羊流产衣原体主要外膜蛋白基因的克隆与序列分析

将自行分离、传代培养的内蒙古地区山羊流产衣原体按常规方法分离纯化，提取衣原体基因组DNA作为模板，按照国外发表的衣原体主要外膜蛋白（MOMP）基因两端序列设计合成一对引物，用PCR方法扩增出－1.17Kb的DNA片段。利用引物上预先设计的限制性内切酶位点，将扩增片段经限制性内切酶切割后连接到pUC19质粒相应位点上，转化大肠杆菌DH5α，筛选重组子。经PCR检测和内切酶分析鉴定含MOMP基因的重组子质粒。对克隆处段进行全序列分析，结果证明得到MOMP全编码序列的基因克隆。本株衣原体MOMP编码区由1170个核苷酸组成。序列比较发现本株衣原体的MOMP基因与国外的羊流产衣原体S26／3株的MOMP基因完全相同，与B577株的MOMP基因仅有一个核苷酸的同义变异。     

柳毒蛾核型多角体病毒的生产及应用

本文报道了柳毒蛾Ｓｔｉｌｐｎｏｔｉａｓａｌｉｃｉｓ（Ｌｉｎｎａｅｕｓ）ＮＰＶ的生产方法及林间防治试验结果。以天然饲料饲喂幼虫，到４龄时接毒感染，７天后开始逐日收集病死虫，感染率８６％以上。死虫含病毒量５．７×１０９ＰＩＢ／ｇ。３年林间多点防治试验表明，无论室内及林间增殖的病毒防治柳毒蛾的效果均相当或优于常用化学农药     

在COS细胞中表达白细胞介素-Ⅱ

为了进一步证实IL-2的存在,我们对IL-2真核表达载体进行了pC-IL-2双酶切鉴定。采用DEAE-Dextran介导的方法,用IL-2真核表达载体pC-IL-2转染COS细胞进行暂态表达。经放射免疫测定了转染细胞上清中IL-2表达量为46.05ng/m l。采用依赖IL-2的CTLL-2细胞作为靶细胞的MTT法测定了IL-2表达产物的活性为86 IU/m l。     

黑曲霉葡萄糖氧化酶基因的原核表达及其蛋白产物的Western-blot分析

为进一步研究黑曲酶中国株3.758葡萄糖氧化酶(GOD)在大肠杆菌中的表达水平和条件,将黑曲霉中国株3.758的葡萄糖氧化酶(GOD)基因定向克隆于原核表达载体pET-11a上,构建了融合表达的重组质粒pET/GO,转化E.coli BL21(DE3)plysS,用IPTG诱导,超声波粉碎细菌细胞,SDS-PAGE电泳检测,GOD基因获得了表达,表达的融合蛋白相对分子质量为66.5 kDa.用市售葡萄糖氧化酶免疫家兔获得抗血清,酶联法(ELISA)测定其效价为106,Western-blot分析证明表达的融合蛋白与兔抗GOD血清有较强的特异性,为黑曲霉3.758葡萄糖氧化酶(GOD)抗体的制备奠定了基础.     

用聚合酶链反应检测羊流产衣原体的初步研究

依据鹦鹉热衣原体羊流产株的主要外膜蛋白基因核苷酸顺序,设计,合成了１对ＰＣＲ引物,利用该对引物,以衣原体基因组ＤＮＡ为模板,可以用ＰＣＲ扩增出－１．１７ＫｂＤＮＡ片段,检测灵敏度可达０．１ｐｇ。采集衣原体感染的山羊流产胎衣等病料制取核酸样品,进行ＰＣＲ检测,同样扩增出特异性条带。作为对照的健康动物组织,常见病原菌的核酸样品则都呈阴性反应,用建立的ＰＣＲ检测衣原体的方法检查了６５份自然病料,有６份呈