规模化养殖场猪伪狂犬病的诊断

正猪伪狂犬病常引起妊娠母猪流产、产死胎、木乃伊胎以及新生仔猪的呼吸道损伤和神经症状。仔猪的发病率最高可达100%,给我国养猪业造成了巨大的损失。1发病情况及临床症状天津某猪场有基础母猪600头,2014年1月份开始出现流产,在20天的时间里有48头母猪出现流产或产死胎。此外,还有3头母猪早产(107天),母猪体温38.3℃~38.7℃,没有其他异常表现。新生仔猪有少数出现拉稀、侧卧、四肢划动、吐白沫等症状,2~3天内死亡。对发病仔猪剖检发现肺有严重的出血性坏死,脾、肾也有瘀血和坏死。     

大花卷丹离体培养快速繁殖体系的建立

以大花卷丹为试材,以MS培养基为基础培养基,附加不同种类和质量浓度的植物生长调节剂(6-BA、NAA),研究大花卷丹离体培养快速繁殖技术。结果表明,鳞片组培快繁的最佳取材部位是中层鳞片。大花卷丹不定芽分化最佳培养基为MS+NAA 0.3mg/L+6-BA 1.5mg/L,其分化率可达76.7%。最佳增殖培养基为MS+NAA 0.2mg/L+6-BA 2.0mg/L,增殖系数达到4.91;最佳生根培养基为MS+IAA 0.2mg/L,生根率达到96.7%,平均每苗根数可达8.8条。移栽前期最佳的基质配比为河沙∶草炭土=1∶1,成活率达到76.0%。     

犬细小病毒病PCR检测方法的建立及应用

犬细小病毒病感染是由犬细小病毒（cPv）引起犬只死亡的最重要传染病之一,目前诊断该病的方法主要是胶体金快速检测试板法,虽然检测方法较简便快速,但其敏感性较差。通过对NCBI网站GenBank发表的CPV-2基因组序列的分析,选择该病毒VP2基因保守序列设计引物,通过对阳性病料扩增及扩增产物测序,与NCBI发表的相关基因对比,同源性在99．8％-100％,成功建立了特异性、灵敏度高的PCR方法,最低只需2．5PgDNA模板。在对28例可疑CPV病例检测中,本方法检出25例阳性、3例阴性,阳性率为89．28％;胶体金检测板检测出20例阳性、8例阴性,阳性率为71．42％,证实PCR方法比胶体金检测更敏感。     

法国小麦种质VPM抗性系统的分子标记检测

为了从引进的法国小麦种质中筛选出含有Lr37-Yr17-Sr38基因簇和Pch1基因的种质材料,本研究利用标记引物VENTRIUP-LN2和标记引物XustSSR2001-7DL分别对118份法国小麦种质进行了分子检测,从中筛选出了8份含有Lr37-Yr17-Sr38基因簇的种质和5份含有Pch1基因的种质材料,其中NSA98-1417这一材料同时含有Lr37-Yr17-Sr38基因簇和Pch1基因。这些材料的检出为实现VPM抗性系统向国内小麦种质的转入奠定了材料基础。     

苏云金芽胞杆菌CT-43内生质粒pBMB0558上virD4基因的功能

苏云金芽胞杆菌CT-43高产苏云金素,其内生质粒pBMB0558上virD4基因编码的VirD4蛋白与Ⅳ型分泌系统中结合底物的偶合蛋白(T4CPs)高度同源.本研究利用插入缺失突变方法,构建同源双交换载体,敲除CT-43中的virD4基因,得到1株突变株BMB1122.HPLC检测结果显示,突变株BMB1122发酵上清...     

AsiaⅠ型口蹄疫病毒VP1基因在昆虫细胞/杆状病毒中的表达

利用杆状病毒表达系统对AsiaⅠ型口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)VP1基因在Sf9昆虫细胞中进行表达,为研究AsiaⅠ型FMDV VP1蛋白功能及建立AsiaⅠ型FMDV血清学诊断方法奠定基础。采用PCR方法从pGEM-T-Easy-AsiaⅠ型VP1质粒中扩增VP1基因,将其插入杆状病毒转座载体pFastBacHTA,构建的重组质粒pFastBacHTA-VP1再转入DH10Bac感受态细胞,经三重抗性与蓝白斑筛选,获得杆状病毒重组质粒Bacmid-VP 1,然后转染Sf9昆虫细胞。PCR鉴定证实VP1基因正确地插入到Bacmid中,成功构建了杆状病毒重组质粒Bacmid-VP1,SDS-PAGE和Western-blotting检测结果表明,VP1基因在Sf9昆虫细胞中表达出约26.5 ku的VP1蛋白。将可溶性表达的融合蛋白用Ni-NTA亲和层析方法进行纯化,通过ELISA分析,能特异性地检测出AsiaⅠ型口蹄疫病毒阳性血清。AsiaⅠ型FMDV VP1基因在杆状病毒表达系统中的成功表达为AsiaⅠ型FMDV VP1蛋白的抗原性及血清学抗体水平检测研究奠定了基础。     

