绵羊let-7c前体序列突变及其对前体二级结构的影响

为了研究碱基突变对miRNA成熟加工的影响,以绵羊let-7c(oar-let-7c)为研究对象,探讨了其前体序列在阿勒泰羊和中国美利奴羊(军垦型)群体中的突变情况,及相关突变对oar-let-7c前体二级结构和稳定性的影响。结果表明:oar-let-7c前体序列在阿勒泰羊和中国美利奴羊(军垦型)群体中可检测到1处CT突变,该突变位于oar-let-7c成熟序列下游,且在阿勒泰羊群体中以C等位基因为主,而在中国美利奴羊(军垦型)群体中则以T等位基因为主,该突变改变了oar-let-7c前体二级结构且使其自由能值升高了46.89 kJ/mol,推测该突变将对oar-let-7c成熟加工产生影响,进而影响oar-let-7c在阿勒泰羊和中国美利奴羊(军垦型)体内的水平。     

猪精液常温保存稀释液的应用研究

为了筛选适宜的猪精液常温保存稀释液配方,在对稀释液pH、渗透压及缓冲指数进行理论控制的基础上,设计9个稀释液配方,以进口BTS稀释液为对照,通过分析精液有效保存时间和生存指数筛选出最佳配方,然后进行母猪输精试验。结果表明,稀释液pH、渗透压及缓冲指数进行理论控制方法的准确性分别达到97.1%~99.42%、98.7%~99.68%和98.48%~99.16%,可以满足精液稀释液配方设计的要求。9号极显著地高于5、6、7、8号稀释液(P0.01),稀释液有效保存时间160.8h,生存指数49.46,显著高于8号液(P0.05),极显著高于5、6、7号液(P0.01)。9号液精液有效保存时间、生存指数、母猪情期受胎率和平均窝产仔数分别达到160.8h、49.46、80.5%和9.5头,与进口BTS液差异不显著(P0.05),可用于实际生产。     

规模化猪场母猪常规输精与深部输精技术使用效果的比较研究

母猪的深部输精是指使用特殊的输精管将公猪的精液输送到母猪生殖道深部(如子宫体或者子宫角)的技术。目前,对深部输精技术的使用效果存在不同的看法。夏天等的研究表明,与常规输精技术相比,深部输精技术直接将精液输送到子宫体或者子宫角,避免了子宫颈皱褶对精液的滞留,所以可以在保证     

利用牛Y染色体重复序列进行早期胚胎性别鉴定的研究

本试验利用Y染色体重复序列作为雄性特异性引物,以肿瘤坏死因子（TNF-α）为内标引物建立多重PCR体系,进行牛早期胚胎性别鉴定。共设计四对引物—Y染色体重复序列外引物和内引物,其大小分别为534bp和480bp;肿瘤坏死因子外引物和内引物大小分别为357bp和272bp。试验结果表明,优化后的多重PCR体系的灵敏度分别达到3个胚胎细胞,准确率100%,可以满足早期胚胎性别鉴定的需要。     

动物细胞脂滴及其生物学功能研究进展

脂滴作为一个独立的细胞器,其在细胞脂质代谢、缓解应激反应、调节基因表达以及对抗细菌感染等方面发挥的作用已日益引起人们的关注。随着研究的不断深入,人们对脂滴生物学功能的认识越来越清晰,但也仍存在很多问题尚待阐明。本文就近年来动物细胞脂滴基本结构、特性及其生物学功能的相关研究进展进行综述,旨在为后续研究提供参考。     

利用性别决定基因(SRY)进行牛早期胚胎性别鉴定的研究

利用牛性别决定基因(SRY)和酪蛋白αs1基因(CSN1S1)分别设计雄性特异性引物和内标引物,两对引物均各设计一对嵌套式引物进行多重PCR和多重巢式PCR,用于牛早期胚胎性别鉴定。SRY基因和CSN1S1基因外、内引物扩增片断长度分别为357bp、232bp、528bp和367bp。实验结果表明,这两个引物组合建立的多重PCR扩增体系均有较高的扩增稳定性和准确率,但在常规PCR体系中,它们的灵敏度均不高(约50pg,相当于16个细胞的DNA量),这在一定程度上限制了其在胚胎性别鉴定中的应用。而由二者建立的巢式PCR灵敏度可达到5pg,故可以很好地满足胚胎性别鉴定的需要。     

MTNR1A基因多态性与绵羊季节性繁殖的相关性分析

为研究MTNR1A基因多态性与绵羊季节性繁殖的关系,以季节性发情的阿勒泰羊和常年发情的湖羊为研究对象,分别随机选择2品种羊的基因组各50份混合构建DNA池,并以此为模板扩增绵羊MTNR1A基因5′侧翼序列、ExonⅠ及ExonⅡ,通过测序检测MTNR1A基因在阿勒泰羊和湖羊群体的突变。在对突变进行分析的基础上,于5′侧翼序列选择2处转录因子结合的突变位点,利用PCR-SSCP技术检测其在200只阿勒泰羊和210只湖羊中的多态性分布,并分析其与绵羊季节性繁殖性状的关联性。结果表明,MTNR1A基因5′侧翼序列、ExonⅠ及ExonⅡ在阿勒泰羊和湖羊群体中分别检测到18、1和9处突变,TF Search和Signal Scan分析显示,5′侧翼序列的18处突变中有4处分别处于转录因子TBP、GR、SP1和c-Myb的结合位点处,预测评分分别为98.5、95.2、97.6和94.9。ExonⅠ及ExonⅡ中检测到的10处突变中,有4处突变为错义突变,6处突变为同义突变,但均不在MTNR1A的跨膜区。PCR-SSCP检测结果显示,g.15143697位点的T/C突变在湖羊群体中以CC基因型为主,其基因型频率达到0.919,而在阿勒泰羊中以TT基因型为主,基因型频率为0.950,阿勒泰羊群体中T等位基因的比例为湖羊群体的550倍,推测该位点可能与绵羊的季节性发情有关。