不同发育期大鼠乳腺组织中孕酮受体的表达研究

为了探讨大鼠乳腺中孕酮受体(PR)的变化规律,试验采用RT-PCR方法对不同发育时期大鼠乳腺组织中的孕酮受体表达进行了半定量研究。结果表明,妊娠18 d的PR表达水平明显低于处女期和妊娠6,12 d (P<0．05),整个妊娠过程中,以妊娠12 d最高;在泌乳6 d时检测不到PR,泌乳12,18 d可检测到PR表达,泌乳 18 d的PR水平低于泌乳12 d,但差异不显著(P>0．05)。表明PR可能参与了乳腺细胞的发育和泌乳。     

淇河鲫生长激素基因的克隆与原核表达

【目的】克隆、分析淇河鲫生长激素(Growth hormone,GH)基因,并进行原核表达。【方法】采用RT-PCR方法对淇河鲫GH基因cDNA进行克隆,对其序列进行分析,并构建其原核表达载体PQE30-GH,进行原核表达。【结果】淇河鲫GH基因长633 bp,与鲫鱼、鲤鱼、团头鲂和斑马鱼具有较高的同源性,且处于同一进化分支上;与胡子鲇、鳗鲡、家鼠和人等的同源性较低。构建的表达载体PQE30-GH含有GH基因完整的阅读框架(ORF),转化到大肠杆菌DH5α中,经终浓度0.1 mol/L IPTG诱导后成功地表达出24 ku的融合蛋白。【结论】淇河鲫GH基因克隆成功。淇河鲫GH基因可以在原核中诱导表达,但表达量较低。     

猪KISS-1基因克隆、序列分析

在猪的不同组织中克隆KISS-1基因,提取总RNA,利用设计的引物进行RT-PCR,PCR产物与pMD-19T载体连接后转化E．coliDH5α,检测阳性克隆并测序;结果：克隆的猪KISS-1基因与牛、人、大鼠、小鼠同源性分别为81．0％、76．8％、71．4％、72．4％;克隆了猪KISS-1基因全长并注册GenBank（Accession．EU934235）,猪KISS-1基因在多种组织中表达。     

免疫乳及血液中抗痢疾志贺氏菌抗体消长规律的研究

[目的]为抗痢疾志贺氏菌抗体免疫乳的研制和开发提供理论依据。[方法]以痢疾志贺氏菌为免疫原对妊娠后期的奶牛进行强化免疫,定期检测奶牛血和乳中的特异性抗体水平,以研究抗体消长规律。[结果]首次免疫后60d内,试验和对照血中的抗体效价均急剧上升且试验组的上升幅度明显大于对照组。分娩当天,试验血和乳中的抗体效价分别为12.2和10.4,对照血和乳中的分别为6.4和4.6;分娩后3d内,试验乳中的抗体效价比对照乳高6个滴度左右。分娩后第7天,试验血和乳中的抗体效价分别为10.8和9.2,对照血和乳中的分别为4.2和2.6。在常乳期间,试验血和乳中的抗体效价均缓慢下降。分娩后大约84d,试验血和乳中的抗体效价分别降至5.6和3.6。[结论]该研究为免疫乳的开发和生产奠定了理论基础。     

猪Reg4剪切体Reg4v1和Reg4v2的cDNA克隆和组织分布

从猪肠道组织中提取总RNA,通过RT-PCR对Reg4基因进行cDNA扩增,获得了726 bp和832 bp的两个片段。将PCR产物分别与pMD-19T载体连接后转化E.coliJM109,检测阳性克隆、测序并进行序列分析。同源分析结果表明,克隆的猪Reg4 Variant2基因与人、小鼠、牛的同源性分别为71.6%、63.3%、73.6%;组织分布结果显示:猪Reg4 Variant1和Reg4 Variant2基因在肠道组织各部分均有分布。克隆的猪Reg4 Variant1和Reg4 Variant2基因分别注册GenBank(Accession.FJ469910,FJ469911)。     

