小麦黄花叶病抗性鉴定及抗性亲本简单重复序列

小麦梭条斑花叶病毒（wheat spindle streak mosaic virus,WSSMV）又名小麦黄花叶病毒（wheat yellow mosaic virus,WYMV）是造成小麦Triticum aestivum减产的重要病害。不同的小麦品种对WYMV病害的抗性表现相当复杂。推广抗性品种是防止WYMV大面积田间发病的有效措施。以从国内外收集到的527个小麦品种/系为材料,对其WYMV抗性进行了病圃鉴定,筛选抗性稳定的品种/系,并以其中推广面积较大的WYMV抗性和敏感品种为亲本筛选在抗性和敏感亲本间具有多态性的简单重复序列（SSR）标记。结果表明:527个候选材料中只有10个品种/系的抗性相对比较稳定。以其中3个推广面积较大的WYMV抗性品种丰抗1号T. aestivum Fengkang 1,石家庄72 T. aestivum Shijiazhuang 72,郑麦9023 T. aestivum Zhengmai 9023以及2个推广面积较大的WYMV敏感型品种扬麦158 T. aestivum Yangmai 158和烟农22 T. aestivum Yangnong 22为亲本,筛选在抗性和敏感亲本间具有多态性的SSR标记。结果表明:丰抗1号/扬麦158和石家庄72/扬麦158间的简单重复序列多态性最大,分别为64.0%和63.3%。因此,以WYMV抗性品种丰抗1号和石家庄72,以及WYMV敏感品种扬麦158为亲本材料构建作图群体更有利于利用分子标记对控制WYMV抗性数量性状位点（QTLs）进行精细定位和目标基因的图位克隆。图2表3参17     

抗草甘膦基因aroA转化陆地棉胚性愈伤组织的研究

为了建立以草甘膦为选择标记的农杆菌介导的棉花胚性愈伤组织转化体系,本研究将草甘膦抗性基因(aroA)转化陆地棉WC和YZ-1的胚性愈伤组织,分别以5 mg·L-1和10 mg·L-1的草甘膦浓度作为选择压,经过2~3轮筛选,获得了抗性胚性愈伤组织,诱导出胚状体并发育成苗。对T0再生植株进行PCR及草甘膦抗性检测,以WC和YZ-1为受体的转抗草甘膦基因(aroA)分别获得了33株和10株阳性植株,转化效率分别为82.5%和62.5%。该体系为棉花遗传转化提供了实验方法,获得的抗草甘膦棉花为棉花育种提供种质资源;同时抗除草剂基因还可以作为筛选标记与其它基因串联在一起转化棉花,进行基因功能验证。     

普通小麦（浙农林12×CASL7AS）DH系株高的分析

小麦株高与植株倒伏密切相关,影响小麦产量。为挖掘小麦株高QTL位点和候选基因,从遗传和分子水平上解释株高分子机理,本研究将野生二粒小麦染色体臂置换系CASL7AS为母本,课题组自选株系浙农林12（简称ZNL12）为父本,杂交F₁经过花培得到178个DH群体。通过4年2个种植点株高数据,利用55K SNP芯片构建高密度遗传图谱,对小麦株高性状进行QTL分析。该遗传连锁图谱包含3 655个SNP标记,长度为4 738.45 cM,标记间平均遗传距离为1.30 cM,覆盖了小麦21条染色体。其中,A、B、D染色体组分别含有标记1 466、1 492和697个。QTL分析共检测出53个QTL位点,分布于1A、3A、5A、7A、1B、3B、4B、5B、7B、2D、4D、6D和7D染色体上,可解释2.80%~38.50%表型变异。其中,稳定主效 QTL有2个,分别为QPh.zafu.4B-1和QPh.zafu.4D-1,其贡献率分别为25.18%~38.50%和20.67%。经细胞生物学分析,基因型为（0,2）矮秆植株胚芽鞘的表皮细胞长度显著短于基因型为（2,0）的高秆植株,基因型为（0,0）、（2,2）中间型的植株胚芽鞘表皮细胞长度无显著差异,由此推测小麦株高的变异由细胞长度因素决定。QPh.zafu.4B-1候选基因Rht-B1b基因编码区矮秆株系,第904核苷酸处发生碱基“C-T”的突变,形成终止密码子(CAG-TAG);而QPh.zafu.4D-1候选基因Rht-D1b基因编码区矮秆株系,第781核苷酸处碱基突变“G-T”,编码氨基酸中缬氨酸变为天冬氨酸。结果为小麦株高候选基因的筛选和QTL定位提供了优异的遗传位点和候选基因,未来可用于小麦抗倒伏相关的分子标记辅助育种。     

