猪圆环病毒2型病毒样颗粒的制备及免疫原性评价

旨在利用原核表达系统在大肠杆菌中制备出猪圆环病毒2型(PCV2)病毒样颗粒(VLP),用改良的镍亲和层析法纯化并在小鼠体内评价其免疫原性。通过PCR方法从发病猪中扩增出PCV2的ORF2序列,对其全长进行密码子优化并交由公司合成重组质粒pET-32a-yCap;以BL21(DE3)为表达菌株,经IPTG诱导表达,利用SDS-PAGE与Western blot对Cap蛋白的表达方式及抗原特异性进行鉴定;利用改良的镍亲和层析法纯化带有His-Tag标签的重组蛋白;利用透射电镜观察所纯化的载体融合蛋白能否形成VLP;用自制的VLP疫苗与PCV2灭活疫苗(ZJ/C株)分别免疫小鼠,利用商业化PCV2 IgG抗体ELISA检测试剂盒评价其免疫原性。结果显示,成功得到PCV2 ORF2序列和重组质粒pET-32a-yCap,重组质粒在大肠杆菌中主要以可溶性蛋白形式表达,蛋白大小为47 kDa;经镍亲和层析法纯化可得到单一的目的蛋白;重组Cap蛋白能与PCV2多克隆抗体及HRP标记的6*His, His-Tag小鼠单克隆抗体发生特异性结合;经过磷钨酸负染色的蛋白悬液在透射电镜下可观察到大量规则的、直...     

玉米丝黑穗病的抗源鉴定及抗性遗传研究

为了鉴定玉米自交系对丝黑穗病的抗性,研究抗病力遗传效应,采用人工接种鉴定法,研究评价了72份玉米自交系对丝黑穗病的抗性。其中高抗系18个,占25%,抗病系15个,占20.8%,中抗系12个,占16.7%。玉米对丝黑穗病的抗性遗传属细胞核遗传,无正反交差异。F1和F2的发病率介于双亲之间,无超亲优势,F1与抗病亲本回交的后代基本表现为抗病,与感病亲本回交后代表现为感病。要选育中抗以上类型杂交种,其双亲之一必须为抗病系,其杂交方式有:高抗×高抗、高抗×抗病、高抗×中抗、抗病×抗病、抗病×中抗。     

抗猪流行性腹泻病毒单克隆抗体的制备与鉴定

为了制备抗猪流行性腹泻病毒(PEDV)的单克隆抗体(MAb),本试验将Vero细胞中增殖的PEDV超速离心纯化,作为免疫原免疫BALB/c雌性小鼠,采用常规的淋巴细胞杂交瘤技术和PEDV重组S蛋白为基础的间接ELISA方法,制备并筛选能稳定分泌PEDV特异性抗体的杂交瘤细胞;分别采用间接ELISA、Western blot和间接免疫荧光(IFA)试验,对单克隆抗体的亚型、特异性等生物学特性进行鉴定。结果表明,本试验成功获得了1株稳定分泌PEDV特异性抗体的杂交瘤细胞株5C3。MAb亚类鉴定为IgM,轻链为k型。杂交瘤细胞连续传至20代,细胞培养上清液和小鼠腹水抗体效价分别稳定在1∶600和1∶10 000。特异性试验结果显示,MAb不与猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪伪狂犬病毒(PrV)、猪圆环病毒(PCV2)发生交叉反应。western-blot结果显示,MAb能特异性识别PEDV的重组S蛋白。IFA试验结果表明,MAb能与PEDV感染的vero细胞产生特异性荧光。说明本试验获得的MAb能特异性识别重组及天然的PEDV S蛋白,具有良好的抗原性和特异性。     

