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以油木奈果实为材料,应用RT-PCR和RACE技术克隆其β-tubulin cDNA,并采用半定量的方法对该基因进行表达量分析。结果表明,油果实β-tubulin的cDNA全长1606 bp,包含一个1341 bp的开放阅读框,共编码446个氨基酸。对其推导氨基酸序列进行比对分析,表明油果实β-tubulin与众多植物来源的β-tubulin具有很高的相似度。通过设计特异性引物,对果实11个发育时期β-tubulin表达量分析的结果表明,该β-tubulin基因表达量稳定,说明该β-tubulin可作为油果实整个生长发育时期内参基因使用,可以在为进一步应用实时荧光定量PCR技术研究油果实发育相关基因的表达奠定了试验基础。 相似文献
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为研究调控花青素合成机制,利用RT-PCR和RACE技术从中国水仙‘金盏银台’(Narcissus tazetta var. chinensis‘Jinzhan Yintai’.)的花瓣和副冠中克隆得到一个MYB基因的cDNA序列,命名为NtMYB1,在GeneBank上登录号为KC763973。序列分析表明,NtMYB1基因全长842 bp,其中开放阅读框长681 bp,编码226个氨基酸,推测的蛋白分子量为25.2 ku,理论等电点为7.94。NtMYB1具有明显的R2R3-MYB结构域,且在R3结构域的下游含有一个相对保守的PDLNLDLSIG氨基酸基序。同源性分析表明,其编码的氨基酸序列与陆地棉、甜樱桃的MYB蛋白相似性分别达到65%和63%。利用实时荧光定量PCR技术检测NtMYB1基因在中国水仙花不同发育时期和部位的表达水平,分析结果表明,NMYB1基因在中国水仙成花不同时期均有表达,但表达量具有明显差异,其中NtMYB1基因在花蕾期的相对表达量约为花苞期的40倍,且其表达量在花瓣要高于副冠。推测NtMYB1可能参与调控花青素合成基因的转录沉默。 相似文献
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低温贮藏对琯溪蜜柚汁胞粒化与木质素代谢的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
以琯溪蜜柚果实为材料,分别在1、4、7 ℃和室温下贮藏琯溪蜜柚果实,探讨贮藏温度对汁胞粒化、木质素含量以及汁胞木质素代谢相关酶活性的影响。结果表明:木质素合成相关酶的活性在整个贮藏过程中逐渐升高,汁胞粒化指数和木质素含量也均随着贮藏时间的延长而增高;在4、7 ℃下贮藏时,汁胞木质素含量、粒化指数以及木质素合成相关酶PAL、CAD、PPO和POD的活性均显著低于室温和1 ℃;在不同的贮藏温度下,琯溪蜜柚汁胞粒化程度与汁胞中木质素含量均呈正相关的关系。因此,1 ℃的低温不适宜琯溪蜜柚的贮藏,而4~7 ℃较适宜琯溪蜜柚的贮藏。 相似文献
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利用单因素梯度试验与正交试验相结合、方差分析与多重比较分析相结合的方法,对水仙简单重复序列—聚合酶链式反应(SSR-PCR)扩增反应体系中的4个因素(DNA、dNTPs、引物及Taq酶)进行优化分析,方差分析表明4个因素对SSR-PCR的影响均达到极显著水平,通过多重比较分析发现SSR引物和Taq酶对总体系的扩增结果影响最大。根据单因素梯度试验与正交试验结果,建立了适合水仙SSR标记分析的最优PCR反应体系:DNA模板2.5 ng·μL-1,10×PCR Buffer(含1.5 mmol·L-1Mg2+),dNTPs 0.25 mmol·L-1,上下游引物各0.50μmol·L-1,Taq酶1.00 U,总体积20μL。该优化体系的建立可为今后水仙SSR分析提供标准化的试验体系,为水仙种质鉴定、品种指纹图谱绘制、遗传多样性分析、群居遗传结构研究和遗传连锁图谱分析等领域提供技术支持。 相似文献
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