番茄E8启动子乙烯应答元件克隆及DNA序列分析

E8启动子是常用的番茄果实特异表达启动子之一，是指番茄E8基因5’侧翼近2．2kb的DNA序列。前人的研究表明，E8基因5’侧翼-2181～-1088区段的删除使E8基因表达量大幅度下降(仅为完整E8启动子的1／10)，同时该区段还是E8基因对乙烯应答的充分必要区域；这说明了该区段是E8基因表达调控的重要元件。     

AP2基因家族的起源和棉花AP2转录因子在抗病中的作用

植物中庞大的AP2基因家族成员因其广泛参与植物响应外界环境胁迫、生长发育相关的转录调控而备受重视。AP2基因曾被认为植物所特有,但最近在蓝藻、线虫和病毒中发现了具有AP2结构域和位点特异核酸内切酶的蛋白。所以有人认为当今植物中的AP2基因起源于细菌或者病毒的基因的横向转移,AP2结构域可能来自后来进化为叶绿体的原始蓝细菌的内共生。ERF是AP2大家族中的一个亚族,它编码的蛋白能特异结合含有GCC盒的病程相关基因的表达,参与植物抗病反应。ERF基因的表达受到疾病相关刺激以及环境胁迫的诱导,并且在乙烯、茉莉酸和水杨酸信号传导途径中发挥一定的作用。同时,某些ERF基因在转基因植物中的超表达表现了一定的广谱抗性,因而在分子育种中具有一定的应用前景。棉花上AP2基因家族的基因克隆与分析最近才得以进行,介绍了我们在棉花上相关的研究工作并讨论了它们在植物抗病反应中的作用。     

抗褐飞虱转基因水稻的应用研究

利用基因枪法将植物雪花莲凝集素基因 (gna基因 )导入到粳稻品种鄂宜 10 5和鄂晚 5号中 ,在R3 代得到 gna基因位点纯合的株系 15份 ,从中选择 5份株系 (分别来自不同的独立转基因单株 )进行后续研究。生物学鉴定结果表明这些株系对褐飞虱具有明显的抑制作用。转基因材料与对照品种相比 ,主要农艺性状表现一致 ,但结实率相对较低     

大白菜中1个低温相关cDNA克隆序列分析

植物在冷驯化过程中会产生基因表达的变化.用RT-PCR和RACE技术相结合,从耐低温植物大白菜品种早熟5号中得到了1个cDNA克隆,经序列及功能分析,表明是个冷相关基因.由氨基酸序列推测它的分子质量大约为30u,故命名该基因为cor30.经数据库同源查找及序列比较,发现该基因的氨基酸序列与拟南芥基因COR47及ERD10分别具有59.4%和60.2%的同源性.     

根癌农杆菌介导半夏凝集素基因pBIXPTA对百合的转化

以百合花丝诱导的胚性愈伤组织为基因转化的受体材料，利用根癌农杆菌介导法将pBIXPTA基因导入百合，组织化学法检测转化后共培养3d的组织块，GUS瞬时表达率可达60％，选择培养20d的组织中约有1％检测到GUS基因的稳定表达。菌液浓度ODeoo值为0．8左右时侵染效果较好，同时于附加100μmol／L的AS可提高转化效率。PCR分子捡测转基因植株部分呈现阳性，初步证明外源基因已整合到百合基因组中。     

双价抗虫植物表达载体p3300-bt-pta转化苜蓿的初步研究

以中苜1号无菌苗子叶为外植体,采用农杆菌介导的叶盘法,将含有CryIA(a)/CryIA(c)基因、半夏凝集素(pta)基因和bar基因的双价抗虫植物表达载体p3300-Bt-pta导入苜蓿子叶中,在含除草剂的筛选培养基中连续筛选,获得抗性转化植株.研究了农杆菌菌液浓度、浸染时间、共培养时间等因素对苜蓿转化效率的影响,结果表明:各因素对苜蓿转化率均有不同程度的影响,当转化的菌液浓度OD600为0.6、浸染时间为10min、共培养时间为3d时转化效率较好.载体的抗性基因为除草剂草丁膦抗性的Bar基因,对子叶外植体的最佳筛选浓度为8mg/L;抑制农杆菌所用Carb的有效工作浓度为400mg/L,以后继代逐次减少用量到100mg/L;按此方法以根癌农杆菌菌株EHA105介导,将双基因Bt和pta导入紫花苜蓿品种"中苜1号",最终获得122棵除草剂草丁膦(ppt)抗性的植株,经过初步的PCR及RT-PCR分子生物学检测,有30棵检测到特异性条带,表明外源基因已成功整合到苜蓿基因组中,并在转录水平得到表达.     

温度对甘蓝型油菜花粉胚状体的诱导及其类型的影响

为了提高甘蓝型油菜(Brassica napus L.)花粉胚状体的诱导频率,进行了花药接种前的低温处理和接种后的高温处理,试验采用了五种不同温度的分段培养,对比了变温处理的效应。结果表明:不同基因型油菜花药培养,对变温处理的反应有差异;低、高温处理花药,对胚状体的类型有明显的影响;根据胚状体的形状和大小不同可分为五类,它们的再生植株能力不同。变温处理可以提高甘蓝型油菜花粉胚状体诱导频率和正常胚比率。     

凝胶组成对小麦SSCP技术的影响

SSCP技术易受凝胶浓度、丙烯酰胺与甲叉双丙烯酰胺的比例和添加物等诸多因素的影响.本研究探讨了凝胶中丙烯酰胺与甲叉双丙烯酰胺的比例、凝胶浓度和添加物等.结果显示:凝胶中丙烯酰胺与甲叉双丙烯酰胺的比例为29∶1、凝胶浓度为12%、凝胶中不添加蔗糖和甘油为最佳的凝胶组成,单链DNA条带清晰,杂带少,容易观察.     

分子检测技术在转基因药用植物研究中的应用

近年来,药用植物遗传转化技术取得了很大进展,并成功培育出多种转基因药用植物。本文从外源基因整合水平、转录水平和翻译水平三个方面,对转基因药用植物分子检测技术研究进展进行了综述。     

转基因植物生产药用蛋白研究进展

利用转基因植物作为生物反应器生产具有重要价值的多肽和蛋白质，包括抗体、疫苗、药用蛋白等较之其他系统具有很多优越性，已经成为当前植物基因工程和药物生物技术领域中的研究热点，着重就这一领域近年来国内外的研究现状、发展趋势、存在的问题及对策进行综述。