青花菜肉桂酰辅酶A还原酶基因的克隆与表达特征分析

为研究肉桂酰辅酶A还原酶在青花菜生长发育中的作用,采用RT-PCR技术克隆青花菜Bo CCR基因全长c DNA序列,并利用q RT-PCR检测其在不同器官中的表达模式。结果表明:Bo CCR基因开放阅读框为987 bp,推导编码328个氨基酸。预测蛋白分子量为36.86 ku,PI值为6.04。该蛋白亲水性氨基酸多于疏水性氨基酸,为亲水性蛋白。高级结构预测表明青花菜Bo CCR蛋白具有完整的二级结构,三级结构的α-螺旋主要位于外部,β-折叠位于内部。分子进化分析显示CCR蛋白在植物进化过程中,各属形成单独的分枝,可以区分其亲缘关系。荧光定量技术检测到青花菜的Bo CCR基因在花蕾发育早期表达最高,推测该基因可能与青花菜花粉发育相关。     

甘蓝SSR标记在近缘种青花菜的通用性及其应用

本研究对50条甘蓝SSR引物在其近缘种青花菜中的通用性进行了分析,结果表明,38对引物在青花菜上可有效扩增,扩增产物分子量在100～1500bp,有效扩增比率为76%,其中18%具有较好的多态性,揭示了两种作物基因组间存在一定的相似性。同时利用获得的多态性较好的9对引物对青花菜进行基因型鉴定和遗传多样性分析,20份青花菜基因型中共检测到51个基因位点,平均每个引物组合可扩增出5.67个条带,多态性为66.7%。多引物组合可鉴别出所有青花菜基因型。聚类分析结果表明同一来源的基因型间具有相近的遗传基础,且聚类与熟性具有一定的相关性。本研究为今后青花菜种质资源的收集、利用及分子标记辅助育种提供了新的SSR标记和参考。     

花椰菜未受精子房、花托、花序轴离体培养诱导成苗研究

以花椰菜的花托、花序轴和未受了房为外植体,诱导出不定芽,并进行继代增殖培养,在工增殖培养基上每隔２５～３０天,不定芽可以增殖５～６倍,不加激素的１／２ＭＳ培养基上,试管苗生根率达到９８％以上,移栽成活率达到９５％以上。经观察,花托和未受精了再生植株是由外植体直接分化而来,不经过愈伤组织阶段,这样可避免不良变异,保持材料的遗传稳定性。     

东魁杨梅控梢促花试验

东魁杨梅引进温州栽培 ,表现为营养生长过旺 ,始果期迟和产量低 ,特别是种植在土层深厚的黄壤山地 ,表现尤为突出。应用植物生长调节剂可抑制杨梅树体营养生长 ,促进花芽分化。我们于 1998— 1999年对该品种进行控梢促花试验。现将试验结果报道如下。1　材料与方法　　试验设在瑞安市湖岭镇盘龙山村 ,供试品种为 10年生东魁杨梅 ,土壤为黄壤 ,p H值 4 .82。供试药剂为5%烯效唑超微可湿性粉剂 (江苏省张家港市联合化工厂制造 )和 15%多效唑可湿性粉剂 (浙江省兰溪农药厂制造 )。试验共 13个处理 ,处理 1:喷布烯效唑 2 0 0倍液 1次 ;处理 2 :…     

利用SSR和SRAP标记分析花椰菜自交系的遗传多样性

为选育优质花椰菜新品种,指导种质资源引进和利用,本研究采用简单重复序(simple sequence repeat,SSR)标记和相关序列扩增多态性(sequence-related amplified polymorphism,SRAP)标记对38份花椰菜自交系进行了遗传多样性分析,分别从48对SSR引物、48对SRAP引物中各筛选出4对有效引物。4对SSR引物扩增的总条带数为47个,多态性条带为39个,平均多态性比率达83.0%;4对SRAP引物扩增的总条带数为86个,多态性条带为51个,平均多态性比率为59.3%,该结果显示花椰菜自交系间具有较丰富的遗传多样性。UPGMA聚类分析揭示了花椰菜自交系的熟期与其遗传差异相关。     

