青海省引进小尾寒羊及其后代羊布鲁氏杆菌病的血清学调查

布鲁氏杆菌病（简称布病）是一种人畜共患传染病，此病流行较广，感染率高，对人畜的危害性大。经过近几十年对当地饲养的土种羊和改良羊的免疫预防、检疫和阳性羊的淘汰工作。青海省许多县、区都已达到了布病稳定控制区标准。但是我们对引进羊未开展抽样检测，为了及时、全面掌握引进羊的疫情流行动态，采取有效的防治措施，控制布病的发生和蔓延，制定正确的防治措施，以保证人畜健康，我们于2004年8月对我省引进的258份小尾寒羊血样进行了布病血清学检验，现将结果报告如下。     

青海血蜱cDNA表达文库的构建

在无RNA酶污染的环境下摘取半饱血青海血蜱唾液腺、马氏管和卵巢等器官,从中提取RNA,进而纯化mRNA,采用oligo(dT)引物合成双链cDNA,并在其两端加EcoRⅠ/HindⅢ定向接头。将所产生的cDNA分子定向克隆到具有EcoRⅠ/HindⅢ黏性末端的λSCREEN载体的两臂之间。用PhageMaker extract对以上连接产物进行体外包装以形成完整的噬菌体,并用之转染大肠杆菌ER1647,从而构建成青海血蜱的cDNA表达文库。经测定,所构建青海血蜱cDNA文库的库容量约为2×106PFU/mL,重组率为100%,扩增后文库的滴度为8×109PFU/mL。通过对该文库的免疫学筛选,获得一个编码青海血蜱肌球蛋白碱性轻链的全长cDNA序列。所有结果显示,青海血蜱cDNA表达文库已成功构建。     

硒对铝诱导小鼠脾脏氧化应激和炎症反应的颉颃作用

为探究硒对铝诱导小鼠脾脏氧化应激和炎症反应的颉颃作用机制,试验设4组：空白对照组、铝中毒组、硒对照组、硒＋铝组,各组小鼠灌胃给药处理4周后取脾脏组织。通过观察病理组织HE染色切片及免疫荧光染色切片来评价脾脏组织病理学变化;检测小鼠脾脏组织中谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）活性及还原型谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）含量的变化;以实时荧光定量PCR检测脾脏组织中白细胞介素-1β（IL-1β）、IL-4、IL-6、干扰素-γ（IFN-γ）、血红素氧合酶1（HO-1）和NF-κB mRNA的表达水平;用Western blotting法检测脾脏组织中p-p65、IL-1β和HO-1蛋白表达水平。结果显示,铝处理后可使脾脏局部细胞间距增大,淋巴细胞减少,并伴有红细胞浸润,中性粒细胞增多,降低脾脏组织中GPx活性及NO和GSH的含量,导致MDA积累,IL-1β和NF-κB等炎症相关基因mRNA及蛋白表达水平升高,表现出对脾脏的氧化损伤和炎症反应;硒的加入可缓解铝的毒性作用,提高GPx活性及其他抗氧化物质的含量,降低脂质过氧化物MDA生成及炎症相关基因mRNA和蛋白的表达水平。本试验结果表明,铝能通过诱发小鼠氧化应激及炎症反应损伤脾脏,硒能缓解铝诱导的小鼠脾脏损伤,其机制可能与硒增强了脾脏的抗氧化水平有关。     

科技强院 产业带院 自主发展——甘肃省农垦农业研究院改革促发展风采掠影之二

甘肃省农垦农业研究院院长何庆祥上任伊始，就进行了广泛的调查，同时搜集了大量国内外科技信息。经过认真研究和思考，提出了进一步改革的新思路。何庆祥的思路经党委讨论，统一了认识，形成了一个力度较大的改革方案。方案以适应社会主义市场经济的发展和农业生产的需要，提出研究院体制保持事业性质，采用企业管理模式，院部机关组成五部一室，成立了四所一中心。中心实行独立核算、自负盈亏、自我积累、自我发展，打破“大锅饭”、“终身制”，科技人员从“机关人员”的状态进入了市场经济建设主战场。     

提高青贮饲料质量和利用率的主要措施

近年来,随着畜牧业的快速发展,青饲料的贮备和均衡供给越来越受到人们的重视,如何保证冬春季节青绿多汁饲料供给,提高冬春季节家畜生产潜力已成为广大养殖户最关心的问题。饲料青贮,就是利用微生物学和生物化学过程,将新鲜多汁的植物切碎压实堆放在密封的青贮容器中,通过微生物发酵,使其长期保存青绿多汁、并含有较高的营养价值,是长期保存青绿多汁饲料的一种较好方法。     

