基于PCR的两步法丝状真菌基因敲除方法

基因敲除是研究真菌基因功能的重要方法之一,目前,丝状真菌敲除多采用基因两侧的同源臂对基因组的靶标进行同源替换,然后采用抗生素对转化子进行筛选,但这存在着筛选效率低、假阳性率高、操作复杂等问题。本研究以稻瘟菌为研究对象,采取以下步骤对此进行优化:1)构建HPH-GFP(潮霉素-绿色荧光蛋白)融合表达载体; 2)分别用带有接头序列的引物克隆待敲除基因上、下游片段; 3)克隆上、下游片段与HPH-GFP组成嵌合体片段; 4)嵌合体片段转化真菌原生质体; 5)对敲除突变体进行筛选。结果表明,该法操作简便、高效,除了用潮霉素HPH作为筛选标记外,还可用GFP作为荧光筛选标记,极大提高了筛选效率,可用作丝状真菌基因功能研究。     

饲用小麦种植和利用的试验研究

本研究筛选小麦品种在南方冬闲田进行饲用种植和利用试验。结果表明在饲用小麦适应性好、产量较高,条播行距25 cm、播种量10 kg/667 m²时,其鲜草产量可达4 780 kg/667 m²,干草产量为1 070 kg/667 m²、全株收货时干物质29.85%。在南方冬闲田合理种植小麦,具有较好的生长优势,可获得较高生物学产量,适宜进行刈割鲜饲或青贮加工利用。本文可为本区域及相似地区的饲用小麦生产提供参考依据,缓解冬季饲草严重缺乏等实际生产问题。     

赤霉素等4种化学物质对几种植物种子萌发的影响

研究不同浓度的氯化钠、赤霉素、水杨酸、磷酸二氢钾溶液对中华野海棠、秀丽野海棠、方枝野海棠、瞿麦、滨海前胡、单叶蔓荆、地菍种子发芽率的影响,结果发现适当浓度的赤霉素和水杨酸溶液处理能促进这几种种子萌发,提高其发芽率,而氯化钠和磷酸二氢钾溶液处理有抑制这几种植物种子萌发的作用。     

2个蝴蝶兰品种对低温胁迫的生理响应

以2年生‘绿熊’和‘安娜’蝴蝶兰品种为试验材料,测定其在低温（5 ℃）下处理12、24、48 h后叶片净光合速率、气孔导度、相对电导率、脯氨酸、可溶性蛋白、丙二醛等的含量及超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、过氧化物酶活性,分析低温胁迫对不同蝴蝶兰品种叶片表观症状、光合特性、抗氧化酶活性及渗透调节物质含量的影响。结果表明：5 ℃低温胁迫显著降低了‘绿熊’和‘安娜’的净光合速率、气孔导度,并增加了丙二醛、脯氨酸、可溶性糖等的含量,相对电导率值及超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、过氧化物酶酶活性,并随着处理时间的增加,其变化程度逐渐加深,但‘绿熊’净光合速率降低幅度低于‘安娜’,且其叶片形态、可溶性糖含量、可溶性蛋白含量显著高于‘安娜’。由于在5 ℃低温条件下,‘绿熊’叶片的表观症状良好,且净光合速率、气孔导度、过氧化氢酶活性、可溶性蛋白含量和可溶性糖含量等显著高于‘安娜’,表明‘绿熊’的抗冷性优于‘安娜’。     

酸性菜园土养分状况的温网室研究

通过盆栽试验及化学分析,对酸性菜园土的养分状况进行了研究。结果表明,几种酸性菜园土对P,Mn,Cu,Zn吸附曲线呈直线关系,对K的吸附量较大,酸性较强的两种土壤对S的吸附程度在低浓度范围内较大,高浓度范围内较小;对Mn的吸附与S相反。pH较高的两种土壤对S,Mn的吸附有着相关的情况。N是几种土壤的首要养分限制因子,K则可能成为其潜在的养分限制因子,Mn可能成为酸性较小的两种土壤的养分限制因子。几种土壤分别对P,Cu,Fe,B,Mo有不同程度的缺乏。     

高粱病程相关基因非表达子1(NPR1)基因家族鉴定及胁迫应答分析

非表达因子基因(NPR1)是植物系统获得抗性的激活子,也是植物响应病原菌侵染过程中的核心因子之一,在植物抗病性方面发挥着非常重要的作用.为明确高粱NPR1基因家族成员及SbNPR1的表达特性,本研究通过生物信息学及实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法,对高粱NPR1基因家族进行鉴定和表达分析.结果表明,共鉴定到5个...     

PCR技术在动物疫病诊断中的应用

聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction,PCR）,又称体外扩增技术,最早于1985年由Kary Mullis研制,是一种根据生物体内DNA复制的特点而设计的在体外对特定DNA序列进行快速扩增的新技术,具有特异性和敏感性高、操作简便、快速高效等特点。它能特异地在体外扩增微量基因或DNA片段,将皮克（pg）水平的DNA特异地扩增10^6～10^7倍,达到检测诊断的目的;在对特异性基因进行扩增时可使核苷酸的错配率低于万分之一;其操作过程在2～4h即可完成,有效缩短了诊断的时间。PCR技术目前已广泛应用于从基因扩增、基因检测到基因克隆、基因改造、     

北川白山羊屠宰性能及肉品质研究

本试验旨在研究北川白山羊选育过程中的屠宰性能和肉品质。分别从北川白山羊选育核心群中随机选取健康的成年公羊、成年母羊各5只,开展屠宰试验。结果显示:北川白山羊成年公羊、母羊的宰前活重分别为(42.20±2.14)kg、(32.90±3.11)kg;成年母羊肌肉粗蛋白质含量21.08%,粗脂肪含量1.22%,胆固醇含量65.20mg/100g;氨基酸中必需氨基酸含量47.74%,鲜味氨基酸含量36.36%;脂肪酸中油酸含量43.46%、棕榈酸含量23.30%、亚油酸含量4.09%。表明北川白山羊肌肉品质优良,胆固醇含量低,富含人体所必需的各种氨基酸和脂肪酸,是高档肉类产品,具有较大开发利用价值。     

麦套稻田杂草发生特点及配套防除技术

有效地防除麦套稻田杂草是麦套稻生产能否成功的关键之一。针对麦套稻田杂草的发生特点,提出了优选药种(稻杰)、优选配方(稻杰+千金)、适期防治以及"一杀、二挑、三拔"的防除措施。     

超声波辅助提取米糠中植酸钙镁的工艺条件优化

采用单因素试验法,优化超声波法提取米糠中植酸钙镁的工艺条件.结果表明,超声波提取法较传统的浸提法在产品质量和得率上均有明显提高,浸提时间短.优化的工艺条件为:超声波频率低档,浸提时间15 min,脱色微波功率100W,脱色时间41 min,溶剂V(HCl)∶V(H2O) =3∶197.在此条件下,植酸钙镁纯度达63.07％,提取率达75.88％.