烟草叶片直接再生-基因转化体系的建立

烟草叶片在附加激素IAA与BA的MS培养基上表现出不同的分化途径和分化频率,不同浓度的IAA、BA配比,可分别导致愈伤组织的形成,根、芽和胚状体的直接分化。在MS + 0 .1mg/LIAA + 0 .5mg/LBA的B处理培养基上,叶片外植体边缘细胞经器官发生途径高频率直接再生植株,而该分化过程受到卡那霉素的强烈抑制,因而可以做为共培养法进行烟草基因转化的良好体系。     

烟草花粉管通道导入外源DNA研究初探

以不同浓度的 pIG12 1Hm质粒DNA为供体 ,在烟草授粉后不同时期 ,采用不同的方法经花粉管通道导入 ,收获的种子经卡那霉素 (Km )抗性筛选。结果表明 ,在授粉后 10h ,DNA浓度为5 0 0 μg/ml,采用注射的方法可得到最大转化率 (2 3.5 % )。     

烟草5-磷酸脱氧木酮糖还原异构酶基因(dxr)的克隆和表达分析

以烟草(Nicotiana tabacum)栽培品种K326为材料,采用RT-PCR技术,克隆了萜类代谢关键酶烟草5-磷酸脱氧木酮糖还原异构酶(dxr)的cDNA片段.该基因编码区长1422 bp,编码473个氨基酸残基.利用Clustal W(1.82)和Bioedit软件,对烟草与番茄(Lycopersicon esculentum)、长春花(Catharanthus roseus)、金鱼草(A ntirrhinum majus)、薄荷(Mentha piperita)、玉米(Zea mays)、拟南芥(A rabidopsis thaliana)、念珠藻(Nostoc sp.)等物种dar基因的同源性进行分析,其氨基酸同源性分别达到93.6%、87.9%、86.3%、84.6%、84.2%、82.9%和53.5%.原核表达结果证明,该基因编码蛋白的分子量约为50 kD,与氨基酸序列估算相符合.组织表达特异性分析表明,dxr基因在烟草组织中的表达强弱为花>叶>茎>腺毛>种子>根,在花和叶片中的表达量占优势.该结果对烟草萜类代谢的分子调控和品质改良具有重要的参考价值.     

遮荫对烟草叶片腺毛形态结构及分泌物含量的影响

采用显微和超微技术,对遮荫条件下及正常光照条件下烟草叶面腺毛密度及形态结构进行了比较研究.结果发现,正常光照条件下,腺毛密度大,腺毛细胞数目稳定,细胞内含物充盈,细胞轮廓模糊,叶绿素荧光较弱,细胞内黑色嗜锇颗粒数目多,体积大,细胞壁附近有黑色嗜锇物质沉淀;遮荫条件下,腺毛密度较小,细胞数目稳定,细胞质稀薄,腺毛细胞轮廓清晰,叶绿素荧光强烈,细胞内叶绿体结构完整,基粒类囊体片层结构清晰可见,黑色嗜锇颗粒较小、数量较少.对不同光照条件下烟草叶面浸提物进行GC/MS分析,遮荫条件下烟草腺毛主要分泌物-西柏三烯二醇的含量明显低于正常光照条件.表明光照度对烟草叶面腺毛的发育及分泌活动具有显著影响.     

PAP基因cDNA克隆及烟草转基因研究

以美洲商陆(Phytolacca americanaL.)为材料,利用RT-PCR方法克隆商陆抗病毒蛋白(PAP)的cDNA,并构建双元植物表达载体pBinARpap.用捕获该质粒的根癌农杆菌菌株LBA4404与烟草叶片外植体共培养,并在附加30 mg.L-1Kan的MS 0.1 mg.L-1IAA 1.5 mg.L-1BA的培养基上诱导植株分化,再生芽在附加30 mg.L-1Kan的MS培养基上生根,实现再生植株.Kan阳性植株经PCR-Sourthern检测筛选,得到PCR阳性植株,证明异源PAP基因在烟草基因组中的整合;经过RT-PCR检测,证明PAP基因在RNA转录水平上有表达;攻毒试验表明,转基因烟草植株对供试病毒TMV具有明显抗性.     

黑暗诱导烟叶衰老过程中质体色素代谢规律研究

以烟草栽培品种K326为实验材料,在中部叶叶龄50 d时,对其进行单独叶片黑暗诱导衰老(individually darkened leaves,IDLs)处理,研究了烟叶质体色素及其降解成分含量变化、叶片衰老和质体色素代谢的关键基因表达规律。结果表明:在衰老过程中叶绿素和类胡萝卜素都在不断降解,在IDLs处理的第5 d时成熟特征显著;在IDLs第5 d衰老基因表达明显增强或减弱,色素合成基因表达减弱,分解基因表达显著增强。     

荒漠绿洲——额济纳胡杨林自然保护区

内蒙古额济纳胡杨林自然保护区地处内蒙古阿拉善盟额济纳旗境内。由于胡杨林分布在额济纳河流域东、西两河及其１９条干、支流的河漫滩上,所以自然保护区依据胡杨林自然生长的地形及地理位置,又分为东、西两个分区。即东———七道桥分区和西———赛汉陶来分区。七道桥分...     

介绍一种复膜氧传感器组合装置

对养殖水体的溶氧进行自动、连续监测,无论是为养殖实验提供数据,还是用于现场监测,以防突发性缺氧使生产遭受损失,都具有重要的意义。在海洋水质监测中,自动连续溶氧监测仪器已广泛使用,但在水产养殖中,由于水体中大量的浮游生物、碎屑、鱼体排泄物的存在,使得安装于现场用于自动监测的氧传感器(指复膜氧传感器)很快就被各类悬浮物严重附着而不能正常工作。为阻止养殖水体中各类悬浮物对固定于养殖现场的氧传感器的附着,我们设计了一种复膜氧传感器组合装置,很好地解决了这类问题,现将此装置介绍如下:1、结构组成该复膜氧传感器组合装置结…     

加入WTO后森林认证工作势在必行

过去的 2 0年中 ,全球的森林问题越来越突出 ,森林面积减少 ,森林退化加剧。人们普遍认为引起森林问题的根本原因是政策失误 ,市场失灵和机构不健全。国际社会、各国政府以及非政府环境保护组织对此表示了极大关注 ,并采取了一系列的行动。1　森林认证的起源与背景森林认证是由环境非政府组织和民间组织认识到一些国家在改善森林经营中出现的政策失误 ,国家政府间组织解决森林问题效果有限 ,以及林产品贸易不能证明其产品源自何种森林以后 ,做为促进森林可持续经营的一种市场机制 ,在 2 0世纪 90年代初发起并逐渐发展起来的。它力图通过对森…