籽粒苋AmA1基因的克隆、原核表达及植物表达载体构建

本文采用RT-PCR方法,从籽粒苋(Amaranthus hypochondriacus)"千穗谷1号"的幼嫩种子克隆出AmA1基因的完整开放阅读框序列(ORF),其长度为915 bp,编码305个氨基酸.经Blast同源性分析,结果表明该序列与GenBank登录的籽粒苋AmA1基因的核苷酸序列基本一致,只在起始密码子下游51 bp处由G变成C,但不影响氨基酸的编码.将该基因插入原核表达载体pET28a(+),并转化到大肠杆菌BL21中,经过IPTG诱导,能正确表达出37 kD的融合蛋白.同时构建了AmA1基因双T-DNA双标记植物表达载体PCDMAR-AmA1-dsRed2-hpt,该载体含有2个独立的T-DNA区,其中一个T-DNA区含有选择标记基因hpt和可视标记基因DsRed2(红色荧光蛋白基因),另一个T-DNA区含有由水稻胚乳特异性表达启动子pGt1驱动的AmA1基因,在AmA1基因的两侧连有两段正向重复的烟草Rb7MARs,以增强AmA1基因的表达.实验结果为下一步规模化培育稻米氨基酸组成平衡无选择标记的转基因水稻奠定了基础.     

油茶芽苗砧嫁接体的亲和性生理

通过对油茶芽苗砧嫁接体发育过程中的死亡率、可溶性糖含量、相对电导率和超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性的测定,研究嫁接体的亲和性生理.结果表明,嫁接体与对照实生苗的各项生理生化指标差异很大.嫁接体的死亡率在嫁接后16 d达到最高;CAT活性峰值出现在嫁接后20 d,是对照的339%...     

锥栗植株再生体系的建立

【目的】为了建立锥栗再生体系,【方法】以锥栗胚为外植体,分析不同基因型、基本培养基及激素组合对锥栗不定芽的诱导、增殖和生根的影响。【结果】结果表明,油榛是锥栗组织培养最佳的基因型;锥栗不定芽诱导的最适培养基为M(NH4NO3804 mg·L-1+KNO31011 mg·L-1+FeSO4.H2O 27.8 mg·L-1+1/2MS其余无机盐+MS有机)+6-BA 2.0mg·L-1+IBA 0.2 mg·L-1,其出芽率为76%;芽增殖的最佳培养基为M(同上)+6-BA 0.5 mg·L-1+IBA 0.1 mg·L-1,其增殖倍数达18;诱导生根的最佳培养基为M(同上)+IBA 0.5 mg·L-1,其生根率为48%。【结论】运用上述体系可获得完整锥栗再生植株。     

多味核桃烘烤测控系统

在多味核桃生产过程中，烘烤温度和通风量是影响产品质量的主要因素，为了解决烘烤温度和通风量的自动监测和控制问题，研制并采有了单片机自动控制系统，从而实现了多味核桃生产烘烤过程中温度，风量的自动控制，文中简单介绍了这一测控系统的功能和软，硬件的设计。     

响应面法优化红肉火龙果茎多糖的超声波辅助提取工艺

采用响应面分析法对超声波辅助提取红肉火龙果茎多糖的工艺进行优化。选取液料比、超声功率、浸提时间和浸提温度4个因素进行单因素试验,在此基础上进行四因素三水平的响应面优化试验。结果表明,火龙果茎多糖的最佳提取工艺条件为:液料比16.55∶1,超声功率268 W,浸提时间8 min,浸提温度54℃。在此提取条件下,红肉火龙果茎多糖的提取率达到2.755%。     

飞机操纵

我们在观看精彩的飞行表演时，常惊叹飞机能做各种复杂的动作，如正飞、倒飞、翻筋斗、横滚飞、螺旋飞等等。那这些动作是怎样做出来的呢？这就需要我们了解飞机的操纵原理。     

藤茶查尔酮合成酶基因AgCHS1的克隆及功能鉴定

【目的】查尔酮合成酶(chalcone synthase,CHS)是植物类黄酮生物合成的第一个关键酶,从藤茶中克隆AgCHS1,分析其序列特征及其在藤茶中的组织表达特异性,通过体外酶活性检测和烟草遗传转化对其功能进行鉴定,为进一步研究藤茶类黄酮累积的调控机理提供理论基础。【方法】根据藤茶转录组测序结果设计引物,以藤茶叶片c DNA和基因组DNA为模板,PCR扩增得到AgCHS1。利用生物信息学方法分析该基因的序列特征,使用MEGA6和DNAMAN软件进行多重序列比对,并构建系统进化树。通过原核表达系统获得AgCHS1的重组蛋白,分析该重组蛋白对底物的催化活性,并通过高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)对酶促反应产物进行鉴定。利用qRT-PCR技术对AgCHS1在藤茶不同器官的表达水平进行分析,并采用硝酸铝比色法测定相应的总黄酮含量变化。构建植物过量表达载体,通过叶盘法转化烟草,筛选阳性转基因后代,对T₂代株系花瓣中的花青素和黄酮醇含量进行检测。【结果】AgCHS1的ORF长1 182 bp,编码393个氨基酸,基因组序列长1 315 bp,含2个外显子和1个内含子...     

红、黑米皮对高脂血症模型大鼠脏器组织的保护作用

采用高脂血症(HLP)大鼠模型研究红、黑米皮对脏器的保护作用.试验56 d后,测定各组大鼠血清天门冬氨酸氨基转移酶(ALT)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、过氧化氢酶(CAT)、谷光甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性及游离脂肪酸(FFA)的浓度,通过苏木精—伊红(H-E)染色观察肝脏、腹主动脉和心脏病理学变化.结果表明:与模型组相比较,红、黑米皮组ALT活性下降了14.73%和64.50%,AST活性下降了16.59%和41.79%,FFA浓度降低了41.54%和31.54%,CAT活性升高了45.09%和101.16%,GSH-Px活性升高了13.02%和36.26%,SOD活性升高了10.28%和28.60%;红、黑米皮减轻大鼠肝脏、主动脉的脂肪性病变程度,而心脏并未有病理改变.可见,红、黑米皮可以提高机体抗氧化能力,减轻肝脏、主动脉细胞及其他组织的损伤,对HLP具有一定的改善作用.     

超声波辅助提取芹菜槲皮素工艺

利用超声波提取芹菜中槲皮素,采用正交试验L16(45)对芹菜槲皮素成分提取工艺进行优化设计.结果表明,芹菜槲皮素提取工艺的最佳条件为:浸泡4 h,超声波功率320 W,乙醇浓度90%,液料比25:1,提取40min,在此条件下芹菜槲皮素的提取率最高,达0.2221%.     

高效快速甘蔗转基因方法探索

甘蔗遗传背景复杂,转基因技术是甘蔗品种遗传改良的重要途径。甘蔗转基因遗传改良主要是通过基因枪法和农杆菌介导法来实现,但目前我国的甘蔗转基因技术,普遍存在转基因效率偏低,获得的转基因株系偏少,难以筛选到目的基因稳定表达、有利用价值的转基因株系等问题。本实验室通过多年的经验积累,建立了一种高效快速的农杆菌介导法的甘蔗转基因方法。转化效率为20%,筛选效率达到90%,转化时间为4个月,操作简单,成本较低。