仙居雄性不育大麦的研究──雄性不育进化的种内基因库的创建及利用

本文报道了创建大麦雄性不育进化的种内基因库的设计方案和利用雄性不育促进异交技术组配的基础群体、建立综合杂交群体和进化的种内基因库的具体步骤与实施。对综合杂交群体Ｏ＿４Ｆ＿１代、Ｏ＿５Ｆ＿１代中获得的超矮秆型、二棱无芒型等新变异材料的改良作了简述，对组建大麦专项基因库、同质异源基因库等也予以讨论。     

用球茎大麦技术产生大麦加倍单倍体的初步研究

(1)大麦和球茎大麦的基因型对种间杂交和离体胚挽救的成功率有明显影响;(2)离体挽救时出苗率还受到胚龄和培养基成分的影响,胚龄较小(温室14天)时出苗率较高,在B_5培养基中加5g/l活性碳或再增加15ppm PP_(333)使两个杂交组合的出苗率分别达50.00％和51.61％;(3)染色体加倍成功率平均为34.90％,以0.075％秋水仙碱处理带2～5分蘖的成功率较高,最高的达62.50％,据试验结果推算,授粉100朵小花平均可得加倍单倍体5.29株,最高27.46株。     

大麦的花药培养(二)

白化苗在不少禾本科植物的花粉植株中,都存在着一定比例的缺绿植株,大麦尤为显著,如在现有培养条件下,大麦品种Sabarlis的花粉植株中60-90%是白化苗.大麦白化苗现象不仅存在于花药培养中,而且也存在于花粉粒培养和整穗培养中.这些缺绿植株即使始终置于异养条件下,也不能形成正常的雌雄配子.因此,这些高频率白化苗的存在严重限制了花培技术在大麦育种中的有效应用.     

海岛棉纤维发育相关基因GbPDF2酵母单杂交文库构建及其上游基因解析

为研究棉纤维起始发育的分子调控网络,以海岛棉(Gossypium barbadence L.)品种"海渝"开花当天(0 DPA)胚珠为实验材料,利用酵母单杂交技术来筛选棉纤维起始发育相关基因GbPDF2的上游调控转录因子。首先,克隆GbPDF2的启动子(Accession:KJ475468);构建了该启动子的诱饵融合载体(GbPDF2-PRO)-pAbAi,转入酵母细胞中重组为Y1HGold[Bait-pAbAi]菌株。之后,应用Matchmaker Gold Yeast One-Hybrid Library Screening System系统构建酵母单杂交cDNA文库,转化重组酵母菌株,通过同源重组筛选GbPDF2的上游转录调节因子。构建的cDNA文库库容为2.23×106,重组率为95.8%,插入片段大小为300 bp~2000 bp,其中大于1000bp的阳性克隆为109个。cDNA插入片段经测序和Blast同源性分析,筛选出2个生长素响应因子,1个WRKY7转录因子,1个WD-repeatprotein 40等与纤维发育相关的转录调节因子,为研究棉纤维起始发育的信号转导通路奠定了基础。     

多效唑对普通大麦单倍体胚萌发和出苗的影响(简报)

“球茎大麦技术”(Bulbosum Technique)中,单倍体胚出苗率的高低,是影响该技术能否在大麦育种中成功应用的关键之一。国外曾有人从培养基、培养条件、接种时期等几方面对比进行了研究,并指出B_5培养基是较理想的培养基。但我们的大量试验表明:大多数基因型在B_5培养基上的出苗率仍偏低,并且发现合适的胚龄、培养基中加5g/L活性碳及适量的PP333则可明显提高单倍体胚的出苗率。本文首次报道PP333在提高普通大麦单倍体胚出苗率及改善秧苗素质等方面的作用。