复合酶制剂对黄颡鱼生长性能、血清生化和免疫指标的影响

选取360尾初始体质量约为2.48 g的黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)幼鱼,随机分为4组,分别投喂添加0(对照)、100 mg·kg-1、200 mg·kg-1和400 mg·kg-1复合酶制剂的试验饲料,养殖8周。结果表明,黄颡鱼的增重率、特定生长率和摄食量随复合酶制剂添加量的增加而升高,其中400 mg·kg-1组的增重率、特定生长率和摄食量分别比对照组高出15.4%、7.5%和20.3%(P<0.05)。各组黄颡鱼的粗蛋白质、粗脂肪、水分和灰分质量分数差异不显著(P>0.05)。随着复合酶制剂水平的增加,血清尿素浓度逐渐降低,血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶活力和总蛋白质量浓度升高,血清溶菌酶活力则先升高后降低,在100~200 mg·kg-1时有最高值(P<0.05);血清超氧化物歧化酶活力和丙二醛质量摩尔浓度均无显著性差异(P>0.05)。饲料中添加400 mg·kg-1复合酶制剂能显著提高黄颡鱼的生长性能和血清谷丙转氨酶活力,降低血清尿素水平;200 mg·kg-1能显著提高血清总蛋白质量浓度、谷草转氨酶和溶菌酶活力。     

传染性造血器官坏死病核酸疫苗的构建及其抗性基因对环境细菌抗性的影响

本研究以传染性造血器官坏死病毒(infectious hematopoietic necrosis virus,IHNV)分离株XJ-13为研究对象,克隆其糖蛋白(glycoprotein,G)基因并连接到商业化载体pcDNA3.1(+),成功构建了真核表达载体pIHNxj-G。为了检测该载体作为核酸疫苗的可能性,本研究以2μg/尾的剂量采用背鳍基部注射免疫虹鳟(Oncorhynchus mykiss)鱼苗[(5±0.5)g]。在免疫后第4天及第30天,以100 TCID_(50)的剂量利用IHNV-XJ-13对虹鳟进行腹腔注射攻毒;在免疫后第4天及第7天,利用Real-time PCR技术检测虹鳟头肾及接种部位肌肉组织Mx-1基因表达情况;在免疫后第4天及30天检测虹鳟血清IHNV中和抗体效价;在免疫后65 d内,分别于不同时间点采集循环水池里的粪便、水以及虹鳟的肠内容物,进行氨苄青霉素抗性菌的分离鉴定。攻毒试验结果显示,核酸疫苗在免疫后第4天和第30天的相对保护率均高于90%;Mx-1基因检测结果显示,Mx-1基因在头肾和接种部位肌肉中均显著上调表达;中和抗体效价测定结果显示,在免疫后第4天,所有血清中均不存在中和抗体(效价均20);而在免疫后第30天,10尾虹鳟中有8尾血清中存在中和抗体,最高效价为160;抗性菌分离结果显示,分离到的氨苄青霉素抗性菌均是天然具有氨苄青霉素抗性的气单胞菌(Aeromonas sp.)和柠檬酸杆菌(Citrobacter sp.),并未分离到包括大肠杆菌在内的任何具有氨苄青霉素抗性的指示菌,且实验组和对照组的氨苄青霉素抗性菌的种类和数量均没有发生统计学意义的改变。本研究提供了具有良好保护效果的IHN核酸疫苗,并为IHN核酸疫苗的安全评价提供了基础数据。     

传染性造血器官坏死病毒抗原表位富集区的原核表达及应用

以传染性造血器官坏死病毒Sn1203株(IHNV-Sn1203)基因组RNA提取物为模板,利用生物信息学软件分析,通过RT-PCR一步法扩增截短的G蛋白基因序列(约375 bp),将其克隆到表达载体p ET-27b中,构建重组表达质粒p ET-27b-IHNV-short G,通过大肠杆菌Rosetta表达菌株获得高效表达。在IPTG浓度为0.25 mmol/L时,37℃诱导表达,经SDS-PAGE电泳分析显示目的蛋白相对分子质量约为14 000,符合预期大小,并以包涵体的形式表达,4 h时目的蛋白表达量最大。蛋白经变性、复性处理后获得不带任何标签的纯化蛋白,并利用该蛋白制备兔抗血清。ELISA结果显示,兔抗血清的效价为1∶80 000,说明制备的兔抗血清能够识别表达的重组蛋白;间接免疫荧光结果表明兔抗G蛋白血清具有良好的特异性,并且与VHSV参考毒株没有任何交叉反应。     

