鸡传染性喉气管炎中和试验方法的研究

关于鸡传染性喉气管炎(ILT)的诊断,通常系采用临床观察、鸡胚接种、荧光抗体及包涵体等检查方法,这些方法应用于典型发病鸡虽不难达到确诊的目的,但对确诊临床表现不典型或感染耐过的鸡就较为困难。用琼扩方法诊断此病虽较快速简单,但检出率不高;而中和试验法具有高度的敏感性,但操作方法复杂,在一般条件下难以广泛应用。     

鸡病毒性关节炎

鸡病毒性关节炎是由呼肠孤病毒(Reovirus)引起的一种传染病,主要侵害关节滑膜、腱与心脏。以关节炎和腱鞘炎以及有时腓肠腱破裂为特征。此病首次报道于1957年,多数早期研究是在60年代后期完成的。在世界一些国家中均有发生和流行的报告,1967年在英国,1968年和1974年在美国,1969年在意大利和荷兰都对本病作了描述,分离出当地流行的毒株,研究了疫苗和特异诊断方法。我国以往对该病报道甚少,也没有特异性的诊断和调查方法。在一些鸡场中虽曾见     

中国禽流感流行株的分离鉴定

分别从广东、四川、新疆等地禽流感（ＡＩ）血检阳性、发病率高、产蛋率下降的鸡群中采集１８６份病料，先后分离到６株Ａ型流感病毒。这些分离株可在鸡胚中传代，可凝集鸡红细胞，血凝价达１６０～１２８０倍。不被新城疫、减蛋综合症、败血支原体阳性血清所抑制。用这些分离毒株制成琼脂扩散（ＡＧＰ）抗原与禽流感标准阳性血清可出现白色沉淀线。分别将分离毒株与ＡＩ标准分型血清Ｈ１～Ｈ１４、Ｎ１～Ｎ９进行ＨＩ、ＮＩ试验，结果川和川农株均为Ｈ４Ｎ６，西昌１和２株及Ｓｈ株均为Ｈ９Ｎ２，新疆石河子（石）株为Ｈ１４Ｎ５。分离株分别做脑内接种致病指数（ＩＣＰＩ）、静脉接种致病指数（ＩＶＰＩ）测定，结果所有分离株ＩＣＰＩ介于０２４～１４８之间，ＩＶＰＩ介于０１５～０５６之间．通过电镜观察，可见直径为８０～１２０ｎｍ球状或杆状典型的禽流感病毒．经联机检索，从新疆石河子ＡＩ阳性鸡场产蛋下降的鸡群中分离出的Ｈ１４Ｎ５株为国内外首次从鸡中分离出的Ｈ１４亚型禽流感病毒。将某单位送检的禽流感鹅体分离株（Ｇ１株和Ｇ２株）做了血清型和毒力测定，试验结果认定，Ｇ１和Ｇ２株均为Ａ型禽流感病毒Ｈ５Ｎ１亚型，Ｇ１、Ｇ２株对鸡均达到高致病力毒株标准。     

H9亚型禽流感油乳剂灭活苗免疫、免疫后攻毒及人工感染鸡抗体的监测

本研究采用ＡＧＰ、ＨＩ等试验方法，对经Ｈ９亚型禽流感油乳剂灭活苗免疫、免疫后攻毒以及经Ｈ９Ｎ２活毒人工感染后的ＳＰＦ鸡抗体产生、消长规律进行了测定，结果表明人工感染ＳＰＦ鸡和免疫鸡一周后，ＡＧＰ的检出率即可达到１００％；Ｈ９亚型禽流感油乳剂灭活苗自免疫后一周内即可产生ＨＩ抗体，２１－２８天达到高峰，并能对相同亚型病毒感染引发良好的免疫反应。     

鸡附红细胞体与白色念珠菌混合感染的研究

对某鸡场送检病、死黄羽肉鸡进行实验室诊断,在血液中检测到附红细胞体,同时从病鸡的嗉囊、腺胃分离出一株白色念珠菌。通过体外培养和杀灭试验分别筛选出对附红细胞体敏感的药物磺胺间甲氧嘧啶、附红净和对白色念珠菌敏感的药物制霉菌素、氟康唑。     

万象优 337 晚稻早种及栽培技术

万象优337系江西红一种业科技股份有限公司与江西省超级水稻研究发展中心,采用母本万象A与父本R337配组而成的优质三系杂交稻组合。2018年通过江西省品种审定(审定编号：赣审稻20180033),2019年通过广西品种审定(审定编号：桂审稻2019030号)。2019-2021年公司连续3年组织晚稻早种试验、示范,分别在樟树、抚州、南昌、吉安、余江5个试验点安排示范种植试验,平均产量为535.87kg/667m²,比对照泰优398增产0.72%。2022年通过江西省农作物品种审定委员会审定(审定编号：赣审稻20220014)。主要介绍了该组合晚稻早种及栽培技术。     

