提取桑天牛成虫肠道微生物基因组DNA的2种方法比较

比较了改良CTAB法和改良SDS法两种提取桑天牛成虫肠道微生物基因组DNA的方法,结果表明：改良SDS法提取的DNA杂质较多,并且有部分降解;改良CTAB法提取的DNA纯度较高,适用于后续试验研究.     

雄安新区千年秀林美国白蛾危害寄主种类及危害情况调查

为了解美国白蛾对雄安新区千年秀林的危害情况,通过标准地调查采取对角线取样和"Z"字形取样相结合的方法进行随机取样,首先选取千年秀林的90块标准地,调查美国白蛾危害寄主种类及其危害程度,发现危害白蜡最为严重.其次选取53块白蜡标准地,对其美国白蛾的危害情况进行系统地调查,分析其危害程度及影响因素,并对其进行风险评估.结果 发现,白蜡标准地普遍都存在危害,其中发生比较严重的标准地主要受周边树种、自身病害以及所处位置周围环境等因素的影响,由于该害虫具有趋光性所以在西南方向危害较为严重,其风险性R值为2.23,属于该地区高度危险的林业有害生物.此次调查可为有效防控该害虫提供基础,并为千年秀林制定该害虫监测与治理对策提供依据.     

几株桑天牛成虫肠道优势细菌的分离与鉴定

为了研究桑天牛成虫肠道微生态环境,探索破坏桑天牛营养利用等功能的生物防治新途径,对健康桑天牛成虫肠道的优势细菌进行分离鉴定。选择平皿上出现3个以上的菌落作为肠道优势细菌进行分离纯化,共获得6个菌株。6个菌株均呈杆状,革兰染色和氧化酶反应均呈阴性,在25～35℃、pH 5.5～9.5的环境中生长良好,但各菌株的菌落形态及多种生化性状有差异。通过菌体形态观察、染色反应、生理生化特征分析及16S rDNA碱基序列测定与同源性分析,鉴定1、2、3号菌株分别为产酸克雷伯氏菌(Klebsiella oxytoca)、大肠埃希氏菌(Escherichia coli)、荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens),4、5、6号菌株分别属于不动杆菌属(Acinetobacter)、沙雷氏菌属(Serratia)、肠杆菌属(Enterobacter)。     

利用PCR-DGGE技术分析桑天牛成虫肠道细菌菌群

利用PCR-DGGE技术分析桑天牛成虫肠道菌群结构及优势菌群,获取桑天牛肠道微生物的多样性信息。从桑天牛成虫肠道中提取细菌基因组DNA,以细菌16S rDNA基因通用引物27F/1495R和27F/519r+GC进行V3可变区PCR扩增,将长约500 bp的扩增产物经变性梯度凝胶电泳(DGGE)分离后,进行优势条带分析、DNA回收、克隆、测序等,初步得到分别属于肠杆菌属(Enterobacter)、不动杆菌属(Acinetobacter)、埃希氏菌属(Escherichia)、志贺菌属(Citrobacter)、克雷伯氏菌属(Klebsiella)、柠檬酸菌属(Shigella)、泛菌属(Pantoea)和沙雷氏菌属(Serratia)的8个细菌菌株,其中优势细菌为克雷伯氏菌属的细菌菌株,其次是沙雷氏菌属的细菌菌株。将获取的细菌16S rDNA序列在GenBank数据库中进行BLAST比对分析,相似度在97%以上的有6个菌株,其中有5个菌株与传统方法分离菌株的鉴定结果一致,表明基于16S rDNA的PCR-DGGE技术可用于桑天牛肠道菌群多样性研究。     

桑天牛幼虫高毒力白僵菌菌株筛选

为利用白僵菌防治桑天牛,从野外感病死亡昆虫体上进行分离,同时利用黄粉虫对河北省土壤中的白僵菌进行诱集.诱集结果表明:白僵菌较多存在于自然的或人为活动较少的土壤中.利用获得的菌株对桑天牛幼虫进行生物测定,初步筛选出Bi05和Bs04 2个致病力较强的菌株,其接种10 d后的死亡率分别为96.47% 和92.93%,致死中时分别为4.53 d和4.83 d,而其他菌株的死亡率在28.59%和 82.12%之间,致死中时从5.84 d到16.4 d.利用不同孢子浓度的悬浮液对桑天牛幼虫进行接种,进一步测定了Bi05和Bs04菌株的致死中浓度分别为6.76×105 和1.39×106 conidia·mL-1.Bi05和Bs04菌株具有生物防治桑天牛的潜力.     

