项目教学法在ASP动态网页设计课程教学中的应用

项目教学法是指师生通过共同实施一个完整的项目而进行的教学活动。项目教学法是高职院校努力推广的新的教学模式。ASP动态网页设计课程是计算机应用技术及计算机网络技术专业的专业核心课程。怎样把项目教学法和ASP动态网页设计课程的课堂教学紧密地融合在一起是本文探讨的切入点。     

荒漠生态补偿利益主体行为的演化博弈分析

建立与完善生态补偿机制是荒漠生态环境保护的重点内容.为了研究荒漠地区生态保护利益相关者的补偿机理,通过建立演化博弈分析的复制动态模型,对各利益相关主体的行为及其相互影响进行研究,分析各策略的动态演变过程,讨论演化结果的稳定性.结果表明:各博弈方策略的演化方向受对方策略初始状态的影响,并与博弈双方支付矩阵的参数有关,但政府及管理部门是更为重要的主导者,他们的行为与意愿直接决定了均衡解;生态补偿在保证农牧民采取稳定的“保护”策略中起着至关重要的作用;合理确定沙区的生态补偿金额、降低沙区的生态保护成本、在监管过程引入奖惩机制和增大监管力度,有助于实现荒漠生态保护的可持续发展.     

林业产业结构转换与林区经济发展

本文利用大量的统计资料和研究文献,考察了世界林业产业结构演进的一般规律,分析了其演进的动因,对我国林业发展阶段作了一个基本估计,并讨论了有关林业决策的几个主要问题。最后,以一个县为例,说明林业产业结构转换对林区经济发展的影响。     

稻茬麦田杂草看麦娘的识别与防治

稻茬麦田杂草看麦娘的识别与防治张彩虹，程荣仙，乔玉昌（西峡县农业技术推广站，西峡４７４５００）看麦娘［ＡｌｏｐｅｃｕｒｕｓＳｅｑｕａｌｉｓＳｏｂｏｌ］属禾本科看麦娘属，是我国稻区麦田的一种主要杂草。８０年代以前在我县局部地区发生。近几年来，随着水稻面...     

应用SYBR GreenⅠ荧光PCR熔解曲线同时检测两种致病菌

SYBR Green Ⅰ是一种特异结合双链DNA的染料,已被证明能灵敏地检测核酸.采用SYBRGreen Ⅰ荧光PCR熔解曲线,通过摸索、优化PCR反应条件及反应体系,扩增出两条不同大小、Tm值不同的目的核酸片段,表现在熔解曲线上出现两个独立的波峰,建立了用SYBR Green Ⅰ荧光PCR熔解曲线来检测多个基因的方法,从而实现不用核酸探针,简单、经济、快速的多重荧光PCR方法检测沙门菌和产单核细胞李斯特菌.     

实时荧光定量PCR检测畜禽肉制品中鸭源性成分

根据鸭mtDNA COX基因上的保守序列设计特异性引物和TaqMan探针,建立实时荧光定量PCR用于检测畜禽肉制品中的鸭源性成分。结果表明,建立的方法特异性强,与鹅、鸡、羊、牛等15种动物DNA无非特异性扩增;灵敏度高,可检测1.0pg/μL鸭源DNA的存在;重复性好,同DNA浓度所测得Ct值的变异系数均小于3%;应用该法对模拟混合样品进行检测,结果与预期相符,且常见肉类DNA的存在并不影响该法对鸭源性成分检测的灵敏度。说明本试验建立的鸭源性成分实时荧光定量PCR法特异、敏感、稳定,可快速准确检测畜禽肉制品中含有的鸭源性成分。     

美洲型猪蓝耳病病毒高致病性变异株RT-LAMP检测方法的建立

设计两套反转录-环介导等温扩增(RT-LAMP)引物,建立了检测美洲型猪蓝耳病病毒及其高致病性变异株的RT-LAMP方法。采用RT-LAMP方法与实时荧光RT-PCR方法检测58份病料,结果一致,但RT-LAMP方法的灵敏度大约高出10倍。RT-LAMP方法特异性良好,检测猪瘟、伪狂犬病和细小病毒等均未出现交叉反应。结果表明,建立的美洲型猪蓝耳病病毒及其高致病性变异株RT-LAMP检测方法具有特异、灵敏、高效和简便的特点,在我国猪蓝耳病快速检测领域将有广阔的应用前景。     

非洲马瘟间接ELISA方法的建立及初步应用

为建立检测非洲马瘟间接酶联免疫吸附试验方法,利用重组杆状病毒感染昆虫细胞表达出具有良好抗原性的VP7蛋白,将感染VP7重组杆状病毒的昆虫细胞裂解液作为包被抗原,通过优化包被抗原浓度、二抗稀释度等,建立了检测非洲马瘟的间接ELISA方法,并进行了初步运用。结果表明,直接利用真核细胞表达VP7蛋白的昆虫细胞裂解液作为包被液可成功建立检测非洲马瘟的间接ELISA方法。     

非洲猪瘟病毒实时荧光PCR检测方法的建立

依据非洲猪瘟病毒(ASFV)的vp73基因保守序列,设计了特异性引物与TaqMan探针,扩增片段69bp,建立了ASFV实时荧光PCR检测方法。与OIE推荐用于检测ASFV的实时荧光PCR和普通PCR方法进行比对,结果显示,本文建立的方法与OIE两种检测方法的特异性相当,灵敏度与OIE荧光PCR方法相当,但比普通PCR方法高出至少10倍。标准定量曲线显示,本文方法最低检测限可达10 copies/μL病毒DNA(相关系数为0.993046)。重复性试验的批内CV值为0.61%～1.14%,批间CV值为1.37%～3.14%,表明本文方法的重复性和稳定性良好。可见,本文建立的基于vp73基因的ASFV实时荧光PCR检测方法具备快速、准确、灵敏的特点,将为检验检疫部门防御ASFV传入我国提供更多技术支持。     

基于锁核酸探针的双重荧光实时RT-PCR检测方法鉴别新城疫中强毒株与弱毒株

为鉴别新城疫病毒(NDV)强毒株和弱毒株,本研究建立了基于新型锁核酸(LNA)探针的实时荧光RT-PCR检测方法(Duplex LNA rRT-PCR)。该方法针对NDVF基因裂解位点设计了两条新型LNA探针,通过对11株NDV株进行大将军脂duplex LNA rRT-PCR检测方法检测,验证该方法的特异性;通过对副粘病毒I型(APMV-1)和NDV中强毒株(vNDV)不同浓度病毒液进行检测,确定该方法的灵敏度,并与TaqMan实时荧光RT-PCR检测方法进行比较。结果显示本研究所建立的方法对11株NDV检测的特异性为100%(11/11),优于TaqMan实时荧光RT-PCR检测方法(10/11);所建立的duplex LNA rRT-PCR方法检测中强毒株F48E9和弱毒株LaSota的灵敏度分别为10个EID50和0.1个EID50,比美国农业部推荐的TaqMan实时荧光RT-PCR检测方法低10倍。本研究利用新型LNA探针技术,建立了鉴别NDV中强毒株与弱毒株的duplex LNA rRT-PCR检测方法,可以特异性检测NDV并有效区分中强毒株与弱毒株,适合用于鸡场和进出境动物产品中NDV的快速检测。