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51.
以乙醇为溶剂,研究了大豆异黄酮的微波助提工艺.通过单因素和正交试验,得到微波助提的优化参数条件为:80目大豆粉,微波功率240 W、60%乙醇、微波辐射90 s、液同比10:1、提取2次.在此提取条件下大豆异黄酮得率2.72%.与常规浸提相比,微波助提工艺具有省时、节约溶剂、提取得率高等优势. 相似文献
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54.
人凝血因子Ⅸ乳腺特异表达载体的构建及细胞转染 总被引:1,自引:0,他引:1
【目的】人凝血因子Ⅸ(human coagulation factor Ⅸ,hFIX)是凝血过程中的关键因子,对临床治疗血友病有着极其重要的意义。研究旨在构建人凝血因子Ⅸ乳腺表达载体,在猪乳腺上皮细胞中验证其乳腺特异表达能力,获得hFIX转基因雌性乳腺上皮细胞和猪胎儿成纤维细胞,为克隆乳腺特异表达人凝血因子Ⅸ的转基因猪做准备。【方法】按照TaKaRa公司RNAiso Reagent和Prime Script RT-PCR试剂盒的说明书,从人胎儿肝脏中提取RNA并扩增出人凝血因子Ⅸ(human coagulation factor Ⅸ,hFIX)cDNA序列,利用PCR方法扩增牛生长激素(BGH) polyA序列,将hFIX的cDNA序列与BGH polyA序列分别连接到表达载体pbCSN2-RC的牛酪蛋白(CSN2)启动子之后,构建带有新霉素抗性和红色荧光蛋白双筛选标记的乳腺特异性表达载体pbCSN2-hFIX-pA-RC。取本地屠宰的泌乳期猪乳房组织,利用组织块种植法培养猪乳腺细胞,并通过控时消化分离纯化猪乳腺上皮细胞,进行染色体分析后,挑选含有正常染色体数目的细胞,通过脂质体法将表达载体导入,经过G418筛选获得稳定表达红色荧光蛋白的转基因细胞,反转录、实时定量PCR验证乳腺表达载体构建的合理性和有效性。为了只对雌性胎儿成纤维细胞进行转基因操作,首先对培养的猪胎儿成纤维细胞进行SRY基因PCR扩增,确定其性别。之后,利用脂质体将证明有效的表达载体导入细胞,并进行G418和红色荧光蛋白表达筛选,对经过鉴定的阳性细胞进行扩大培养和冷冻保存,为下一步的体细胞克隆做准备。【结果】经PCR和酶切鉴定,人凝血因子ⅨcDNA和BGH PolyA成功克隆到载体pbCSN2-RC中,获得具有双筛选标记的pbCSN2-hFIX-pA-RC。转染后G418和红色荧光蛋白表达阳性的猪乳腺上皮细胞,经实时定量PCR鉴定,hFIX有高效表达,证明所构建载体具有指导人FIX在乳腺特异表达的能力,可以用于生产乳腺特异表达的动物。将构建的载体转入雌性猪胎儿成纤维细胞,经G418和红色荧光蛋白的表达筛选,成功获得hFIX转基因阳性细胞。【结论】pbCSN2-RC所含的牛β-酪蛋白启动子可以成功特异性诱导hFIX在猪乳腺细胞的特异表达,获得的hFIX转基因阳性猪胎儿成纤维细胞,为下一步通过体细胞克隆培育hFIX乳腺生物反应器奠定了基础。 相似文献
55.
[目的]分离和鉴定鱼腥草中的内生真菌,并检测其发酵液抑菌活性。[方法]用组织块法分离内生真菌,通过形态分类学方法进行鉴定,并用滤纸片法对4种指示菌进行体外抑菌试验。[结果]从鱼腥草各器官中共分离得到13株内生真菌。其中,根中1株,茎中10株,叶中2株;经形态鉴定,其分别属于子囊菌纲的毛壳菌属和半知菌亚门的曲霉属、镰孢属、茎点霉属及丝核菌属;12株内生真菌发酵液对至少1种指示菌有抑菌活性,而2株内生真菌的发酵液具有强抑菌活性。[结论]鱼腥草中存在具抑菌活性的内生真菌,可作为筛选抑菌活性物质的新资源。 相似文献
56.
中署是日射病和热射病的统称。近年来,酷暑盛夏,天气持续高温、燥热,环境、圈舍、猪体的防暑降温工作做的不好,圈舍内通风不良,再加上饲养密度较大,过度拥挤,导致猪体内积热过多而不能及时散发出去,很容易使中枢神经系统发生机能障碍而导致中暑。猪中暑后,全身发热、中枢神经紊乱,生长发育不良或受阻。加强饲养管理,防暑降温,减轻心脏和肺部负担是重要防治措施。 相似文献
57.
基于能值分析方法,对广西壮族自治区林业生态系统可持续发展进行评价分析。研究结果表明:2008—2015年广西林业生态系统的可持续发展指数整体呈现下降趋势,从1.28下降到0.12,可持续性从2008年的中度可持续下降到2015年的不可持续程度,可持续发展能力也从强变为弱,须采取措施进行遏制。因此,提出科学高效地利用可更新资源、调整优化产业结构、保护为主综合开发等政策建议。 相似文献
58.
为了研究不同覆膜宽度对棉花不同时期生长发育及产量、纤维品质的影响,以确定机采棉种植中较优的覆膜宽度。在同一密度种植条件下,设置2种不同覆膜宽度,分别为4.40 m超宽膜(1膜12行)、2.05 m宽膜(1膜6行),用以分析不同覆膜宽度对棉花农艺性状、叶面积指数、干物质积累量以及产量、纤维品质的影响。结果表明,在4.40 m超宽膜种植模式下,棉花株高、果枝始节高度、果枝数、茎粗等农艺参数均优于2.05 m宽膜种植模式;在4.40 m超宽膜种植模式下,棉花的叶面积指数较2.05 m宽膜种植模式的叶面积指数高31.98%,超宽膜种植模式的产量也比宽膜种植模式的高,超宽膜种植模式的产量为6 465.55 kg/hm2,宽膜种植模式的产量为6 176.92 kg/hm2。超宽膜种植模式的产量比宽膜种植模式提高了4.67%,在2种覆膜宽度种植模式下,棉花的纤维品质无明显差异。通过研究结果可以得出,4.40 m超宽膜的种植模式能够提高机采棉产量,可为棉花种植中选择适合的地膜覆盖宽度提供理论依据。 相似文献
59.
60.
为了降低饼粕原料中抗营养因子的含量,同时提高其小肽的含量,我们利用黑水虻幼虫分别处理未发酵与发酵的豆粕、棉籽粕和菜籽粕,并对结果进行单因素方差分析。研究发现:与空白豆粕组相比,添加了200只黑水虻幼虫的发酵豆粕中的胰蛋白酶抑制因子、β-伴大豆球蛋白、总戊聚糖和植酸的含量分别下降了63%、59%、4%和63%,而小肽和粗蛋白的含量分别增加了657%和2%;添加了200只黑水虻幼虫的发酵棉籽粕中粗蛋白和小肽的含量分别增加了11%和630%,植酸、单宁和游离棉酚的含量分别下降了87%、30%和81%;添加了200只黑水虻的发酵菜籽粕中粗蛋白和小肽含量分别增加3%和468%,植酸、单宁、噁唑烷硫酮的含量分别下降98%、50%和99%。同时,在发酵饼粕(豆粕、棉籽粕和菜籽粕)中加入黑水虻幼虫处理后,样品的平均重量分别降低了0.81 g/50 g、1.5 g/50 g和3.8 g/50 g。 相似文献