牙鲆胚胎低温处理下内参基因筛选及CIRP和Hsp70基因表达分析

牙鲆(Paralichthys olivaceus)是我国主要的海水经济养殖鱼类,在胚胎冷冻保存方面已获得了超低温冷冻保存成功的案例,但在分子水平上对牙鲆胚胎在低温状态下相关基因的表达进行研究,至今还未见报导。本研究首先收集了牙鲆的3个胚胎时期(肌节期、尾芽期和心跳期),分别在0℃及16.5℃进行处理培养,使用实时荧光定量PCR技术检测4个内参基因18S rRNA、ACTB、GAPDH及EF1α的表达水平,并用Ge Norm和Norm Finder软件对其的稳定性进行排序分析。Ge Norm软件分析结果显示,18S rRNA和EF1α的稳定性最好,稳定性最差的为GAPDH;Norm Finder软件分析结果显示,18S rRNA的稳定性最好。综合两个软件的分析结果,在不同发育时期以及低温处理的牙鲆胚胎中,18S rRNA表达量相对稳定,较其他3个基因更适合作为内参基因。为探究牙鲆胚胎在低温处理下分子水平的变化,本研究选取了对温度适应性较强的尾芽期胚胎为实验材料,分别在低温0℃和正常培养温度16.5℃下进行培养,并选取与应激反应相关的热休克蛋白基因(heat shock protein,Hsp)70和冷诱导RNA结合蛋白基因(cold-inducible RNA-binding protein,CIRP)进行表达量分析。实时荧光定量PCR的结果表明,CIRP的表达量在0℃处理30 min之内逐渐下降,在30 min时达到最低值,30~120 min内上升,并在120 min时达到峰值,之后回落,在180 min时,其表达量回落到与对照组相似的水平。而Hsp70在低温处理的前30分钟表达量下降,后回升,120 min达到最大值后回落的现象,与对照组有显著性差异(P0.05)。研究结果说明低温会导致CIRP及Hsp70基因表达水平的改变,先下降后升高再回落的趋势也说明了机体内对低温应激产生了保护反应,为探索牙鲆胚胎在低温下调节和适应的分子机理提供了一定的依据。     

玉米种子活力及幼苗生长特性对其成熟度的响应

以自交系母本9058by、父本驻16为试验材料,授粉后30 d起每隔5 d采集果穗,研究玉米种子活力及幼苗生长特性对其成熟度的响应.结果表明,授粉后前期收获的玉米籽粒成熟度低,具有一定的发芽能力,但抗逆能力弱;冷发芽率、田间出苗率大幅降低.随着授粉时间的延后,籽粒成熟度提升,抗逆能力渐渐升高.授粉后45 d采收,籽粒发芽势、发芽率、冷发芽率、根冠比、出苗率达到最大值;授粉后50 d采收,籽粒的活力指数、幼苗苗长、根长、根条数达到最大值;授粉后45～50 d收获的籽粒质量较高,种子活力可达到较高水平.     

甜樱桃李矮缩病毒(PDV) RT-PCR检测方法的优化与应用

以甜樱桃(Prunus avium L.)品种红灯的叶片为材料,提取总RNA,选用随机六聚体引物进行反转录合成cDNA,根据李矮缩病毒外壳蛋白基因设计2对特异引物,分别从感病样品中扩增出与预期片段大小相符的目的片段.通过对RT-PCR反应体系中引物、模板浓度和退火温度的优化,改进了现有的李矮缩病毒的RT-PCR检测方法,并成功用于山东泰安地区甜樱桃果园的病毒调查.另外,还可以扩增18 sRNA,实现对李矮缩病毒外壳蛋白基因表达的相对定量分析.     

