犬细小病毒ELISA抗体检测试剂盒的研制及应用

本研究以纯化的犬细小病毒(CPV)重组VP2蛋白为包被抗原,建立了检测CPV抗体的间接ELISA 方法,其抗原包被浓度为0.158μg/mL;待检血清稀释倍数为1:100,作用时间为60 min;羊抗犬酶标抗体稀释倍数为1:2 000,作用时间为60 min;底物作用时间为10 min;判定标准为S/P≥O.282时为阳性,S/P≤0.226时为阴性.该方法与犬瘟热、犬传染性肝炎、犬副粘病毒病、犬波特氏杆茵痛等4种犬常见传染病阳性血清无交叉反应,具有较好的特异性;批内、批间重复试验变异系数均小于15%,显示该方法具有良好的重复性;与商品化CPV ELISA试剂盒进行比较,符合率为96.5%.本研究为现地免疫犬群抗体监测和进行CPV流行病学调查提供了一种简便的血清学诊断方法.     

新疆美利奴羊对绵羊慢病毒自然感染的品种敏感性研究

用绵羊进行性肺炎病毒(OPPV)实验感染新疆美利奴羊的研究业已证实,新疆美利奴羊对OvLA美国株(OPPV)的敏感性很低,且呈现亚临床性感染。本项目通过对自然感染绵羊慢病毒新疆株的新疆美利奴羊的长期研究,试图进一步证实新疆美利奴羊是对OvLV的低敏感性品种。     

禽流感病毒A/Goose/Guangdong/3/96(H5N1)NA基因克隆及序列分析

采用RT-PCR技术扩增了禽流感病毒A/Goose/Guangdong/3/96(H5N1)(GD3/96)NA基因，并对其进行了克隆与测序，该苷酸序列测定结果表明：NA基因全长为1410bp，共编码469个氨基酸。其序列与A/Hongkong/156/97(H5N1)、A/Chicken/HongKong/220/97(H5N1)、A/Goose/guangdong/1/96(H5N1)及A/teal/Hongkong/W312/97(H6N1)分离株核苷酸序列的同源性在88.4%-99.0%之间，其相应氨基酸序列的同源性在89.8-99.2%之间。氨基酸序列与香港流感分离株氨基酸序列相比，在茎部没有出现19个氨基酸残基的缺失，表明香港流感毒株由我国大陆禽流感病毒株直接进化而来可能性不大。     

绵羊慢病毒北疆株自然感染新疆美利奴羊的病理学

绵羊慢病毒 ( ovine lentivirus,Ov LV)有 3型。1型为溶解型 ,主要有流行于欧洲的梅迪 -维斯纳病毒( maedi- visna virus,MVV) ,即原型病毒冰岛株 ,以及美国的绵羊进行性肺炎病毒 ( ovine progressivepneumonia virus,OPPV) ,即 Ov LV美国株等。1型可引起淋巴组织样间质性肺炎 ( lymphoid intersti-tial pneumonia,LIP)与淋巴滤泡形成、淋巴细胞性乳腺炎和非化脓性脑 (白质 )炎 ,OPPV及某些MVV株还可引起非化脓性关节炎。2型为非溶解型或持久感染型 ,持久感染细胞培养但不溶解细胞单层 ,只形成极少量的合胞体。 2型可引起轻度 LI…     

牛流行热病毒人工感染牛外周血淋巴细胞T淋巴细胞亚类的分布研究

通过人工接种，使牛患牛流行热，并以流式细胞术分析了患牛高热期外周血中CD3^ 、CD4^ 、CD8^ 、γδT淋巴细胞和B淋巴细胞的分布情况。结果表明，高热期患牛外周血中CD4^ 细胞数明显升高，说明细胞免疫在牛流行热中的重要性；其它淋巴细胞亚类百分率无显著变化，但CD3^ 、CD8^ 和B淋巴细胞也有一定程度的提高；在反刍动物中起重要作用的γδT淋巴细胞则表现为下降，其作用尚需进一步探讨。本研究首次证明，BEFV可显著刺激牛外周血淋巴细胞CD4^ 的急剧增殖，证明牛流行热病程中细胞免疫可能起着重要作用。     

