转基因油菜W-4 T-DNA旁侧序列分析与事件特异性检测

W-4是通过农杆菌介导法将fad2基因的反向重复序列表达框转入甘蓝型油菜Westar后获得的转基因高油酸油菜品系.为建立W-4的转基因事件特异性PCR检测技术,应用温度不对称PCR（TAIL-PCR）扩增获得转基因油菜W-4的T-DNA插入位点的左、右旁侧序列.其中右边界旁侧序列长度为290 bp,其碱基组成G＋C含量为31.27％、A＋T含量为68.73％;左边界旁侧序列长度为365 bp,其碱基组成G＋C含量为32.6％、A＋T含量为67.4％,表明该T-DNA整合在富含AT区.序列比对结果发现,该转基因事件中,T-DNA左边界序列完全整合到油菜基因组中,仅有1个碱基由G转换成了A.而右边界则缺失了包括RBborder在内的62个碱基.结果表明：转基因高油酸油菜T-DNA的整合是一次无载体序列的整合.依据左、右边界旁侧序列和转基因载体的T-DNA左右边界序列设计了2对特异性引物TLF/TLR和TRF/TRR,能从W-4基因组DNA中扩增出大小分别为485和405 bp的预期产物,而在其他转基因油菜、非转基因油菜的基因组DNA和空白对照中均无特异性扩增产物,据此建立了W-4的转基因事件特异性PCR检测技术.应用该检测技术可以从含有0.1％ W-4基因组DNA的混合样品中扩增出特异产物,检测灵敏度达0.1％.可对W-4的转基因事件进行特异性检测.     

影响油菜小孢子胚成苗的若干因素研究

小孢子胚转化成苗是油菜高效小孢子培养体系的重要环节.探索了基因型、激素、冷处理、琼脂糖浓度以及胚大小等因素对油菜小孢子胚成苗率的影响,结果表明:采用一定措施可明显提高胚成苗率,获得更多的小孢子苗.不同基因型材料的小孢子胚成苗率有明显不同,最高的胚成苗率可达42.9％;添加激素GA3和提高培养基的琼脂浓度至1.5％可提高...     

双低杂交油菜宁杂15号耐盐性鉴定

为鉴定双低杂交油菜宁杂15号的耐盐性强弱,研究了单盐与复盐对宁杂15号种子萌发及幼苗生长的影响.结果发现,在不同盐浓度胁迫下,宁杂15号的耐盐性强于秦油10号和宁杂11号;宁杂15号对复盐的耐受性强于对单盐的耐受性,在单盐浓度为1.05%以下时,宁杂15号发芽率可达到79%以上,幼苗株高和根长生长正常.在复盐浓度为1.4%以下时,宁杂15号发芽率可达到85%以上,幼苗株高和根长也正常生长.因此,宁杂15号耐盐性较强,适宜在江苏沿海滩涂大面积推广种植.     

杂交油菜宁杂11号肥料与密度试验

为了探讨杂交油菜宁杂11号的适宜施肥量和种植密度,进行了宁杂11号肥料与密度二因子的栽培试验.结果表明,本试验条件下,两个施肥水平间及种植密度间产量均存在显著差异;在农艺性状表现上,角果数、每角粒数和单株生产力等产量构成因素均随密度增加呈递减趋势;宁杂11号适宜施肥量为22.5 kg/667m2(纯氮量)左右,直播密度宜控制在12 000株/667m2左右.     

双低油菜品种--宁油14号

甘蓝型油菜（B．napus L．）是国内外广泛栽培的主要油菜类型之一。由于生态条件的差异，甘蓝型油菜可分为冬性、半冬性和春性三种。各生长发育所要求的温、光条件有较大差别。我国于解放初期从日本引进甘蓝型油菜，经与我国白菜型油菜——南方油白菜（Brassica chinesis var oleifera Mak）杂交改良后形成了我国长江流域特有的半冬性甘蓝型油菜类型。     