6个罗勒品种在乐山地区的引种表现

在乐山地区探讨了不同罗勒品种的生长特性、所含营养物质及精油的差异以及不同采收时间对罗勒产量、品质的影响。结果表明，在栽培基质为泥炭与珍珠岩比例为4 ∶ 1时，适宜提取精油的最佳罗勒栽培品种为超大叶罗勒和大叶罗勒，适宜作为冻干蔬菜的品种为丁香罗勒。罗勒摘心后90 d采收产量最高，品质最优。     

大港区秸秆资源利用调查及利用现状分析

为推进滨海新区秸秆资源的综合利用，实现秸秆的资源化、商品化，促进资源节约、环境保护、农民增收、农业增效，加快现代生态农业建设及城乡一体化发展，按照全市农村能源工作统一部署，开展了我区秸秆资源调查，通过调查，了解本地区秸秆资源产量、可能源化利用潜力等，为制定滨海新区秸秆综合利用规划提供依据。     

竹笋醇提取物对酪氨酸酶活力的影响

用L-酪氨酸和邻苯二酚作底物,以曲酸、熊果苷为对照,测定不同种、不同季节竹笋笋肉、笋壳醇提取物对酪氨酸酶单酚酶和双酚酶活力的抑制作用。结果表明:麻竹笋肉醇提物浓度为1.0 mg/ml时对酪氨酸酶单酚酶的抑制作用最大,抑制率为45.97%,与0.1 mg/ml曲酸相接近,高于0.1 mg/ml熊果苷;醇提物对酪氨酸酶单酚酶的抑制作用从强到弱依次是:麻竹笋肉毛竹春笋肉麻竹笋壳毛竹春笋壳毛竹冬笋壳毛竹冬笋肉雷竹笋壳雷竹笋肉。麻竹笋壳醇提物浓度为1.0 mg/ml时对双酚酶的抑制作用最大,抑制率为30.05%,高于0.08mg/ml熊果苷和0.08 mg/ml曲酸;醇提物对双酚酶的抑制作用从强到弱依次是:麻竹笋壳麻竹笋肉毛竹春笋壳毛竹冬笋壳毛竹冬笋肉雷竹笋壳毛竹春笋肉雷竹笋肉。     

大港地区蔬菜残体无害化处理与资源化利用

近几年来,大港地区的蔬菜产业发展迅速,蔬菜产量连年翻番,与此同时产生了大量的蔬菜残体,但这一"资源"并没有被合理利用,反而成了"污染源",给蔬菜产业的可持续发展和生态环境造成了极大的影响。文章就大港地区近两年来蔬菜残体无害化处理与资源化还田利用技术及工艺流程进行了简要论述,以实现农业废弃物变"废"为"宝",减少环境污染,改善农村生态环境。     

环渤海湾地区甜樱桃小果病毒及樱桃病毒A的鉴定与调查

为了解环渤海湾地区甜樱桃[Cerasusavium (Linn) Moench]中樱桃病毒的发生情况,选取该地区代表性樱桃示范园中甜樱桃品种‘红灯’为研究对象,以生长期功能叶片为材料,根据樱桃小果病毒-1(Little cherry virus-1,LChV-1)、樱桃小果病毒-2(Little cherry virus-2,IChv-2)和樱桃病毒A(Cherry virus A,CVA)基因组序列设计特异性检测引物进行RT-PCR扩增,结果扩增出与LChV-2、CVA预期片段337 bp和652 bp大小相符的目的片段,测序结果与基因组(基因登录号NC-005065、NC-003689)对应片段一致性分别为89.0％、98.2％,未检测到LChV-1.本研究完成了对环渤海湾地区甜樱桃‘红灯’样品LChV-2、CVA的检测调查,LChV-2检出率43.1％,CVA检出率60.8％;在该地区首次发现LChV-2、CVA复合侵染植株,复合检出率37.3％0.结果表明该地区CVA发生较为普遍,可与LChv-2等其他病毒共同加重对甜樱桃的危害.     

核果类果树遗传转化及检测技术研究进展

综述了近年来国内外常见核果类果树遗传转化的研究进展,概述了目前果树遗传转化的主要方法,阐述了核果类果树遗传转化植株的主要鉴定方法,指出了当前研究中存在的一些问题,探讨了转基因研究未来的发展方向。