野生渥丹离体培养再生体系的研究

[目的]探索适合的渥丹组织培养方法。[方法]以野生渥丹不同部位的鳞片为外植体,研究不同灭茵时间、不同培养基对外植体组织培养过程的影响。[结果]不同的灭菌时间对鳞片污染率的影响不同,均随着灭菌时间的延长呈显著下降的趋势。不同部位的鳞片污染率差异较大,外部鳞片污染率最高,其次是中部,内部鳞片污染率最低。随着升汞溶液消毒时间的增加,各部位鳞片的增殖系数呈逐渐降低的趋势。以中部鳞片为外植体,灭茵时间为6＋6（min）的效果较好,污染率为59．5％,增殖系数为2．57。诱导不定芽的最适培养基为MS＋NAA0．1mg／L＋6-BA2．0mg／L,增殖系数为4．08。[结论]该研究为保护渥丹种质资源和研发具有自主知识产权的品种奠定了基础。     

施用水溶性螯合肥对章丘大葱生物性状及 品质的影响

本研究通过田间试验,研究了螯合肥施用与常规施肥对章丘大葱生物性状和营养品质的影响。结果表明,施用相同肥料用量的螯合肥处理的章丘大葱生物量在8、9和10月时明显要高于常规施肥和对照,在11月份收获时产量没有差异;不同时期收获时大葱的株高和葱白均明显高于常规施肥。施用螯合肥比常规施肥处理明显提高了章丘大葱的营养品质,不仅可以提高葱白的维生素C含量,而且还可以降低葱白的硝酸盐含量。因此,在相同肥料用量的情况下,施用螯合肥处理要明显优于常规施肥,通过改变传统用肥种类可以提高大葱的品质。     

山东省主要耕地土壤的养分含量及空间变异分析

采用GPS定位研究了山东省三大土类主要耕地的养分空间变化情况。结果表明,山东的绝大部分耕地存在有机质含量普遍较低,绝大部分土壤的氮在麦收后呈缺乏状态,山东主要耕地土壤的供磷情况是尽管中高磷含量的耕地占有一定比例,但土壤的有效磷水平整体偏低;山东耕地的钾供应情况是钾素供应充足,无缺钾情况。影响山东三大土类的耕地质量高低的主要养分因子是有效磷和速效钾,其次是有机质和碱解氮,pH值影响最小,但土壤酸化现象不容忽视。因此,在山东省应因地制宜,提高施肥措施,改善肥料施用结构,防止土壤酸化,才能保持山东主要耕地的生产力。     

耐盐种质芙蓉菊与6种菊属植物的营养器官解剖结构特征

以菊科芙蓉菊属的芙蓉菊和6种菊属植物(野生种:野菊(天堂寨)、野菊(天柱山)、毛华菊(安徽),品种:‘繁花似锦’‘寒露红’‘毛香玉’)的幼苗为试验材料,以NaCl浓度为200 mmol·L~(-1)的Hoagland营养液进行盐胁迫处理,在盐胁迫0、5、10、15 d分别取各材料的根、茎、叶,制作石蜡切片后用光学显微镜观察并测量其解剖结构特征值。结果显示:芙蓉菊为等面叶而6种菊属植物均为异面叶,芙蓉菊叶肉栅栏组织较发达,且在盐胁迫下栅栏组织变疏松,细胞间隙增多;芙蓉菊相对6种菊属植物其根与茎中的维管组织更为发达,对水分的输导能力更强。芙蓉菊在盐处理15 d后仍能保持根、茎、叶解剖结构的完整,而6种菊属植物的解剖结构从盐胁迫5 d开始就出现了不同程度的细胞解体和组织损坏,且叶和根相对于茎受到的盐害影响更大。盐胁迫下,芙蓉菊叶片中的栅栏组织厚度/叶厚、茎中的皮层厚度/茎半径、根中的中柱直径/根直径随胁迫时间延长而升高,同时茎和根中具有发达的维管组织,明显区别于6种菊属植物,都是其应对盐胁迫的积极响应,推测是其具有耐盐性的重要原因。