珍珠豆型花生的简单序列重复(SSR)多态性

从36对SSR引物中筛选出10对引物,能在24个珍珠豆型花生品种DNA中扩增出多态性片段,每对SSR引物可扩增出1～6个DNA片段,扩增位点数为2～11个,平均6.5个;多态性位点为1～11个,平均6.1个.根据SSR标记分析24个珍珠豆型花生的遗传距离为0.04～0.69,平均为0.37.聚类分析将24个珍珠豆型花生品种划分为4个品种群.     

花生种质资源的遗传变异与DNA分子多态性

早期研究结果表明在栽培花生种质资源中用分子标记技术只检测出很少的多态性,让人产生花生缺乏遗传变异的结论,但显然与花生的起源和进化研究结果相矛盾.另外通过对国内外花生种质资源的综合鉴定,几乎所有的性状都存在丰富的变异.本文综述了花生种质资源的遗传变异和产生的途径,以及花生DNA分子多态性的研究进展,认为花生栽培种在遗传性状和DNA分子水平上都存在丰富的变异.     

应用抑制消减杂交技术 构建花生果皮差异表达文库

为构建花生果皮差异表达基因消减文库，分离花生果皮差异表达cDNA片段，本研究采用抑制消减杂交技术，以花生种仁cDNA为Driver，果皮cDNA为Tester，进行两次消减杂交和两次抑制性PCR，将第二次PCR产物与pGEM-T easy 载体相连，电击转化大肠杆菌，成功构建果皮差异表达cDNA文库。所长出菌落中89.2%为白色克隆。采用PCR法对重组子进行鉴定，发现其中单一扩增条带的克隆约占83.5%， 片段大小集中分布于250～750bp之间。     

花生不同部位CEM1基因表达特征分析

在花生荚果和种子不同发育时期全长cDNA文库中,通过对规模测序和生物信息学分析,筛选出MADS-box家族的一个cDNA全长序列,命名为CEM1基因.半定量RT-PCR技术分析表明,CEM1基因仅在花生生殖器官里表达,特别是果皮里表达丰富,在幼果里有大量表达,而果针里有少量表达,在根、茎、叶里无表达,初步分析该基因可能与花生果皮发育相关.     

目标起始密码子多态性(SCoT):一种基于翻译起始位点的目的基因标记新技术

随着功能基因组学的发展,分子标记领域已开始从传统的随机或匿名性分子标记转向目的基因标记和功能性标记.目标起始密码子多态性(start codon targeted polymorphism,SCOT)标记是一种基于翻译起始位点的目的基因标记新技术,具有操作简单、重复性好等特点,根据ATG翻译起始位点侧翼保守序列来设计单引物,扩增产生偏向候选功能基因区显性多态性标记,适合不同层次实验室的不同领域的广泛应用,SCoT标记已开始在水稻和花生上得到运用.本文旨在介绍给研究者一种可以作为传统的RAPD、ISSR标记有效补充的目的基因标记新技术,希望其广泛的应用于生物多样性分析、遗传图谱构建、重要性状标记等方面.     

花生果种皮特异表达基因AhPSG13的克隆和表达研究

为了克隆在花生果种皮中特异表达的基因,本实验从花生果皮种仁抑制消减文库中筛选出一个277bp的EST序列并进行研究,通过构建花生果皮全长cDNA文库,获得此目的基因G13的全长为1369bp,开放阅读框从第28个碱基始至1122个碱基止,预测分子量为39865.59,等电点5.73。生物信息学分析表明该基因编码的蛋白具有4个跨膜结构域和多个活性位点,可能与细胞内DNA转录有关;该蛋白与多种豆科作物的半胱氨酸蛋白酶具有较高同源性,推测为花生半胱氨酸蛋白酶相关基因;RT-PCR研究该基因表达,结果显示该基因在果种皮中特异表达,于30d果皮中表达量最大。本研究克隆的AhPSG13基因序列已经登陆到GenBank,登录号为FJ475061。     

花生新品种闽花6号的选育及优异性状研究

闽花6号是福建农林大学以汕油523为母本、以Q6为父本有性杂交选育而成,于2006年通过福建省农作物品种审定委员会认定,2009年通过农业部花生品种鉴定。该品种在福建省及全国花生新品种区域试验中表现为高产稳产、高蛋白、较抗黄曲霉。该品种分枝数较多、株高较矮、单株结果数多、饱果数多、出仁率高、籽仁含油量50.08%,蛋白质含量30.63%,属高蛋白品种,脂肪和蛋白质之和高达81.8%。根据福建省花生品种区试数据,应用AMMI模型对参试品种的稳定性分析表明,闽花6号高产、适应性强。对闽花6号进行重要农艺性状的通径分析显示,各性状对产量的直接贡献大小依次为:荚果饱满度单株结果数百果重主茎高总分枝数出仁率侧枝长百仁重结果枝数。     

花生种子贮藏期间不同药剂处理对种子活力的影响

为保持花生种子的活力,在高温加速老化的条件下,研究了不同药剂及不同剂量处理对花生种子活力的保护作用。结果表明,药剂处理能有效保持种子活力,种子发芽率高,发芽指数和活力指数明显高于未经药剂处理的对照。不同药剂对种子活力的保持效果是：９０１１ 剂型＞ ９０１３ 剂型＞ ９０１２ 剂型。不同药剂应采用的适宜剂量不同, ９０１１Ａ 以低中剂量的效果好。药剂处理是通过防止酸败来保护花生种子活力的。研究结果对花生种子活力保持和花生生产有一定作用。     

应用氯化锂法小量提取质粒DNA

用改良的氯化锂方法小量提取质粒DNA。结果表明,该方法所提取的质粒DNA的质量与常规碱裂解法获得的质粒DNA基本一致,可以满足分子生物学基础实验的要求;同时该方法简化了试验步骤,质粒DNA提取时间缩短了24 min。