禽流感病毒株A/duck/Fujian/31/2007(H5N1)株M1基因的克隆及序列分析

参照GenBank公布的禽流感病毒基质蛋白M1基因序列,设计合成了1对特异性引物,采用RT-PCR法成功扩增并克隆了禽流感病毒M1基因。序列测定结果为M1基因cDNA全长759 bp,编码252个氨基酸。将其序列与数株甲型流感病毒M1基因序列进行比较,M1基因核苷酸同源性为99.1%~99.6%,推导氨基酸同源性为98.8%~99.6%,生物信息学分析表明,M1基因编码的蛋白质具有亲水性,有很强的抗原性,M1蛋白共有6个潜在的N-糖基化位点,可能存在3个蛋白激酶C磷酸化位点,存在2个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点。     

从日本赛鸽中分离的新城疫病毒的性状

从1983年9月到1984年10月份,在日本赛鸽中爆发了新城疫病(ND),其间于七个县的患鸽中分离了七个病毒株,经用红细胞凝集抑制试验检验,发现这七个分离毒株都与ND病毒的性状一样,并在没有二乙氨乙基——萄聚糖(DEAF-dextran)和Mgso_4的组织培养体系中,都能形成空斑。这七个毒株的最小致死量引起细胞致死的时间(MDT/MILD),平均为90～144小时,其中5个分离毒株的脑内接种病原性指数为1.3～1.7。从七个毒株中挑选出5个毒株,经口投予1周龄或4周龄雏鸡,发现这些毒株都使1周龄的幼雏表现出临床症状;这5个毒株中的3个毒株致死了一些幼雏(致死率为10～30％)。但这5个毒株中却没有一个能使多数4周龄雏鸡表现出临床症状。这些结果表明:目前分离到的所有病毒株,虽然表现出相对较长的MDT/MLD,但都是属于新基因病毒株。     

鹅细小病毒VP1-VP3非重叠序列地高辛探针的制备和应用

根据GPV H1株核苷酸序列，设计了扩增VP1-VP3基因非重叠序列的1对引物，对其结构蛋白VP1与VP3非重叠核苷酸序列进行PCR扩增，将PCR产物纯化、回收后制备出GPV VP1-VP3基因DIG标记核酸探针，其标记效率达到0．1pg／μl。特异性检测结果表明，该探针能与GPV不同毒株核酸发生特异性杂交，而与对照的DPV、GPMV等病毒的核酸杂交反应均为阴性；敏感性检测结果表明该探针对GPV的最低检出量为0．032ng。上述试验结果表明该探针可以用于GPV感染临床病料的检测。     

鹅细小病毒NS1基因的克隆及原核表达

本研究根据GenBank发表的GPVB株全基因核苷酸序列，设计了1对用以扩增GPV主要非结构蛋白NS1基因的引物。通过PCR技术，扩增出NS1完整基因片段1．9kb。将PCR产物克隆到pMD18-T载体后进行序列测定及分析，结果表明：GPV H1株NS1基因全长1884bp，编码627个氨基酸，与国外已发表的B株核苷酸序列同源性为98．15％。同时将该目的基因正向插入到GST融合蛋白原核表达载体PGEX-6P-1的BamH1多克隆位点，构建了GPV NS1的原核表达载体，成功的表达了约97KD的NS1融合蛋白。     

白僵菌防治茶角胸叶甲效果试验

通过在茶园开展不同生物制剂防治茶角胸叶甲的田间试验,并比较生物制剂白僵菌与化学农药的防治效果,试验结果表明:3种生物制剂白僵菌、茶皂素、苦参碱均对茶角胸叶甲有着明显的防治效果,其中白僵菌的防治效果最优;白僵菌的防治效果与化学农药相当,且速效性明显,可作为替代化学农药防治茶角胸叶甲的主要防治药剂.     

畜牧兽医技术远程诊疗服务平台建设的探索和实践

畜牧兽医技术对畜牧业的健康发展起到了十分重要的作用,但在推广畜牧兽医技术的过程中仍然存在着一些问题,影响着畜牧业的健康发展.目前,随着互联网技术的普及,远程诊疗服务作为一种新型畜牧兽医技术应运而生.针对当地畜牧业发展,锡林郭勒职业学院结合畜牧兽医专业优势和师资力量,牵头成立远程诊疗服务中心,探索乡村振兴战略助推畜牧业发展的渠道,为基层群众提供便捷、优质、免费、可持续的远程诊疗服务平台[1].本文主要探讨远程诊疗服务过程中存在的主要问题和远程诊疗服务效果,以便能够更好地促进畜牧业的健康稳定地发展.     

阿拉善荒漠梭梭资源状况与恢复利用

目前,我国草原生态建设已进入治理与破坏相持的关键时期,探索草原生态治理与地方特色产业的相结合的发展路子是生态建设是否成功的关键。阿拉善盟人民通过对干旱荒漠地区梭梭的保护、治理与利用,大力发展沙产业,带动了梭梭、苁蓉的蓬勃发展,从而带动了整个阿拉善地区区域性生态建设的发展,带动农牧民脱贫致富,为促进生态自然恢复和社会经济协调发展奠定了良好基础。     

在蒙古国气候条件下4种玉米种植

蒙古国是畜牧业为主国家,并处于全年放牧的粗放型经营模式的状态。然而,近年全球气候变暖、蒙古国家畜头数剧增、天然草场面积逐步减少等约束条件下,选育出产量和营养价值均高的饲料作物是迫在眉睫。所以,于2010、2011年在蒙古国开展了4种玉米种植。通过,该试验已证明80天极早熟玉米在蒙古国气候条件下,能够完全成熟,可以用于打籽;90天早熟玉米在蒙古国部分省市能够完全成熟;两种专用高产青贮玉米差异不大,均能用于青贮饲料。     

牛源无乳链球菌sip蛋白抗原优势区的原核表达及其间接ELISA检测方法的建立

为测定牛源无乳链球菌表面免疫相关蛋白(sip)的抗原性,本实验通过建立间接ELISA方法,对该蛋白的抗原性进行分析及鉴定.根据无乳链球菌sip基因序列,设计一对引物,以临床分离菌株基因组DNA为模板,PCR扩增sip抗原表位优势区编码的基因序列,并将其与原核表达载体pET-30a(+)连接,构建重组质粒pET-sip,转化宿主茵BL21中,经IPTG诱导,获得重组蛋白,western blot分析表明,重组蛋白具有良好的抗原性.以纯化的表达产物作为包被抗原,建立检测无乳链球菌抗体的间接ELISA方法,确定抗原最佳包被浓度为3.125μg/mL,血清最佳稀释度为1:160,酶标二抗最适稀释度为1:4000.应用该方法对无乳链球菌、化脓性链球菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌兔阳性血清进行检测,结果表明,该方法具有良好的特异性和灵敏度.