干旱胁迫对剑麻幼苗生理生化的影响

以剑麻(H·11648)幼苗为材料,采用盆栽试验的方法,研究了剑麻对干旱胁迫的生理响应.试验对剑麻幼苗进行干旱胁迫处理,每隔15d测定叶片相对含水量(RWC)、相对电导率(REC)、丙二醛(MDA)、过氧化物酶(POD)、脯氨酸(Pro)和根系活力(TTC)的变化,共处理90d.结果表明,随着干旱胁迫时间的增加,叶片含水量有所下降,下降最大幅度为8.64%,而相对电导率、丙二醛含量和脯氨酸含量却明显上升,最大增幅分别为86.22%,80%和41.54%,过氧化物酶活性和根系活力则呈现先上升后下降的趋势,峰值分别为1326.33u/g.Fw和2.66g/g.h.     

胶孢炭疽菌致病性减弱突变菌株H800 T-DNA插入位点侧翼基因的克隆

对农杆菌介导转化引起的致病性减弱突变菌株H800的菌落形态、孢子形态、菌丝体生长速率、孢子萌发率和致病力等生物学特性进行研究,并利用TAIL-PCR方法克隆T-DNA插入位点基因,结合生物信息学分析该基因功能与H800表型变化及致病性减弱的关系。结果表明,突变菌株H800的致病力低于野生型菌株CH008;生长速率为0.83 cm/d,亦显著低于CH008的1.13 cm/d;产孢量和分生孢子大小与CH008无明显差异;孢子萌发率为2.58％,显著低于野生型的95.98％;序列分析显示,T-DNA已插入StCg800基因的启动子区域,基因结构分析表明,StCg800基因编码区全长774 bp,无内含子,可编码257个氨基酸多肽的StCg800蛋白。该蛋白是不稳定的水溶性蛋白,亚细胞定位于细胞质,且无信号肽,推测为生长因子类的酶,但功能尚未知。     

茄子调控抗青枯病反应信号基因的筛选和鉴定

以抗青枯病茄子自交系‘E-31’为材料,利用病毒诱导的基因沉默（virus induced gene silencing,VIGS）技术沉默抗病材料中调控抗病相关的信号基因,研究其在茄子抗青枯病反应中的作用。qRT-PCR结果表明,与对照植株相比,VIGS诱导基因沉默植株,目的基因的表达量均下降。MAPK级联途径相关基因MKK2和MAPK6,SA途径中的信号基因PAD4、NPR1、SGT1、TGA和GluA,以及WRRY转录因子基因WRKY70沉默,接种青枯雷尔氏菌（Ralstonia solanacearum）后植株出现不同程度的枯萎,而对照植株无变化。MAPK级联途径相关基因MAPK3和MAPK4,SA途径中的信号基因NDR1,ET途径中的信号基因EIN2和EIL1,JA途径信号基因JAR1沉默后,植株均未出现萎蔫症状。研究结果表明,MKK2、MAPK6、PAD4、NPR1、SGT1、TGA、GluA和WRKY70等基因在茄子调控抗青枯病反应中起正调控作用,而MAPK3、MAPK4、NDR1、EIL1、EIN2和JAR1等基因可能未参与或起负调作用,推断茄子‘E-31’调控青枯病信号途径可能主要依赖于SA途径。     

芦笋枯萎病病原鉴定

对造成福建省漳州市东山县的芦笋枯萎病病原菌进行分子鉴定,以期确定病原菌的属、种名,为防治该病害寻求理论依据。试验对分离纯化的病原菌核糖体DNA的ITS区进行测序,在Genbank中搜索其同源性并构建它们的系统发育树,结果表明：引起芦笋枯萎病的病原菌是镰刀属中的尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）,且病原菌之间的同源性高达89%,遗传差异不显著。     

豇豆胰蛋白酶抑制剂基因转化花椰菜的研究

通过根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciens介导,将豇豆胰蛋白酶抑制剂(CpTI)基因导入花椰菜无菌苗的下胚轴和子叶中,卡那霉素(Kan)的筛选质量浓度为15mg／L,抑制农杆菌生长的抗生素选用羧苄青霉素(carbencillin),质量浓度为500mg／L,对所获得的转基因植株进行PCR扩增,结果显示大多数为阳性;FCR-Southern及Southern分子检测分析,结果证明CpTI基因已被整合到花椰菜植株的基因组中,转基因植株叶片的离体饲虫初步试验结果表明,埘鳞翅目害虫菜青虫的生长发育育一定的抑制作用。     