非生物胁迫下青花菜LncRNA内参基因的筛选

长链非编码RNA在植物抵御逆境胁迫中起着重要作用。适宜的内参基因是准确评价其表达水平的基础。本研究利用实时荧光定量PCR技术检测16个青花菜LncRNAs表达水平,并通过geNorm、NormFinder、BestKeerper软件进行表达稳定性分析。结果表明：青花菜的16个LncRNAs在不同逆境胁迫下表达稳定性存在差异。其中在弱光胁迫条件下, XLOC_000400表达最稳定;在低温胁迫条件下 XLOC_030832基因稳定性最好;在干旱和渍水胁迫条件下最稳定表达的内参基因分别是 XLOC_007087和 XLOC_012179;高温和盐胁迫处理下最稳定表达的内参基因均为 XLOC_007980。 XLOC_010342和 XLOC_007980在青花菜不同逆境胁迫下的表达稳定性较好。研究结果可为准确定量青花菜不同逆境胁迫下的LncRNAs提供合适的内参基因。     

8种水稻基因组DNA提取方法的比较

[目的]寻找操作简便、耗时短、成本低的水稻基因组DNA提取方法。[方法]分别以水稻幼嫩黄化叶片和老叶片为材料,用8种方法提取其中的DNA,测定所提DNA的浓度和纯度,并对其进行PCR扩增和电泳检测,比较各方法的提取效果。[结果]8种方法提取的DNA浓度分别为35.15、30.80、67.30、26.15、23.55、8.95、48.05、54.26μg／ml,方法③提取的DNA浓度最大,但PCR扩增效果较差;改进的SDS法（方法⑦、⑧）提取的DNA纯度较高,PCR扩增产物电泳条带较亮,但这2种方法操作程序复杂,成本较高,提取每份样品的成本分别为14、31元,远高于其他提取方法。[结论]除方法③外,其余5种简化方法均能得到较高质量的水稻基因组DNA,且提取成本远低于传统SDS法。     

利用花托与花序轴组培快繁青花菜雄性不育株的研究

以青花菜的花托和花序轴作外植体进行组织培养,可成功诱导出苗,并以此来保存突变不育株。试验表明:不同的青花菜品种在同一种培养基上诱导率差别很大(2.3%~83.3%),05A-743-2在MS+BA 0.2mg/L+KT0.2mg/L+NAA0.01mg/L培养基上花托诱导率最高可达83.3%,花序轴诱导率达72.2%;用MS+BA 0.5mg/L+NAA 0.002mg/L继代培养,苗正常、健壮,增殖系数可达5.98;用1/2MS+IBA 0.02mg/L进行生根培养,生根率达91.7%,平均根数13.0条;利用全光照自动喷雾过渡培养组培苗,成活率达100%,组培苗可瓶外生根,效果比瓶内生根好。     

杨梅褐斑病防治试验

杨梅褐斑病属真菌性病害，潜伏期长达３个多月，为害叶片，引起落叶，进而使花芽和小枝枯死，严重影响树势和产量。笔者于１９９８年进行了本试验。 试验地点设在瑞安市湖岭镇盘龙山村。供试品种为１１年生荸荠种杨梅。裂区组设计，主区设喷药１次、２次和 ３次，副区设①７５％百菌清 ８８倍液（日本 ＳＤＳ ＢＩＯＴＥＣＨ　Ｋ．Ｋ．产），②８０％万生 ８００倍液（美国杜邦公司产），③５０％多菌灵６００ 倍液（江苏吴县农药厂产），④８０％代森锌６００倍液（沈阳农药厂产）和空白对照５个处理（以上药剂均为可湿性粉剂）。每处理５…