基于TOPSIS法的将乐县国有林场3种典型群落综合稳定性评价

基于层次分析法(AHP)和逼近理想解排序法(TOPSIS)对林场的杉木阔叶混交林、杉木毛竹混交林和杉木马尾松混交林的群落稳定性进行评价.选取郁闭度、物种多样性、优势树种更新潜力、Godron指数、坡度、腐殖质层厚度、土层厚度、立地质量、树种组成、平均胸径、龄组、空间配置构建群落稳定性评价体系.群落稳定性评价结果:杉木毛竹混交林杉木马尾松混交林杉木阔叶混交林.根据评价结果,M-Gordon指数较为接近综合排序结果,但并不完全相同,不能完全代表群落稳定性,需要结合各种影响群落稳定性的立地因子、林分结构、林分特性判定当前群落的稳定性.     

部分桑树品种花粉亚显微形态观察及比较

[目的]了解桑树花粉的亚显微结构及形态学特征。[方法]对7个桑树品种的花粉通过戊二醛固定制样处理,酒精梯度脱水、冷冻干燥和金属喷镀制备后利用扫描电子显微镜进行形态大小及表面纹饰观察。[结果]花粉表面特征及纹饰均清晰可见,表明该试验方法适合桑树花粉的扫描电镜观察;供试桑树花粉为近球形,具2个萌发孔,孔膜具刺突;极轴大小15.99～22.63μm,赤道轴大小14.98～20.78μm,‘育2号’花粉体积最大,而‘晋选7号’花粉最小;花粉外壁均分布有不同密度的点状颗粒,花粉表面呈现平滑和瘤状突起2种纹饰类型。[结论]戊二醛固定液–酒精梯度脱水法是进行桑树花粉形态观察的一种较理想的研究方法;该研究结果或可为桑属植物的孢粉学鉴定及种甚至种下等级的系统分类研究提供有益资料。     

关于我国农村扶贫政策与低保政策衔接问题的研究综述

对我国农村扶贫政策与低保政策及其衔接问题的相关文献进行梳理与综述,在此基础上提出了自己的观点:要将两项政策真正有效衔接必须要认识到贫困不仅只是一个单纯的经济收入问题,它涉及了社会资本、自然资源、基础设施、健康、教育、社会公正等许多因素,要用社会发展的眼光,以实证研究来发现问题、解决问题;要充分发挥贫困人群的作用,明确他们的所需与所想,如此才能更好的解决两项政策的衔接问题。     

湘西小黄姜高产栽培技术规程

湘西地区是湖南省生姜主产区之一,为推进湘西生姜产业化发展,制定湘西小黄姜高产栽培技术规程,规定了湘西小黄姜栽培的选留种、整地、播种、田间管理、病虫害防治、采收、储藏等技术标准。     

马铃薯渣制膳食纤维的工艺研究

对马铃薯提取淀粉后的废弃物———马铃薯渣进行了开发。研究了用其制膳食纤维的工艺 ,并用相应的标准进行了检测     

《农村电工》我的良师益友

<正>初识第一次接触到《农村电工》是在1997年,那时我刚从35 kV变电站回到乡镇电力管理站上班,在一次偶然机会接触到一期《农村电工》,便被杂志上通俗易懂的内容所吸引。至今仍记得有一篇文章介绍的是利用二极管单向导通特性,解决双联开关控制线故障案例。当时虽受工作环境所限,不是每期杂志都能接触到,但此后多年我最大的兴趣便是收集《农村电工》,学习农电管理知识,提高自己的业务技术水平。     

三峡库区川南山地黄牛及杂种后代生长曲线拟合分析

三峡库区川南山地黄牛及其8种杂种后代的体重资料用Logistic和Gompertz模型进行生长曲线拟合分析。结果表明:2种模型都能很好地拟合川南山地黄牛及其8种杂种后代的生长发育规律,但Gompertz模型尤佳。成熟体重最大的是西杂牛313.2373 kg,最小的是本地黄牛166.1484 kg。引进的8个肉牛品种对本地黄牛都有改良效果,较好的有西门塔尔牛、海福特、红安格斯、德国黄牛、利木赞牛。