猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白B细胞抗原表位的鉴定

本研究去除了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)CH-1a株M蛋白基因部分疏水性区域后,克隆于原核表达栽体pGEX-6P-1中进行表达,并利用表达的M蛋白(rtM)为抗原,免疫BALB/c小鼠制备了1株抗M蛋白的单克隆抗体(McAb)M283,IFA试验表明该McAb能够识别PRRSV CH-la株.同时将M蛋白基因进行一系列的氨基酸截短表达,证实M蛋白的117 aa～129 aa是McAb M283的抗原表位;对该抗原表位进行western blot 分析,结果显示该表位能被PRRSV感染猪的血清特异性识别.本研究结果为进一步深入了解M蛋白的抗原特性奠定了基础.     

CpG基序对新城疫病毒DNA免疫效果的影响

为评价CpG基序对新城疫病毒(NDV)DNA免疫效果的影响,本研究将NDVF48E9株的F基因分别克隆至真核表达载体pVAX1和含有3个CpG基序的载体pVAX1-CpG中,分别命名为pV-F和pVC-F,体外表达检测结果显示,pV-F和pVC-F外源基因表达量无明显差别。将pVAX1、pVAX1-CpG、pV-F和pVC-F经腿部肌肉多点注射3周龄SPF鸡(200μg/只),2周后以相同的剂量加强免疫,二免后2周通过滴鼻以103EID50NDV的F48E9强毒株进行攻毒。抗体检测结果表明,免疫组的抗体水平与对照组相比差异显著(p0.01),pVC-F免疫组的抗体水平高于pV-F免疫组;淋巴细胞检测结果表明,pV-F和pVC-F免疫组与对照组显著差异(p0.01);攻毒保护率结果显示,pVC-F和pV-F组的保护率分别为60%和50%,对照组为0。以上结果表明,CpG基序对机体细胞免疫反应有一定的增强作用。     

鸡传染性喉气管炎病毒WG株ICP4基因的鉴定及其在潜伏位点的表达

根据传染性喉气管炎病毒(Infectious laryngotracheitis virus,ILTV)SA-2株ICP4基因序列设计并合成3对引物,以ILTV中国王岗株(WG)DNA为模板扩增ICP4基因,并对其进行了序列测定。将ILTV WG株的ICP4基因及其推导的氨基酸序列,分别与ILTV SA-2株、BHV-1、EHV-1、EHV-4、MDV-1、MDV-2、HVT、PRV、VZV、HSV-1和HSV-2的ICP4基因及其推导的氨基酸序列比较后发现,ILTV毒株之间ICP4基因相对保守,核苷酸和氨基酸水平的同源性分别为99.7%和99.1%,但与其它α-疱疹病毒的ICP4基因的同源性则较低,低于3.0%。对潜伏感染鸡三叉神经节中病毒基因的检测显示,在人工感染ILTV WG株后第10 d～60 d内均能检测到ICP4特异RNA,而gB、gC、TK则未能检出。鉴于目前国内外对α-疱疹病毒潜伏感染相关基因以及ICP4基因序列和结构功能的研究,ILTV WG株ICP4基因的克隆和序列测定,以及病毒基因在潜伏感染鸡三叉神经节中的差异表达,为进一步研究ICP4基因的功能及确定潜伏感染相关基因奠定了基础。     

淮北矿区芦岭井田污损土地防治对策研究

指出了随着采煤活动不断加剧,采煤区土地污损已直接影响到人类生活,研究芦岭井田污损土地防治对策,其目的是在一定程度上探索适宜于软煤区,也就是两淮地区污损土地防治对应的策略,促进两淮地区污损土地进一步的治理。芦岭井田在两淮地区具有一定的代表性,其特殊的煤体结构导致煤层开采后地面沉降严重,进而导致当地土地污损很严重。阐述了芦岭井田土地污损现状、起因和特点,列举了目前已有的针对煤矿区污损土地防治措施,结合芦岭井田实际土地污损情况,采用现场调查、实验研究和理论分析相结合的方法,提出了针对芦岭井田污损土地防护与治理的有效对策,同时对芦岭井田现有污损土地治理措施提出了一些针对性的建议。     

