禽流感病毒H7亚型血凝素基因的原核表达及鉴定

参考已发表的禽流感病毒(AIV)H7亚型血凝素(HA)基因序列设计引物，经RT-PCR扩增了AIV-H7亚型的HA1基因片段，再将该片段定向插入到原核表达载体pGEX-4T-2中，转化大肠埃希氏菌。重组表达栽体经酶切和测序鉴定后，用IPTG诱导表达。用Western-blotting和ELISA试验鉴定表达产物的抗原性。结果表明，融合表达蛋白能与AIV H7N1、H7N2、H7N7和H1N1亚型标准抗血清反应，而与H5N1、H9N2等其他13个亚型的抗血清无交叉反应。     

AsiaⅠ型口蹄疫病毒VP1基因在昆虫细胞/杆状病毒中的表达

利用杆状病毒表达系统对Asia Ⅰ型口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)VPl基因在Sf9昆虫细胞中进行表达,为研究Asia Ⅰ型FMDV VP1蛋白功能及建立Asia Ⅰ型FMDV血清学诊断方法奠定基础.采用PCR方法从pGEM-T-Easy-Asia Ⅰ型VP1质粒中扩增VP1基因,将其插入杆状病毒转座载体pFastBacHTA,构建的重组质粒pFast-BaeHTA-VPl再转入DH10Bae感受态细胞,经三重抗性与蓝白斑筛选,获得杆状病毒重组质粒Baemid-VPl,然后转染Sf9昆虫细胞.PCR鉴定证实VP1基因正确地插入到Bacmid中,成功构建了杆状病毒重组质粒Baemid-VP1,SDS-PAGE和West-ern-blotting检测结果表明,VP1基因在Sf9昆虫细胞中表达出约26.5 ku的VP1蛋白.将可溶性表达的融合蛋白用Ni-NTA亲和层析方法进行纯化,通过ELISA分析,能特异性地检测出Asia Ⅰ型口蹄疫病毒阳性血清.Asia Ⅰ型FMDV VP1基因在杆状病毒表达系统中的成功表达为Asia Ⅰ型FMDV VP1蛋白的抗原性及血清学抗体水平检测研究奠定了基础.     

民勤县病死畜禽无害化处理监管机制探讨

民勤县是甘肃省的养羊大县,畜牧业发展已成为全县经济发展的支柱产业和农民增收的优势产业,养殖户对病死畜禽无害化处理不到位现象时有发生,给周围环境、人类健康等造成严重的潜在威胁。为此,笔者以病死畜禽处理过程为例,就病死畜禽无害化处理过程的运输、核查和处置环节进行详细阐述和总结,为今后一个时期做好病死畜禽无害化处理工作指明方向,为有效开展病死畜禽无害化处理工作提供重要依据。     

不同氮肥运筹对棉花产量及土壤养分的影响

为降低棉花的施肥成本,为减量优化施肥提高棉花收益和降低养分损失风险提供理论依据,通过不同氮肥运筹研究减量施肥对棉花产量、不同生育期土壤硝态氮含量及收获后和种植前土壤养分变化的影响。结果表明,CRF处理在减氮33.3%的情况下,棉花产量比农民习惯施肥（FP）处理略有下降,OPT和OF-CF处理减氮23.8%,与FP相比均提高了棉花产量;在棉花不同生育期,减量施肥处理的土壤硝态氮淋溶损失风险较低;棉花收获后各减量施肥处理的大部分养分含量指标高于种植前,CRF处理的养分积累程度较低,养分损失的风险最低。综合考虑产量及环境效应,在本试验条件下,CRF处理在减氮33.3%的情况下,棉花产量较高,同时不会造成养分较多积累,养分损失风险低;其次是OPT和OF-CF处理,肥料用量仍有进一步降低的潜力。     

苏云金芽胞杆菌防治植物寄生线虫的研究进展

植物寄生线虫是一类重要的植物病原生物,给农业生产造成巨大的损失.传统方法防治植物寄生线虫都存在一定的局限性.研究发现苏云金芽胞杆菌对线虫有毒杀活性,为防治植物寄生线虫寻找到了一条新途径.文章介绍了苏云金芽胞杆菌防治植物寄生线虫的研究现状,着重阐述了苏云金芽胞杆菌的杀线虫晶体蛋白及其基因、杀线虫机制等方面的研究进展,并探讨了其中存在的问题及其对策.     

优质粳型不育系爱知香A的选育与利用

爱知香A是用日本优质抗病粳稻品种爱知香与BT型不育系六千辛A测交并连续回交转育而成的早熟中粳不育系，具有米质优、抗病性强，农艺性状优良、花粉败育彻底、配合力好等特点，2002年8月通过江苏省技术鉴定，2003年1月通过江苏省品种审定。利用其配制的杂交粳稻新组合香优18(爱知香A/MR18)表现优质，高产，抗病，于2003年1月通过江苏省品种审定。     

鸭病毒性肝炎并发大肠杆菌病的诊治

20 0 2年 4月微山县夏镇某养鸭户饲养的 40 0 0只蛋雏鸭 ,于 6d龄时发生一种急性、高死亡率、有角弓反张等神经症状的疾病 ,3天共死亡 2 36只 ,用抗菌素药物治疗无效来我局门诊部就诊。经临诊检查和实验室检验 ,确认为鸭病毒性肝炎并发大肠杆菌病。采取综合性防治后 ,病情得到了控制。1　临诊症状雏鸭突然发病 ,精神萎糜 ,食欲减少或废绝 ,行动迟缓 ,眼半闭呈昏睡状态。缩颈拱背、翅下垂 ,大多排绿色稀粪。不久病鸭出现神经症状 ,运动失调 ,全身性抽搐 ,死前头颈后仰 ,脚腿伸直 ,呈角弓反张状。2　剖检变化肝肿大、质脆、外观色暗淡或发黄 ,…     

鸡痘病毒282E4弱毒株TK基因限制性酶切图谱分析

以限制性内切酶ＢａｍＨＩ、Ｘｂａｌ、Ｃｌａｌ、Ｈ１ｎｄⅢ、Ｎｃａｌ对含有鸡痘病毒（ＦＰＶ）２８２Ｅ４弱毒株３．７ｋｂＨｉｎｄⅢＴＫ基因片段的重组质粒ｐＳＬ１进行单酶和它们之间双酶酶切。结果表明：３．７ｋｂＨｉｎｄⅢＴＫ基因片段上有２个Ｃｌａｌ切点，２个Ｘｂａｌ切点，１个Ｎｃａｌ切点，没有ＢａｍＨＩ切点。随后，用澳大利亚ＦＰＶ２．２ｋｂＨｉｎｄⅢ＋ＣｌａｌＴＫ基因作探针，对各种酶切片段进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交，进一步确定ＴＫ基因位于２．２ｋｂＨｉｎｄⅢ＋Ｃｌａｌ片段中。杂交结果与限制性酶切图谱分析结果相一致。该基因的限制性酶切图谱与澳大利亚ＦＰＶ疫苗株的基本相同。