H5N1亚型禽流感病毒NS1基因的原核表达及其ELISA检测方法的建立

采用RT-PCR技术扩增了禽流感病毒（AIV）A／Goose／HLJ／p46／2003（H5N1）的NSl基因，将其克隆于融合蛋白表达载体pMAL-c2X上，转化DH5α大肠埃希氏菌感受态细胞，经BamHⅠ和HindⅢ双酶切鉴定及序列分析，表明筛选到了重组质粒pc2X-NS1。SDS-PAGE电泳结果显示，重组质粒转化TB1大肠埃希氏菌后，经0．3mmol／L的IPTG诱导，融合蛋白MBP-NS1得到大量表达，融合蛋白以可溶形式存在，分子质量约为67ku。Western-blotting检测结果表明，融合蛋白MBP-NS1能够与H5N1亚型AIV活病毒感染康复鸭血清发生特异性反应，而不能够与H5N1亚型AIV灭活疫苗免疫鸭血清发生反应。试验初步建立了以纯化的融合蛋白MBP-NS1为包被抗原的间接ELISA检测方法，为AIV灭活疫苗免疫家禽与AIV感染家禽的鉴别诊断奠定了基础。     

动物防疫监督案件中的笔录制作

证据是当事人用来证明其诉讼请求或进行答辩的主要手段,也是人民法院用来查明案情、作出裁判的主要手段和依据。《行政诉讼法》31条规定,证据可分为书证、物证、视听材料、证人证言、当事人陈述、鉴定结论和勘验笔录、现场笔录7种。在动物防疫监督案件中运用最多的是勘验笔录、现场笔录。下面就动物防疫监督案件中如何作好现场调查询问笔录,保证案件的准确性、可靠性,谈一下个人粗浅的认识。现场笔录是专指行政机关及其工作人员在执行职务过程中,在实施具体行为时,对某些事项当场作的能够证明案件事实的记录,又称为当场笔录。在动物防疫监督…     

猪生殖和呼吸综合症的血清学诊断方法

１９９５年以来,国内学者相继建立了猪生殖和呼吸综合症（ＰＲＲＳ）的ＩＦＡ、ＩＰＭＡ、ＥＬＩＳＡ和Ｄ０ｔ－ＥＬＩＳＡ等血清学诊断方法,简述如下。１间接荧光抗体法（ＩＦＡ）细胞板的制备：将生长于培养瓶的Ｍａｒｃ１４５或ＨＳ２Ｈ细胞消化后,用含１０％犊牛血...     

动物产地检疫委托申报制度研究

正动物产地检疫委托申报制度的提出解决了长期以来由贩运户申报而产生的产地检疫申报主体不适格的问题,但在实践中如何操作并没有作统一的规定。为了明确养殖者与贩运户的法律地位和法律责任,提高官方兽医出证效率,本文围绕《动物产地检疫(委托)申报、承诺、核查卡》的内容设计及推动检疫申报制度落实的六项措施进行了研究。一、动物产地检疫申报委托制度的由来在我国,动物检疫是依货主申报而启动的一项行政许可行为,《中华人民共和国动物防疫法》第四十二条规     

产蛋鸡新城疫并发大肠杆菌病的诊断与治疗

鸡新城疫是由副黏病毒引起的高度接触性、败血性传染病。随着集约化养鸡业的发展,鸡场一旦发生该病除直接导致用药成本的增加,产蛋效益的下降和鸡群死淘率的上升等经济损失外,还可导致鸡群免疫功能下降和抗病力的降低,使大肠杆菌等一些条件性致病菌有机可乘,造成并发感染和继发感染,给临床治疗工作带来困难。     

预防兽医学分子生物学技术发展概况

概括介绍了分子生物学理论、技术的发展，重点从病原学、免疫学和疫病预防与控制学三方面阐述了分子生物学在预防兽医学中的应用、发展及其贡献。同时，阐明了预防兽医学对分子生物学的贡献和促进作用。     

鸭坦布苏病毒E蛋白具有独特交叉反应性中和表位的鉴定

利用抗鸭坦布苏病毒(DTMUV)中和单抗1G2,结合E蛋白多肽扫描技术,鉴定了最小抗原表位²²⁷GSSAGTWQN²³⁵。Western blot显示,残基²³¹G或²³³W的突变后,表位完全失去了与1G2抗体识别的功能,表明²³¹G或²³³W是抗体1G2识别的关键氨基酸位点。通过免疫荧光分析(IFA)显示,MAb 1G2与JEV、WNV和ZIKV的E蛋白发生交叉反应,表明该表位是黄病毒的交叉反应性表位。蛋白质和病毒模型显示,表位定位于成熟病毒粒子可接近的表面,在E蛋白结构域Ⅱ的hi环中。本研究首次证明,中和抗体1G2靶向交叉反应表位定位在E蛋白结构域Ⅱ的hi环,该表位的鉴定有助于提高对黄病毒血清诊断中存在交叉反应问题的认识和理解。     

最近10年国内地理类、旅游类学术期刊所载乡村旅游文献综述

进入21世纪后,乡村旅游在我国的发展迅猛,学术界对其展开了广泛的研究.以CNKI数据库中收录的研究文献为对象,以“乡村旅游”为题名检索了2001-2011年间国内地理类、旅游类学术期刊所载的乡村旅游文献,获得有效文献50余篇,研究内容主要涉及以下几个方面：乡村旅游的基础理论;乡村旅游开发模式;乡村旅游经营管理模式;乡村旅游市场;乡村旅游的空间布局;乡村旅游对目的地的影响;乡村旅游发展中存在的问题及对策等.今后我国乡村旅游研究应着力于以下领域：基于旅游者角度的乡村旅游评价框架和体系的构建;对乡村旅游开发中各利益相关者的研究;对乡村旅游发展中各要素的分析和研究;乡村旅游研究方法的多样化.     

盐度对刺参消化酶活力的影响

本文应用酶学分析方法研究了盐度对刺参消化道内各种消化酶活力的影响.蛋白酶活力测定采用福林一酚法,脂肪酶活力测定采用水解法,淀粉酶活力和纤维素酶活力测定采用水杨酸显色法.试验结果表明,除脂肪酶外,盐度对消化道内消化酶活力具有显著影响(P＜0.05).淀粉酶和蛋白酶在盐度30时活力最大,而纤维素酶在盐度26时活力最大.