北疆绵羊慢病毒感染的血清学调查

北疆某羊场的５群成年新疆美利奴母羊，用琼脂凝胶免疫扩散试验检查其对绵羊慢病毒（ｏｖｉｎｅｌｅｎｔｉｖｉｒｕｓＯｖＬＶ）的血清抗体。１０７５只受试母羊中，８只为血清学阳性，６只为血清学可疑，平均血清学阳性率为０．８５％（０．７％～１．０％）。在８只血清学阳性母羊中，７只来自第３群而另１只来自第５群。６只母羊有对ＯｖＬＶ核心蛋白ｐ２６的血清抗体，１只有对ＯｖＬＶ包膜蛋白ｇｐ１３５的抗体，１只有对ｐ２６与ｇｐ１３５二者的抗体。由１５６只老母羊组成的第３群的血清学阳性率为４．５％，与２岁的第２群、４岁的第１，４群的血清学阳性率０和３岁的第５群的０．４％相比，结果证明血清学阳性率随年龄增长而增加。此外，还讨论了ＯｖＬＶ感染的控制、新疆美利奴羊对ＯｖＬＶ的品种敏感性等问题     

转基因表达的时空调控

建立转基因表达的时空调控系统,对于分析基因在组织或发育阶段的特异表达,以及建立研究外源基因表达、调控的动物模型等方面,具有极其重要的应用价值。论文综述了近年来基于四环素(tetracy-cline,Tet)的调控系统,基于酵母转录激活蛋白,小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)和RNA干扰(RNA interference,RNAi)等转基因表达的时空调控技术研究进展。     

反义RNA重组逆转录病毒逆转录套式PCR检测方法的建立

为探求一种快速检测反义RNA重组逆转录病毒效价的新方法，用脂质体介导法将反义RNA重组逆转录病毒载体pLXSA、pLXSB分别转染包装细胞系PA317，经G418筛选，获得数个稳定的产毒细胞克隆，择优挑选7个细胞克隆扩增培养，收集细胞上清，用异硫氰酸胍-酚一步法提取病毒RNA，进行逆转录套式PCR，检测细胞上清中的反义RNA重组逆转录病毒效价，同时用传统方法（小鼠成纤维放大法）进行测定。2种方法检测结果的比较表明，逆转录套式PCR法的特异性和敏感性均高于小鼠成纤维放大法，是一种敏感性高、特异性强、操作简便、快速的检测逆转录病毒效价的新方法。     

H9N2亚型禽流感病毒对海兰白鸡感染和传播特性的研究

为研究H9N2亚型禽流感病毒(AIV)对海兰白鸡的感染和传播特性,将80只4周龄海兰白鸡随机分为8组,每组10只,其中感染组5只,同居组5只,采用100~107EID50/0.4 m LH9N2 AIV以滴鼻和点眼方式攻毒,24 h后放入同居组。感染14 d内每天进行临床观察,采集咽拭子和泄殖腔拭子用于病毒分离,感染后7、10、14 d测定HI抗体滴度。结果表明:4周龄海兰白鸡感染H9N2 AIV后未出现明显的临床症状;感染剂量为100~101EID50/0.4 m L的感染组和同居组均未分离到病毒;感染剂量为102~103EID50/0.4 m L的感染组排毒期为2~6 d,同居组排毒期为4~6 d;感染剂量为104~107EID50/0.4 m L感染组排毒期为1~6 d,同居组排毒期为2~8 d;感染剂量为102~107EID50/0.4 m L感染组和同居组鸡分别于感染后7和10 d开始产生抗体,第14天感染组和同居组鸡的平均抗体滴度分别为(7.8±1.4)log2和(6.7±1.1)log2。结果显示该毒株使4周龄海兰白鸡全部感染的最低感染剂量为103EID50/0.4 m L,以106EID50/0.4 m L感染鸡,能刺激感染组与同居组产生较高的HI抗体,表明106EID50/0.4 m L H9N2亚型AIV能在海兰白鸡体内建立有效感染和传播。     

薄皮甜瓜新品种靓妹的选育及示范(摘要)

靓妹薄皮甜瓜是杂交一代新品种。该品种早熟,子蔓孙蔓均可结瓜;果实长椭圆形,黄白色,靓丽,桔红色瓤,水粉色肉,肉质甜脆爽口,可溶性固形物含量18％,肉厚1.8厘米左右,单瓜重400～600克,单产3700～4800千克／667米^2,高抗枯萎病、蔓枯病、炭疽病,耐贮运,适于大棚、小拱棚及露地地膜覆盖栽培。