提高四季柚果实品质的关键技术

改革开放以来,我县四季油生产得到飞速发展,四季油市场的竞争将进一步加剧,竞争的特点由数量型向质量型转变。因此,提高产品质量是摆在四季抽生产者面前的迫切问题。本人就如何提高四季油果实品质总结以下几点,供参考。１推行利于优质高产的整形修剪技术理想的树体结构应包括以下几方面：一是树冠上部小,下部大,呈谷堆形：二是使主校自第一副主校分枝以后与水平线的夹角呈７０°～７５°,梢直立向上延伸。以保证主枝始终处于强势生长状态;三是使副主校与水平线的夹角呈１５°～２０°,向外趋向水平延伸,同时让第一副主枝和第二副…     

发展效益农业的思路与对策——以浙江省苍南县浦亭乡为例

以浙江省苍南县浦亭乡为例,分析了其农业发展现状,剖析了该乡发展效益农业的优势和前景,并针对发展效益农业过程中存在的困难和问题,提出了发展思路。     

幼龄脐橙冬季保叶试验

脐橙的叶片是有机养分的制造和贮藏器官,脐橙花器发育,春梢生长,开花坐果及幼果前期发育。主要靠越冬老叶贮存的养分供给,所以越冬老叶的保留至关重要。本试验是探讨在合理土肥水管理、病虫害防治的基础上,通过叶面肥的喷施以确保脐橙叶片能安全越冬,减少和延缓春季脱落,从而提高老叶的保留率。     

在新农村建设中给农机盖个“窝”

春雨飘飘洒洒.江西省南城县万坊镇黎家边村的黄国安看到自家门前的手扶拖拉机,心里隐隐作痛.“马上要春耕了,这些农机得大修一次才能派上用场,你看都锈成这样,再过两年就用不了了,帮我们呼吁一下棚子的事吧!”黄国安话里话外难掩焦急.     

蒙古鲌苗种培育关键技术研究

蒙古鲌属于鲤形目、鲤科、鳊鲌亚科、红鲌属,俗名红梢。它是一种体型较大的经济鱼类,分布于全国各主要水系,近年来资源严重衰竭,天然水域中已难觅其踪影。     

江西内湖鱼蟹混养试验

草型湖泊是养殖河蟹的优良水体。由于湖泊的自然演化，特别是人类活动的影响，草型湖加速演变成了藻型湖。藻型湖、尤其是进行施肥养鱼、富营养化程度较高的大型湖泊，能否进行河蟹的养殖？养殖效益如何？施肥对河蟹有无毒负作用？对河蟹的品质有何影响？为此，我们在面积为8000余hm^2的江西省余干县内湖中进行了鱼蟹混养试验。     

虹鳟IgM重链恒定区的表达及兔抗血清的制备

为了能够成功表达虹鳟IgM,本研究利用生物信息学软件对虹鳟IgM的亲水性及抗原性进行了分析,根据GenBank收录的虹鳟IgM重链恒定区,参照生物信息学分析结果,设计用于扩增截短的IgM基因的引物,以虹鳟头肾RNA提取物为模板,利用RT-PCR方法扩增虹鳟截短的IgM重链恒定区部分基因片段,连接原核表达载体pET-27b,利用大肠杆菌Rosetta进行表达。SDS-PAGE及HPLC结果显示,纯化后截短的IgM大小约为47.7 ku,且纯度达到90%。利用其制备兔抗血清后ELISA分析结果显示,所制备的兔抗血清与本研究所表达的截短IgM蛋白的反应效价为1∶40 000,与虹鳟血清提取的全长IgM反应效价为1∶20 000并且呈现出抗原计量依赖性。研究表明,重组IgM蛋白与虹鳟血清中的天然IgM重链恒定区具有近似的结构,利用其所制备的兔抗血清能够与虹鳟鱼体中的天然IgM发生特异性反应。