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【目的】克隆葡萄糖酸脱氢酶(GADH)小亚基基因ga2dh并进行鉴定。【方法】研究水稻根际细菌Serratia sp.NDW3溶磷过程中菌株溶磷量、GADH活性与ga2dh基因表达量的变化,对ga2dh基因进行克隆和生物信息学分析,并检测ga2dh基因在大肠埃希菌BL21中的表达。【结果】Serratia sp.NDW3溶磷过程中ga2dh基因的相对表达量在12 h最大,GADH活性在24 h达到最大值,NDW3溶磷量在36 h后趋于稳定。从Serratia sp.NDW3菌株中克隆获得了781 bp的ga2dh基因序列,生物信息学分析发现该序列与Serratia sp.SCBI菌株的基因相似性为99.62%,编码的蛋白属于葡萄糖酸脱氢酶亚基3超家族,主要由3个α-螺旋构成,且氨基酸序列中包含有位于胞内、胞外和跨膜的区域。ga2dh基因在大肠埃希菌BL21体内表达,能够使得菌体GADH的活性显著增加。【结论】Serratia sp.NDW3菌株溶磷的主要机制依赖于直接氧化途径,ga2dh基因编码的小亚基不仅对GADH活性起重要作用,也是介导GADH跨膜结构的重要组成部分。 相似文献
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试验选取144羽1日龄肉鸡随机分为4个处理组,每组3个重复,每个重复12只鸡。Ⅰ组为对照组(基础日粮,不添加任何饲料添加剂)、Ⅱ组为微生态制剂组(基础日粮添加产酶益生素)、Ⅲ组为抗生素组(基础日粮添加抗生素)、Ⅳ组为微生态制剂、抗生素联合使用组(基础日粮添加微生态制剂和抗生素)。试验结果表明,Ⅲ组肠道内容物、血液、肝脏中内毒素含量均高于其他试验组,血清TNF-α、IL-6含量也较高。使用抗生素与使用微生态制剂、不使用任何添加剂比较,肉鸡血液、肠道、肝脏内毒素含量水平较高;微生态制剂组与对照组比较,内毒素含量相当或者偏低。 相似文献
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选用妊娠85日龄(即产前1个月)的怀孕母猪40头,随机分为饲喂发酵液的试验组和不含发酵液的对照组,每周收集1次粪便,测定粪便水分含量、乳酸菌和大肠杆菌数量,记录母猪的产仔性能,仔猪的出生重,断奶重和腹泻率。结果表明:试验组母猪粪便中乳酸菌含量除第一周外均高于对照组,差异显著(P<0.05),大肠杆菌含量稍低于对照组,差异不显著;试验组仔猪腹泻率2周后均低于对照组,差异显著(P<0.05);试验组母猪产仔性能高于对照组,差异不显著;出生重与断奶重均高于对照组,差异显著(P<0.05)。 相似文献
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<正>本研究对一株产酸能力较强的凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)发酵液pH值及其产有机酸的能力和发酵时间进行了测定。1材料与方法1.1凝结芽孢杆菌液体发酵液pH值变化将凝结芽孢杆菌由斜面转接入三角瓶中,震荡培养液体种子18~24 h。再将液体种子按2%接入基础培养基中,每隔1 h检测pH值变化,测定其pH值最低点及时间。1.2仪器与试剂LC-20A高效液相色谱仪、SHZ-ⅢD型循环水真空泵、MS105DV电子天平、TGL台式离心机;草酸、酒石酸、苹果 相似文献
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【目的】明确2株有机磷降解菌Yj2和Yj3对大豆卵磷脂和乐果有机磷的降解特性及酶活性。【方法】利用16S r DNA鉴定从大豆土壤中分离得到的Yj2和Yj3菌株,在菌株最佳生长条件下,测定了不同磷源时菌体的酶活性并分级纯化了有机磷降解酶。【结果】Yj2为醋酸钙不动杆菌Acinetobacter sp.,其最佳生长碳源为葡萄糖,氮源为硫酸铵,p H为8;Yj3为芽孢杆菌Bacillus sp.,其最佳生长碳源为葡萄糖,氮源为蛋白胨,p H为9。大豆卵磷脂为磷源时,Yj3的菌体生长情况稍优于Yj2。乐果为磷源时,Yj2的菌体生长情况稍优于Yj3;72 h内Yj2酸性和碱性磷酸酶活性整体高于Yj3,而有机磷降解酶活性低于Yj3。硫酸铵沉淀法+阳离子交换层析分别从Yj2和Yj3菌体中成功分离纯化了有机磷降解酶,SDS-PAGE结果显示纯化的蛋白均为单一条带。Yj2硫酸铵沉淀法+阳离子交换层析的提纯倍数是硫酸铵沉淀的7.77倍,硫酸铵沉淀为粗酶的1.35倍。Yj3硫酸铵沉淀法+阳离子交换层析的提纯倍数是硫酸铵沉淀的5.07倍,硫酸铵沉淀为粗酶的1.53倍。【结论】菌株Acinetobacter sp.Yj2和Bacillus sp.Yj3都具有降解大豆卵磷脂及乐果有机磷的特性,对有机磷降解起主要作用的是酸性磷酸酶、碱性磷酸酶及有机磷降解酶,它们在2株菌株对大豆卵磷脂和乐果降解过程中所起的作用有明显差异。可从Yj2和Yj3菌体分离纯化获得提纯倍数较高的有机磷降解酶蛋白。 相似文献
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棉粕富含丰富的蛋白质.但因其含有抗营养因子游离棉酚而使其使用量受到极大的限制。本研究采用HPLC法检测高压灭菌及烘干对棉粕中游离棉酚含量的影响。将棉粕按料水比1:1.2混匀.121℃高压灭菌30min.然后45℃烘干24h.检测其游离棉酚的含量变化。结果表明:棉粕原料中游离棉酚检测含量为1300.31μg/g;经高温灭菌后,其含量为77.29μg/g,降解率达94%;对灭菌样品进行烘干后。游离棉酚含量达到极低,未检测到峰.其降解率大于98%,但高温后生成何物质有待进一步研究。 相似文献