生物技术在剑麻研究上的应用进展

剑麻作为我国极具特色的热带经济作物,具有广阔发展前景和巨大的出口潜力。而当今世界发展最快、最活跃的高新技术—细胞工程、转基因技术和分子标记技术等生物技术在剑麻研究及生产上的应用,给剑麻产业的发展带来了新的飞跃。     

剑麻叶片愈伤组织诱导及再生体系的建立

以剑麻幼叶为外植体,进行愈伤组织的诱导试验,建立从愈伤组织到再生植株的培养体系。结果表明：诱导愈伤组织阶段表现最优的配方是N6＋NAA0．2mg／L＋6-BA3．0mg／L,而后愈伤组织转入MS＋TDZ1．0mg／L＋NAA0．05mg／L的培养基中48d便可诱导出芽,在生根培养基MS中生根率可达90％。     

添加菌剂和石灰对剑麻麻渣堆肥腐熟效果及养分含量的影响

为提高剑麻麻渣的肥料化利用效果,对麻渣进行添加微生物菌剂和石灰堆肥试验,研究麻渣的腐熟效果及矿质养分损失率。结果表明,堆肥125 d后,单独添加菌剂处理剑麻麻渣堆肥气味呈泥香味,麻渣发酵液发芽指数比对照显著提高4.1倍,堆肥氮、磷、钾养分含量和损失率影响与对照差异不显著。单独添加石灰具有除臭效果,对堆肥氮、磷养分含量和损失率影响不显著,并且堆肥质量损失率和钾素损失率显著降低,但堆肥发芽指数较低,仅为1%。当菌剂与低水平石灰（石灰∶麻渣=1∶300）混合添加时,堆肥发芽指数显著提高,为对照的2.3倍;堆肥全钾含量显著增加,达3.3 g·kg-1,比对照提高10%;堆肥质量损失率和钾素损失率显著降低。因此,微生物菌剂可作为腐熟剂单独添加以促进麻渣腐熟,微生物菌剂与低水平石灰混合添加,剑麻麻渣堆肥的腐熟效果最佳,是最佳麻渣腐熟剂。     

利用SRAP分子标记技术分析茄子遗传多样性

利用SRAP技术对36份茄子栽培种进行遗传多样性分析。结果表明:22对引物对36份茄子DNA进行PCR扩增,经过染色后共获得292条多态性条带,平均每个引物组合扩增出13.27条多态性条带。36份茄子品种间遗传相似系数在0.568~0.870,平均遗传相似系数为0.757,这表明该群体的遗传背景相对狭窄。利用UPGMA法对36份茄子资源进行聚类分析,结果显示,在相似系数为0.690处,可将36份茄子资源划分为5个组。     

水肥运筹对剑麻幼苗生长的影响

采用盆栽试验的方法，探索不同水肥组合对剑麻生长的影响。研究结果表明不同的水肥组合会对剑麻的生长产生不同程度的影响，当含水量和施肥量均达到适宜水平时，会对剑麻生长产生叠加效应；剑麻的质膜透性随着土壤干旱程度的增加而升高；当施肥过量，不利于剑麻生长时，剑麻的质膜透性也明显增大。在一定施肥量范围内，剑麻体内过氧化物酶活性随着施肥量的增加而增加，同时也随着干旱胁迫的严重而增加；当施肥过量，过氧化物酶的活性反而降低。在一定的施肥量范围内，丙二醛随着干旱胁迫的加重而提高。施肥量上升会提高剑麻体内N、P、K的含量，同时土壤含水量的上升也会促进剑麻对这些元素的吸收。在本试验条件下，综合不同处理下对剑麻各项指标的影响，得出剑麻生长最适宜的水肥条件为土壤含水量占田间持水量的60％~70％，施肥量为每千克干土N 0.6、P2O5 0.4、K2O 0.6 g。