对称交互熵多属性决策排序法在温室番茄综合生产效果评价中的应用

为探究深埋秸秆量和土壤水分对作物产量、品质和水分利用效率等生产效果的影响,于2016年对温室番茄进行了小区试验。设置4种秸秆量(0,1.5×10~4,3.0×10~4,4.5×10~4kg·hm~(-2))和4种灌水下限(田间持水量的50%,60%,70%,80%)。选取反映温室番茄综合生产效果的6个相关指标,利用对称交互熵多属性决策排序法,对温室番茄综合生产效果进行评价。结果表明:对称交互熵多属性决策排序法可以用于多指标、多方案的深埋秸秆量和土壤水分管理评价,在评价中指标的选取及正理想解向量和负理想解向量的确定是影响评价结果的关键因素。通过对温室番茄综合生产效果的评价,确定该试验条件下最佳管理模式为T9处理,秸秆量为4.5×10~4kg·hm~(-2),灌水下限为田间持水量的80%;其次是T2处理,秸秆量为1.5×10~4kg·hm~(-2),灌水下限为田间持水量的50%;评价结果最差的管理模式是T16处理,秸秆量为0,灌水下限为田间持水量的70%;其次是T15处理,秸秆量为0,灌水下限为田间持水量的60%。深埋秸秆在番茄生长过程中具有一定的保水功能,并不是灌水下限越高作物的品质越优,综合生产效果越理想。为提高果实的品质需要进行适当的水分亏缺灌溉,协调灌水量和品质之间的平衡点。对称交互熵多属性决策排序法克服了TOPSIS等评价方法的不足,计算简便,结果可靠,适用性强,为合理地深埋秸秆量和土壤水分管理提供科学依据,也可以推广到其他多指标、多方案的农业生产实践决策问题中。     

犬瘟热病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用

根据犬瘟热病毒的核衣壳蛋白(N)基因保守序列,设计特异性引物,建立犬瘟热病毒荧光定量RT-PCR检测方法。试验结果表明,该方法敏感性比普通RT-PCR高出100倍,重复性良好,变异系数在1.01%以下,对犬的常见病原核酸提取物检测均为阴性,证明特异性良好。对32份临床样本进行检测,27份为阳性,高于普通RT-PCR方法。试验结果表明该方法可用于犬瘟热感染情况的检测。     

青海省海西地区山羊和绵羊犬新孢子虫病的血清学调查

用犬新孢子虫的重组蛋白GST—NcSAG1t作为ELISA诊断抗原,进行了青海省海西地区山羊和绵羊群中犬新孢子虫病的血清学调查。经过对所收集的120份绵羊血清和531份山羊血清抗体的检测,共检出绵羊阳性血清10份,山羊阳性血清36份,其阳性率分别为8．33％和6．78oA。说明青海省海西地区的绵羊和山羊群中存在犬新孢子虫的感染。     

山羊免疫弓形虫代谢分泌抗原后的免疫应答

将山羊随机分为6组,即E／SA纽、E／SA＋cpG组（未乳化）、E／SA＋CpG组、E／SA＋IL-2组、E／SA＋IL-2＋CpG组、对照组,每组3只,分别于免疫前、免疫后第2周、免疫后第4周、感染后第1周及感染后第2周采集山羊外周全血及涂血片,IHA法检测抗体滴度的动态变化;ELISA法检测IFN-γ、TNF—a、IL-2、IL-4的表达水平;ANAE染色法检测T淋巴细胞的动态变化。结果显示,免疫后各免疫组的IFN-γ、TNF-a、IL-2、IL-4及T淋巴细胞水平显著高于对照组（P〈0．05）,各免疫组的抗体水平均高于对照组。结果表明,E／SA可引起IFN—γ、TNF—a、IL-2、IL-4、T淋巴细胞及抗体水平的升高,说明E／SA免疫后可引起山羊较强的细胞免疫和体液免疫应答。     

龙眼“华农早”×荔枝“紫娘喜”F1真实性鉴定及果实品质性状多样性分析

以龙眼早熟品种“华农早”为母本,荔枝优质大果品种“紫娘喜”为父本,进行远缘杂交,得到F1代共141株;利用纯合显性RAPD分子标记鉴定出真杂种100株,然后对100株真杂种中59株开花结果单株的27个果实品质性状进行观测和分析。结果表明,14个质量性状的Shannon-Weaver多样性指数在0.61～1.50之间,13个数量性状的变异系数在6.58%～19.36%之间,Shannon-Weaver多样性指数变化范围为1.15～2.20,表明杂交后代果实品质性状变异类型丰富,果实多样性程度较高。