斑点叉尾(鲴)疱疹病毒PCR-ELISA检测方法的建立

针对斑点叉尾鲴疱疹病毒(CAV)的ORF6基因设计引物和探针,PCR产物在扩增过程中标记地高辛,探针5'端用生物素标记,建立了CCV的敏感、快速、环保的PCR-ELISA检测方法.对反应条件进行了优化,并评估了该方法的特异性和敏感性.结果表明:该方法可特异性检测CCV DNA,与各对照均无交叉反应,具有高度特异性;该方法对CCV DNA的检测阈值为5 fg,敏感性是常规PCR检测方法的10倍.用此方法对人工感染样品进行检测,能够检测到感染组织中的CCV DNA.该方法能够定性和半定量检测CCV DNA,可用于斑点叉尾(鲴)疱疹病毒的检测、斑点叉尾(鲒)暴发性流行病的诊断.     

板栗快速育苗技术

兴隆县位于燕山南麓 ,古长城脚下 ,气候温和 ,雨量适宜 ,土质多为花岗岩、片麻岩分化而成的砾质壤土 ,土质微酸 ,自然环境与气候非常适宜板栗的生长。兴隆县是燕山板栗的主产区 ,现有板栗资源 2万ｈｍ2 ,年产优质板栗 80 0 0ｔ,位于全国县级产量的第 2位。由于受市场经济的调节 ,群众发展板栗的积极性很高 ,年栽植板栗在 2 0 0万株以上。为解决苗木供不应求的状况 ,我们在不断的试验与实践中 ,总结出了一套板栗快速育苗的方法 ,可使板栗当年育苗当年出圃 ,达到地径1ｃｍ、苗高 0 .8ｍ的标准。现将主要技术介绍如下。1　种籽的选择当年出圃的…     

柱状黄杆菌间接ELISA快速检测方法的研究

应用间接酶联免疫吸附试验(Indirect-ELISA)技术,建立了快速检测柱状黄杆菌的方法。结果显示:根据棋盘试验,确定最佳抗原包被浓度和免疫血清最佳工作浓度分别为1×106cfu/mL和1∶5000,酶标抗体最佳工作浓度为1∶10000。在该条件下,所建立的间接ELISA能检测出5×104cfu/mL的柱状黄杆菌,且与爱德华氏菌、哈维氏菌弧菌、嗜水气单胞菌、副溶血弧菌等常见鱼类致病菌无交叉反应。结果表明,所建立的间接ELISA可不经细菌培养而直接检测人工感染后草鱼鳃组织中的柱状黄杆菌,该方法对柱状黄杆菌的检测具有快速、敏感、特异、实用的优点。