鸡传染性喉气管炎病毒TaqMan real-time PCR检测方法的建立

为建立鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)TaqMan Real-time PCR检测方法,本研究根据GenBank中登录的ILTV gB基因序列设计了2对引物与一条特异性TaqMan探针,通过对反应体系和反应条件的优化,特异性、敏感性以及重复性试验,证明该方法在核酸含量108拷贝/μL～101拷贝/μL范围内具有良好的线性关系;能够检测初始模板中10-3EID50的病毒核酸及16拷贝的标准品;与其它相关的鸡源病毒均无交叉反应,并且批内、批间变异系数均小于2%,具有良好的重复性。该检测方法的建立为ILTV的临床检测和定量分析提供了一种快速、准确的技术手段。     

玉米芯栽培平菇的试验

筛选出4株适宜于玉米芯栽培的平菇优良菌株。用玉米芯为主的栽培料A栽培平菇,产量不低于棉籽皮为主的栽培料B,而且原料成本栽培料A只是栽培料B的66.37%。     

加拿大农业现代化体系状态

加拿大的农业在国民经济中占有重要的地位,农业的现代化程度在全世界处于领先地位,是一个农产品出口大国。一、加拿大政府对农业经济的宏观调控和科学管理加拿大在二次世界大战以后,通过几十年的努力,已由一个纯农业大国建设成为多种经济同步发展的发达国家,但是政府仍然十分重视农业,并在农业的宏观调控、科学管理和深层次发展方面作出了积极的努力。一是政府制定了一整套严密的科学发展农业的中长期规划。二是加强对农产品如乳制品、烟叶、鸡蛋等实行计划分配限额管理(简称配额管理),而对大豆、玉米等则给予扶持政策,积极发展。三是高度重…     

沼液肥用效果及其潜在风险评述

沼液是沼气发酵过后的液体残留物,是一种优质的有机肥料,在农林业生产中具有极高的利用价值.简单介绍了沼液的成分,从沼液浸种、叶面施肥、抗病虫害3个方面阐述了沼液施肥对作物生长的影响,从土壤酸碱度、养分含量等方面总结了沼液灌溉对土壤性状产生的影响,从重金属、抗生素物质的积累以及促进温室气体排放方面简单归纳了沼液利用过程中可能对环境造成的潜在风险,并且对沼液进一步利用的前景进行了展望.     

传染性喉气管炎病毒WG株Us区基因结构分析

根据GenBank中的传染性喉气管炎病毒(ILTV)全序列(NCBT登录号:NC-006623).利用Oligo6.2分析序列并设计6对引物,以ILTV WG株基因组DNA为模板,PCR扩增了长度为13.1 kb的区域,得到了完整的WG株的Us区序列,初步鉴定了WG株的Us区基因结构.将WG株的Us区序列分别与ILTV USDA株、BHV-1、CeHV-1、EHV-1、HSV-1、HSV-2、MDV、PrV、HvT、VZV相比较,ILTV WG株与USDA株同源性为99.2%,而与其他疱疹病毒之间的同源性较低,而且Us区大小也不一致;与已发表的ILTV USDA株Us区基因序列分别比较后发现,两者之间差异较大的基因分别为gJ基因和gD基因.其中,gJ基因在第1983个碱基处比USDA株多出30 bp,DNAStar预测这30 bp可能形成一个独立的抗原表位;gD基因的长度在不同的ILTV毒株之间差别较大,与其他疱疹病毒具有相似的结构特征.     

表达牛流行热病毒G基因的重组牛传染性鼻气管炎病毒的构建

病毒活载体疫苗兼有常规活疫苗和灭活疫苗的优点 ,是当今最有发展前景的疫苗研究领域之一。试验将已构建的表达牛流行热病毒 (BEFV)结构糖蛋白 G基因的牛传染性鼻气管炎病毒 (IBRV )转移载体 pd TK - L ac Z-G,通过脂质体方法转染由牛传染性鼻气管炎病毒 Bartha毒株感染的 MDBK细胞 ,筛选出形成蓝色蚀斑的重组病毒 ,并对其进行蚀斑纯化。通过 PCR方法鉴定该重组病毒证明基因组中含有完整的牛流行热病毒 G蛋白基因 ,实验为开发 BEFV/ IBRV二联基因工程疫苗奠定了基础。