禽流感病毒A/Goose/Guangdong/3/96(H5N1)NA基因的克隆及其重组禽痘病毒转移载体的构建

采用RT－PCR技术扩增了禽流感病毒A／Guangdong/3/96(H5N1)[GD3/96]神经氨酸酶（NA）基因，并将其克隆到pUC18质粒中进行测序。核苷酸序列测定结果为：NA基因全长为1410bp，共编码469个氨基酸，从pUCNA中切下NA基因片段，将其亚克隆到质粒pSY538的EcoR I位点，将带有痘苗病毒启动子P11的LacZ基因平端克隆到该质粒的Sma I位点，然后切下同位含有NA及LacZ基因的片段，再亚克隆到禽痘病毒载体pSY681的Not I位点，经限制性内切酶分析，PCR鉴定等，证明含有禽流感病毒NA基因的重组禽痘病毒转移载体已构建成功，从而为进一步筛选表达NA蛋白的重组禽痘病毒及探讨该蛋白的免疫原性鉴定了实验基础。     

重新审视禽流感

禽流行性感冒(简称禽流感,Avian Influenza,AI)是由A型流感病毒引起的禽类烈性传染病,被国际兽疫局定为A类传染病,同时被列为国际生物武器公约动物传染病名单和中国进口动物检疫的严重疾病之一,可表现为急性致死性疾病到轻度呼吸系统疾病到亚临诊等多种形式。在禽流感发现流行以来的一百多年中,世界各地都有特定毒株引起的禽流感暴发和流行,造成了巨大的经济损失,禽流感在我国出现的时间虽短,但已经并正在给我国养禽业造成一定的经     

禽流感病毒NP cDNA反义逆转录病毒载体的构建及重组病毒的鉴定

根据反义ＲＮＡ作用原理,以禽流感病毒（ＡＩＶ）Ｈ１４Ｎ５　ｃＤＮＡ全长及５’端２３５个ｂｐ为目的基因,反向插入反转录病毒载体 ｐＬＸＳＮ中,命名为 ｐＬＸＳＮ－ＮＰ及 ｐＬＸＳＮ－ＮＰ,用脂质体包裹重组质粒转染包装细胞 ＰＡ３１７,Ｇ４１８筛选抗性克性,扩增单个克隆后提取包装细胞上清的病毒ＲＮＡ（ｖＲＮＡ）,以巢式ＰＣＲ方法检测,以及用包装细胞上清（重组病毒）感染滴定细胞系ＮＩＨ３Ｔ３,表明已筛选出产毒的的克隆细胞质,得到重组逆转录病毒,为反义ＲＮＡ抑制禽流感病毒复制的实验研究奠定了物质基础。     

RT-PCR快速诊断禽流感

根据禽流感病毒ＮＰ基因的序列分析结果,设计了一对ＮＰ基因特异的引物。采用该对引物,不经病毒分离,直接从禽流感病毒感染鸡的气管、泄殖腔棉拭子和组织样品中提取核酸, ＲＴ～ＰＣＲ可以扩增出 ３２６ｂｐ的 ＮＰ基因片段。采用该技术对１４个亚型禽流感病毒标准参考株,４个亚型１２株国内分离野毒株,ＲＴ－ＰＣＲ检测的结果都呈阳性;对新城疫病毒、传染性法氏囊病毒、传染性支气管炎病毒、传染性喉气管炎病毒以及减蛋综合症病毒,ＲＴ－ＰＣＲ扩增结果都呈阴性。禽流感病毒 Ａ／Ｇｏｏｓｅ／Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ（Ｈ５Ｎ１）和 Ａ／Ａｆｒｉｃａｎ　Ｓｔａｒｌｉｎｇ／Ｅｎｇｌａｎｄ（Ｈ７Ｎ１）实验感染鸡样品 ＲＴ－ＰＣＲ检测与鸡胚病毒分离阳性率分别为３４／４２、３２／４２; ２４／５５、２４／５５, 二者符合率大于９５％。 ＲＴ－ＰＣＲ最少可检测到１０ｐｇ的病毒核酸。对山东某地发病鸡场样品进行ＲＴ－ＰＣＲ检测,只用６个小时就可得出准确的诊断结果,证明ＲＴ－ＰＣＲ检测方法敏感特异,可用于禽流感的快速诊断。