新型冠状病毒Nsp1基因真核表达载体的构建及对宿主蛋白质翻译的影响

非结构蛋白1(Non-structural protein 1,Nsp1)作为新型冠状病毒（Severe acute respiratory syndrome coronavirus-2,SARS-CoV-2）的毒力决定因子,在调控冠状病毒复制方面有重要作用。为更有效地研究SARS-CoV-2 Nsp1蛋白的生物学功能,成功构建SARS-CoV-2Nsp1基因的真核表达载体,并验证其抑制宿主及外源蛋白质翻译的功能。通过PCR技术扩增SARS-CoV-2Nsp1基因后,利用同源重组技术将其连接至pEGFP-N1载体上。经双酶切和测序结果鉴定,SARS-CoV-2Nsp1基因成功克隆至pEGFP-N1载体上。将重组质粒pEGFP-N1-SARS-CoV-2-Nsp1转染至HEK-293T细胞和HeLa细胞中,经嘌呤霉素标记后,利用Western Blot和考马斯亮蓝染色检测重组质粒的表达以及嘌呤霉素信号。结果表明,重组质粒pEGFP-N1-SARS-CoV-2-Nsp1在HEK-293T细胞和HeLa细胞中成功表达,并验证其抑制宿主蛋白质和外源转入细胞蛋白质的翻译,为更深入研究SARS-C...     

总状毛霉酶水解大豆异黄酮苷条件的优化

利用总状毛霉进行生物转化,采用单因素和中心组合试验设计对转化大豆异黄酮苷水解条件进行研究。通过响应面法对水解后游离苷元浓度、时间、温度、酶量、pH值之间的关系建立数学模型,获得了最佳水解条件:水解时间3.59 h,pH6.1,酶量23 mL,水解温度46℃。经验证试验与预测值接近,说明该模型有很好的预测能力。     

我国成立两个蛋白质组学委员会

1993年9月18日至19日,由中国生物化学与分子生物学学会、国家自然科学基金委员会生命科学学部主办,湖南师范大学承办的中国蛋白质组学学术会议在长沙召开.当天,中国蛋白质组学专业学术委员会和中国人类蛋白质组组织(CN—HUPO)经选举正式成立.中国科学院院士贺福初当选为CNHUPO主任委员,丁建平研究员、贺福初院士共同当选为中国蛋白质组学专业委员会主任委员. 蛋白质组研究作为功能基因组学的重要支柱,是当今生命科学领域的前沿.蛋白质组研究不仅可实现与基因组的对接与确认,直接揭示生命活动规律和本质、人类重大疾患(病原体)致病的物质基础以及发生与发展的病理     

共轨柴油机燃用生物柴油限制与非限制排放特性

在高压共轨柴油机上对生物柴油混合燃料(源自食用废油)的排放物进行了研究.结果表明,限制性气体排放中,随着生物柴油混合比例的增加,Nox的排放量明显升高,同时在氧化催化器后Nox中的NO2体积分数也逐步增大;烟度则随着燃料混合比例的增加呈线性下降.非限制性气体排放中,外特性工况下的生物柴油混合燃料的乙醛排放量随混合比的增加而降低;SO2气体排放量也随着燃料混合比例的增加逐步下降,纯生物柴油可降低20%～60%.生物柴油的颗粒粒径分布表明,生物柴油的核态纳米颗粒对混合燃料的硫含量非常敏感,由于纯生物柴油硫含量低,故可以有效降低颗粒的总数量浓度.     

PEDV E蛋白对宿主细胞UPR反应关键蛋白GRP78表达的影响

猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)能够引起仔猪的大量死亡,造成重大经济损失.PEDV E蛋白在病毒的出芽以及复制过程中起重要作用.将重组质粒pCMV-Myc-E与真核表达载体pCMV-Myc分别转染HEK-293T和PK15细胞系,验证PEDVE蛋白在宿主细胞的...     

大豆新品种垦农14的选育与配套技术体系

垦农１４是以农大３５７１为母本农大４７８２为父一有性杂交育成的，１９９７年审定推广。该品种高产、抗病、优质、适应性广，且综合性状优良。一般产量２４７５￣３０００ｋｇ／ｈｍ＾２，平均增产１２．７％，１９９７和１９９８年两年全省累计推广面积１１万ｈｍ＾２，并研究出与其配套的栽培体系。     

贵州农业利用外资的现状和前景

阐述了贵州省农业利用外资的历史,以及农业利用外资的主要来源与渠道.农业利用外资在贵州经济发展中所起的作用.针对贵州农业利用外资的现状,分析了目前贵州农业利用外资出现的问题,提出了相应的建议和对策,目的在于对如何提高贵州农业利用外资提出一些对策思考.     

不同毒饵饵料毒杀鼠类试验研究

通过用质量浓度0.05g/L溴敌隆不同毒饵饵料对农田鼠类和家栖鼠类无选择性和有选择性摄食试验表明，农田鼠类喜吃大米、小麦毒饵，综合平均取食率分别为23．87％、23．39％，家栖鼠类喜吃玉米、小麦毒饵，综合平均取食率分别为33．52％、29．49％；从毒杀效果来看，以大米、小麦毒饵毒杀农田鼠类效果最好，防效分别达88．67％、86．66％，以玉米毒饵毒杀家栖鼠类效果好，防效达85．84％。各地应根据当地优势鼠种有针对性地选择毒饵饵料，并交替使用。     

一种具有磷酸酶活性的金黄色葡萄球菌蛋白的初步鉴定

金黄色葡萄球菌是一种人畜重要的致病微生物,寻找新型药物靶标是及时有效治疗金黄色葡萄球菌感染的潜在途径。本实验依据数据库,体外设计并合成了一对特异引物,应用PCR方法扩增出一种新的磷酸酶基因,并将该基因克隆至表达载体p ET2a上。经测序、酶切和PCR鉴定正确后转化大肠杆菌感受态细胞BL21中,经IPTG体外诱导表达出重组蛋白并对其进行了磷酸酶活性测定。结果表明:该基因编码蛋白具有更多依赖于镁离子的磷酸酶活性,这种酶活性受到特异性抑制剂氟化钠的抑制。研究结果为进一步挖掘该蛋白作为金黄色葡萄球菌感染有效治疗药物靶点提供了数据资料。