球孢白僵菌Bb09菌株在美国白蛾僵虫体及其周围土壤中宿存动态

为弄清白僵菌在林间的流行规律,以球孢白僵菌Bb09菌株为研究对象,模拟自然条件,研究其在感病美国白蛾僵虫体及其周围土壤中的宿存动态。结果表明,白僵菌在越冬僵虫体上始终能保持较高的宿存水平,携孢量保持0.39×109个以上,萌发率均保持在95%以上;白僵菌在土壤中的宿存量变化较大,整体呈现与僵虫体上携孢量互补的消长动态变化;白僵菌在僵虫体周围土壤中成菌落数保持在0.11×108~1.89×108 cfu之间。     

中草药源杀菌剂“轮纹一扫光”对苹果枝干轮纹病防治作用研究

本文选苹果重要病害轮纹病作为研究对象，通过皿内抑菌试验、抑制孢子萌发试验、离体枝条及田间药效试验，研究中草药源杀菌剂“轮纹一扫光”对苹果枝干轮纹病的防治作用，以便为果农提供有效防治该病害的药剂。结果表明，在室内试验中，“轮纹一扫光”对菌丝生长、分生孢子器的产生、孢子的萌发有100%的抑制作用；在离体枝条的试验中，“轮纹一扫光”的保护效果为68.06%，治疗效果较好为87.26%；田间防治试验中，刮除病斑后“轮纹一扫光”的防治效果达到100%。该研究结果为苹果轮纹病的生物防治提供了新思路，对苹果病害的防治具有重要意义。     

葡萄霜霉病菌孢子囊形成及离体萌发的适宜条件研究

以葡萄品种"巨峰"和"美人指"为试材,对葡萄霜霉病菌孢子囊形成和离体萌发的适宜条件进行了研究。结果表明:20℃黑暗、湿度100%并加入2%乳糖为葡萄霜霉病菌孢子囊形成的最适条件;葡萄霜霉病菌孢子囊悬浮液经4℃低温刺激0.5h,用2%乳糖置于15℃黑暗条件下培养,孢子囊萌发率最高。     

甘肃天水地区马蹄金栽培技术

育苗 生产计划 见附表。 播种前准备采用穴盘育苗。基质选用KLASMAN或BM育苗专用草炭，每袋草炭随水拌入80g五氯硝基苯或80g地菌克加1000倍液辛硫磷，搅拌均匀，闷2～3天后使用。穴盘选用72孔或120孔，用多菌灵800倍液浸泡后使用。     

白僵菌菌株退化的酯酶同工酶比较分析

白僵菌是桑天牛的生物防治菌种之一。为探究白僵菌菌种退化的遗传机理,以便利用生物工程技术控制菌种退化、提高其生物防治效率,采用酯酶同工酶技术分析各代白僵菌株在蛋白质水平的变异情况,结果表明:球孢白僵菌酯酶同工酶酶谱共出现2~7条酶带,随着传代次数的增加,其主要酶带一直存在且酶谱类型未变,但酶的活性在不断减弱,尤其是几条主要酶带(A、B、E、C)的活性变化更为明显;从聚类图中各菌株排列次序来看,各代菌株按照传代顺序排列,与第1代菌株比较,继代次数越多其间的类间距越大,变异越大,相似度越低,表现出一定的遗传多样性,严重影响其杀虫效果,说明酯酶同工酶技术可以在一定程度上反映白僵菌菌株的退化。