血清和二抗最佳反应时间分别为1h和30 min.该方法具有良好的特异性和敏感性,与韩国金诺公司试剂盒的符合率为81.4%,表明建立的ELISA方法可以用于PCV2的流行病学检测. 相似文献
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江河源区草地资源现状及其可持续发展 总被引:1,自引:0,他引:1
在分析青海省江河源区草地资源现状的基础上,进一步剖析了造成该区域草地生态环境恶化的综合因素,提出了合理利用和保护天然草地,优化草地生产结构,加强基础设施建设,建立饲草料生产基地,遏制草地退化,使草地生态进入良性演替,实现江河源区草地资源可持续利用和草地畜牧业可持续发展的对策。 相似文献
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肉鸡传染性关节炎又称病毒性腱鞘炎,是一种由呼肠弧病毒引起的传染病。发生于2~7周龄的肉食鸡群,以损害关节滑膜、腱鞘和心肌为特征。病鸡关节肿大,腱束变粗,跛行,发病率高,残淘率高,饲料利用率下降,生长停滞,造成很大的经济损失。现将诊治方法介绍如下: 相似文献
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集约化猪场10套猪瘟免疫程序效果观察 总被引:1,自引:0,他引:1
<正>猪瘟(CSF)是由猪瘟病毒(CSFV)引起的烈性传染病,目前主要是通过疫苗接种进行预防。现阶段,我国疫病流行相当复杂,猪场面临更多、更为复杂的生物安全风险,猪群需要接种的疫苗种类越来越多,加上养殖规模和密度较大,如何制定合理的群体免疫程序是取得良好免疫效果的关键([1-3])。本文以规模化的猪繁殖与呼吸综合征阴性种猪场为依托,通过对处于不同母源抗体水平的仔猪采用不同的猪瘟免疫程序,结合实时猪瘟特异性抗体检测,以期找到一 相似文献
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用纯化的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)A06株病毒抗原免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合.经间接ELISA方法筛选,有限稀释法克隆,获得4株稳定分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为3D12、4E10、6E2和7G6.其细胞培养上清效价分别为1:256、1:512、1:512和1:256,小鼠腹水效价分别为1:1.024×106、1:2.048×106、1:1.024×106和1:2.048×106.亚型鉴定表明,3D12、4E10、6E2和7G6分别为IgG2b、IgG2b、IgG1和IgG2a.ELISA检测结果显示,4种PRRSV单克隆抗体仅与PRRSV反应,不与其他病毒反应,表明均为抗PRRSV的型特异性单克隆抗体.对单克隆抗体腹水液进行IgG提取纯化,SDS-PAGE电泳验证,仅出现两条清晰条带,无杂带出现,证明纯化效果较好.这4种单克隆抗体的获得,为建立PRRSV检测方法提供了强有力的工具. 相似文献