油菜抗菌核病材料宁RS-1的选育与利用

宁RS－1由甘蓝型油菜军农1号、3－67、Midas、Wesroona及花椰菜和白菜型油菜灌县花叶等亲本复合杂交育成。田间抗性鉴定结果表明，宁RS－1对油菜菌核病的相对抗病效果RRA和RRB分别为57.4%和55.7%，达到中抗水平；人工接种鉴定为低抗。利用宁RS－1为亲本，育成了多个双低油菜新品系以及宁杂花叶等双低抗病杂交油菜新组合，在各级产量鉴定试验中均表现良好。宁RS－1还被用于油菜菌核病抗性遗传与抗病基因分子标记研究。     

杂交油菜宁杂11号种子纯度SSR标记快速检测方法(英文)

[目的]建立杂交油菜宁杂11号种子纯度SSR标记快速检测方法。[方法]本研究以杂交油菜新品种宁杂11号为研究对象,利用SSR分子标记技术建立杂交种纯度快速检测方法,同时结合田间种植鉴定作为对比验证。[结果]筛选出共显性标记引物Na10-E02,建立了杂交油菜宁杂11号种子纯度SSR标记快速检测方法:种子利用夜间萌发,碱裂解法快速提取DNA,PCR反应2 h,电泳1.5 h,简化的银染法染色10 min,从获取样品种子到出检测结果只需要不到一天的时间,一个熟练科技人员每个工作日至少可以完成6×96=576粒种子的检测量。利用这套技术对生产中大面积制种的9个样品纯度检测结果与田间种植鉴定的实际纯度结果极显著正相关,相关系数达到0.984(P0.01)。[结论]表明这套技术可以用于宁杂11号杂种纯度的快速准确鉴定。     

甘蓝型油菜无花瓣近等基因系的选育研究初报

近等基因是研究作物性状表现与功能的重要材料。利用高代群体分离法，育成了2对无花瓣油菜近等基因系，即NIL－PL01和NIL－APL01及NIL－PL02和NIL－APL02。近等基因系间除花瓣存在差异外，其它主要农艺性状基本一致，NIL－PL02和NIL－APL02具有浅紫色叶片和茎秆标记。NIL－PL01和NIL－APL01品质性状为双低，NIL－PL02和NIL－APL02为中芥高硫。利用随机引物对基因组DNA扩增结果表明，NIL-PL01和NIL－APL01之间多态性差异较小，遗传南质性达98．6％，该材料正用于筛选与花瓣性状紧密连锁的分子标记。     

转基因高油酸油菜株系W-4种子脂肪酸组成

为研究fad2基因下调表达对油菜种子脂肪酸组成的影响,分析比较了转基因高油酸油菜品系W-4的T5、T6和T7种子以及非转基因对照Westar种子中的脂肪酸组成。数据显示W-4种子中油酸平均含量为84.61%±1.41%,较对照增加了25.91%,达到极显著水平;亚油酸和亚麻酸含量分别为3.22%±0.56%和3.45%±0.51%,较对照分别下降了80.89%和47.00%,降幅均达极显著水平。此外,W-4种子中棕榈酸平均含量为3.42%±0.18%,较对照Westar下降18.10%,达到极显著水平;而硬脂酸平均含量为1.87%±0.19%,较对照下降了8.33%,亦达到显著水平;W-4种子中廿碳烯酸的平均含量为1.54%±0.06%,较对照平均增幅为18.46%,达到极显著水平;W-4平均芥酸含量较对照略有增加,但不显著。结果表明油菜种子中fad2基因下调表达对种子的脂肪酸合成与积累影响较大,其不仅显著降低种子中多不饱和脂肪酸含量,增加油酸的含量;而且也显著降低饱和脂肪酸含量,并促进长链单烯酸的合成。     

不同遗传来源甘蓝型油菜开花期的基因型差异和遗传效应分析

应用作物数量性状QTL体系检测的主位点组方法对不同地理来源的甘蓝型油菜(Brassica napus L.)12个品种双列杂交组合的开花期(播种-初花日数)性状的遗传差异进行了研究. 结果表明, 12个甘蓝型油菜品种开花期的遗传受4个主基因控制, 其加性效应分别为-17.22**, 2.71*, 6.09**和-1.05, 显性效应分别为-3.67*, 1.07*, 4.52*和-2.7