不同提取方法对决明子蒽醌类成分及抗氧化活性的影响

采用回流、索氏、微波及超声4种提取方法,测定4种决明子提取液中的游离蒽醌和总蒽醌的含量;采用DPPH、FRAP两种方法测定其抗氧化活性,并分析蒽醌类成分和抗氧化活性之间的关系。结果表明:在对游离蒽醌的测定中以索氏提取法最高(0.16%),与其他提取方法相比差异显著(P<0.05);在对总蒽醌的测定中,提取率为超声(0.63%)>微波(0.56%)>回流(0.49%)>索氏(0.47%);抗氧化活性测定发现,以回流液的抗氧化能力最强,其次是微波液,二者与超声液和索氏液相比有显著性差异(P<0.05);游离蒽醌的含量与抗氧化活性呈极显著负相关(P<0.01)。     

猪神经介素B和受体基因的克隆与组织分布

基于电子延伸序列,克隆并分析了猪神经介素B(NMB)和受体(NMBR)基因。猪NMBcDNA克隆片段长度为567 bp,开放阅读框架长度为366 bp,编码121个氨基酸。NMBR cDNA克隆片段长度为1 194 bp,开放阅读框架长度为1 173 bp,编码390个氨基酸。同源分析表明,猪NMB的核酸序列与牛、人、小鼠和大鼠的同源性分别为87.1%,85.2%,78.1%和76.6%,氨基酸序列的同源性分别为81%,74.4%,70.2%和70.1%;NMBR的核酸序列与牛、人、小鼠和大鼠的同源性分别为91%,89%,84.2%和83.6%,氨基酸序列的同源性分别为92.3%,90.3%,86.9%和86.4%。组织分布结果显示,猪NMB在多种组织均有分布,NMBR仅分布在大脑。克隆的猪NMB和受体基因分别注册GenBank(EU375564和EU670045)。     

口服半胱胺对奶山羊血浆及乳中生长抑素、生长激素水平的影响

用４只河南本地泌乳奶山羊进行自身对照试验。试验期每隔５ｄ添加半胱胺１次，剂量为１００ｍｇ·ｋｇ－１ＢＷ，共喂３次。与对照期相比，试验期奶山羊血浆生长抑素（ＳＳ）含量明显下降（对照期（２８６±０５９）ｎｇ·ｍＬ－１，试验期（１１３±０２１）ｎｇ·ｍＬ－１，Ｐ＜００１），血浆生长激素（ＧＨ）平均水平显著提高（对照期（１１９±０２５）ｎｇ·ｍＬ－１，试验期（１３０±０２３）ｎｇ·ｍＬ－１，Ｐ＜００５），ＧＨ峰值变化不明显，基线水平有所提高（对照期（０９４±０２４）ｎｇ·ｍＬ－１，试验期（１０８±０１８）ｎｇ·ｍＬ－１，Ｐ＞００５）；乳中ＳＳ含量明显下降（对照期（０１５±００２）ｎｇ·ｍＬ－１，试验期（００５±００１）ｎｇ·ｍＬ－１，Ｐ＜００１），ＧＨ水平显著升高（对照期（１１１±００５）ｎｇ·ｍＬ－１，试验期（１２３±００９）ｎｇ·ｍＬ－１，Ｐ＜００５）。说明口服半胱胺能耗竭泌乳奶山羊的ＳＳ，改变ＧＨ分泌模式。     

气相色谱法检测牛乳中共轭亚油酸的研究

共轭亚油酸（CLA）主要存在于反刍动物乳制品中,本试验建立了气相色谱法检测CLA的方法,采集牛乳提取脂肪检测脂肪酸中CLA的含量,发现在试验条件下c9,t11-CLA占到总脂肪酸含量的1．25‰是CLA异构体的主要形式。     

复方中药对肉鸡免疫功能和抗氧化功能的影响研究

笔者自拟一剂中药（炙黄芪200 g、当归160 g、何首乌120 g、淫羊藿120 g、扁豆100 g、黄柏20 g、穿心莲20 g、附子160 g、炙甘草100 g）,以艾维茵肉鸡为试验动物,研究其对禽免疫功能和抗氧化功能的影响。试验结果表明,试验各组与对照组比较,免疫器官指数、淋巴细胞转化率、血清中抗体水平3项指标均有显著差异（P＜0.05）;血液中超氧化物歧化酶(SOD)的活性和总抗氧化能力2项指标也有显著差异（P＜0.05）。