抗菌肽Lactoferricin B的原核表达及其纯化

牛乳铁蛋白活性多肽(Lactoferricin B,LfcinB)是一种阳离子型抗菌肽,因其具有多种生物学功能,现已被认为具有能够替代传统抗生素的发展前景。然而,由于传统的分离制备方法存在诸多弊端,所以基于基因工程的原核表达技术在制备高纯度和高效表达的该蛋白方面具有极其深远的意义。研究旨在摸索出一套完整的利用原核表达技术制备LfcinB的分子生物学方法。依据大肠杆菌密码子偏爱性的原则,设计了LfcinB的基因序列,通过人工合成的方法获得该基因的优化序列,借助Bam HI和Sal I双酶切、连接等手段将其构建到原核表达载体pGEX-4T-2上,获得重组表达载体pGEX-4T-2-LCB,将该载体转化E.coli Rosetta(DE3)。使用IPTG诱导,结果发现LfcinB在大肠杆菌中表达量超过20%。通过一系列蛋白纯化技术分离得到纯度达到95%以上的LfcinB融合蛋白。抑菌试验结果表明,重组抗菌肽LfcinB融合蛋白具有很好的抑菌活性。研究结果为人们使用基因工程技术制备抗菌肽LfcinB提供了具有重要参考价值的技术路线和理论依据。     

植物病原真菌分子诊断技术研究进展

对植物真菌病害分子诊断技术的种类、特点、应用情况、存在的问题及未来发展趋势进行了综述,旨在建立一种快捷准确的植物真菌病害分子诊断技术。以最大限度地减少农业损失。     

响应面法优化大豆根瘤菌HW-05保护剂配方

[目的]采用响应面法研究具有根瘤菌保护作用的蛋白类、盐类、糖类和微量元素类物质。[方法]通过设置不同种类、组合、配比、浓度的大豆根瘤菌保护剂配方,在实验室中模拟实际应用条件,研究具有提高根瘤菌存活率和存活时间作用的液体保护剂配方。采用响应面法的中心组合试验确定各显著因子的最佳水平。[结果]筛选出各类化合物中影响有效活菌数的显著因子,即蛋白胨、黄原胶、Na Cl优化后的各类化合物的终浓度如下:蛋白胨0.13%,黄原胶0.011%,氯化钠0.30%。[结论]菌株HW-05在加入保护剂室温放置180 d后的有效活菌数为3.185×108CFU/m L,与未加入保护剂优化前(2.458×108CFU/m L)相比存活率提高了25%以上。     

黑龙江东宁境内栽培黑木耳菌株区别性鉴定

以黑龙江省东宁县两个黑木耳主栽品种的10株黑木耳菌株为试验材料,进行ISSR区别性鉴定研究。结果发现:5条ISSR引物扩增图谱具有多态性,遗传相似系数为0.72~1。在相似系数为0.88处,将供试菌株分为两大类群,其中6个黑木耳1号和2个黑木耳2号菌株聚为一类,为同一个黑木耳品种。黑木耳1号中的8-1和22黑木耳菌株聚为一类,与其他8株黑木耳菌株可能为不同的黑木耳品种。     

忠县蚕桑产业化发展情况

1　忠县蚕业历史及蚕桑产业化现状忠县自然资源丰富 ,地处“黄金水系”长江中上游 ,气候温和 ,雨量充沛 ,四季分明 ,冬少严寒 ,日照充足 ,土地肥沃 ,宜桑宜蚕。忠县栽桑养蚕历史悠久 ,至今已逾千年。由于历代频繁战乱 ,种桑者无暇培育 ,养蚕者常误时机 ,于是纷纷变计 ,举桑林一砍而光 ,建国初忠县几乎无蚕业可言。解放后 ,党和政府十分重视蚕桑生产 ,制定了一系列的政策措施 ,有力地促进了蚕桑生产的发展。我县蚕丝业起步于 2 0世纪 6 0年代 ,发展在 80年代 ,兴旺于 90年代初 ,于 1 991年成为原四川省蚕桑基地县。全县 42个乡镇 ,780个村 ,1…     

大豆内生细菌的筛选和鉴定

从黑龙江省不同地点采集大豆,从不同组织中分离内生细菌,并用分离得到的内生细菌对病原真菌做皿内拮抗试验,经过两次筛选有生物拮抗活性的内生菌菌株。结果表明,从大豆各种组织中分离得到137株内生细菌,其中2株对多种植物病原真菌具有拮抗作用,经初步鉴定2菌株均为芽孢杆菌(Bacillus sp.)。