基于重组EP153R蛋白的检测非洲猪瘟病毒抗体的间接ELISA方法的建立

为探究非洲猪瘟病毒(ASFV)EP153R蛋白的功能和建立ASFV抗体间接ELISA方法,本试验构建了EP153R蛋白杆状病毒表达系统,采用Western blot与IFA鉴定rEP153R蛋白的表达和免疫原性。结果显示,杆状病毒能高效表达rEP153R蛋白且可被小鼠多克隆抗体识别,具有良好的免疫原性。以此重组蛋白为抗原进行间接ELISA方法的建立,经方阵ELISA确定当抗原包被量2.5 μg/mL,ASFV阳性血清稀释比1∶1000时为最佳反应条件;以优化后的条件确定了抗体阳性临界值为0.259;特异性试验结果表明,该方法仅与ASFV阳性血清发生反应,具有较强的特异性;重复性试验结果显示变异率小于10%,重复性良好。利用该方法对46份猪血清进行检测,与商品化试剂盒检测结果对比显示,符合率为91.3%,能较好的区分ASFV阴性血清与阳性血清。本研究的结果为后续EP153R功能研究和ASFV临床血清学诊断奠定了基础。     

鸭凝血因子Ⅷ的原核表达及多克隆抗体制备

为制备鸭凝血因子Ⅷ的多克隆抗体,试验根据抗原决定簇预测软件对鸭Ⅷ因子全基因序列进行分析,发现Ⅷ因子主要抗原决定簇位于C端,对鸭ⅧC端(Ⅷ-C)进行密码子优化、原核表达;免疫小鼠制备多抗,并利用ELISA测定效价.结果显示,优化后的Ⅷ-C能在Escherichia coli表达;Ⅷ-C在Escherichia coli ...     

大米淀粉纯化工艺及其性质的研究

该文采用碱性蛋白酶对碱法制备得到的大米淀粉进行纯化,酶解条件为 pH 9,温度45℃,酶与底物比48 AU/kg,时间60 min。大米淀粉中的蛋白质含量从2.87%降低到0.40%。扫描电镜分析大米淀粉的超微结构显示,碱性蛋白酶纯化处理后的大米淀粉中未见明显的蛋白质颗粒存在。比较纯化前后的大米淀粉发现,大米淀粉经过碱性蛋白酶纯化后,其溶解度和膨润力都明显增加。     

干旱和光联合胁迫对长春花CesA基因和Pme基因表达的影响

以长春花叶片为材料,通过同源序列扩增法,获得与细胞壁合成相关的纤维素合成酶(Cellulose synthase,CesA)基因和与细胞壁重要组成部分果胶的变化密切相关的果胶酯酶(Pectin methylesterase,Pme)基因,利用定量的RT-PCR,对干旱和光联合胁迫下CesA基因和Pme基因的表达情况进行了研究。结果表明:干旱胁迫条件下,CesA基因表达稍有减弱,Pme基因表达稍有增强。光胁迫条件下,CesA基因表达明显弱于正常光条件,呈逐渐减弱趋势,CesA基因表达与光胁迫的关系为负调控;而Pme基因表达则明显强于正常光条件,呈现增强趋势,Pme基因表达与光胁迫的关系为正调控。说明光胁迫是CesA基因和Pme基因表达变化的主要影响因素。在干旱和光联合胁迫下,CesA基因表达整体减弱,Pme基因表达整体较强。     

湖南临澧县农村居民点时空特征及其优化布局初探

以临澧县为例,依据<湖南省临澧县土地利用总体规划(2006-2020年)>相关数据及图件,将全县划分为3个不同地貌类型区:平原区、丘岗区和低山区.分析了各区的农村居民点用地空间分布特征及各乡镇的农村居民点时间动态变化特征.在此基础上,按一定要求选取合适的村庄作为中心村,并确定了因地质灾害、生活条件恶劣、处在风景保护区、分布过于零散等原因需要迁移的农村居民点,实现农村居民点的优化布局,以期为居民点规划提供参考.     

麻基膜盘育秧对早稻机插的影响

针对水稻机插盘育秧散盘、散秧的问题,进行了在育秧盘底面垫铺麻纤维基膜于早稻机插育秧插秧生产上的应用试验示范。以麻基膜为试验材料,设2个处理,在常规水稻机插育秧的基础上在育秧盘底部铺垫麻基膜,以无麻基膜常规普通水稻机插盘育秧为对照,设3次重复,小区面积为1亩,采用随机区组排列。试验结果表明,采用40 g/m²麻基膜机插育秧在早稻机插盘育秧生产中能促进早稻秧苗根系生长,增加不定根数量,白根增多,根系活力增强,秧苗茎基增粗,秧苗素质和质量提高,不散盘,便于运输,移栽后抗性增强,机插作业效率提高,漏蔸率减少。     

鸭腺病毒3型Fiber-2蛋白单克隆抗体的制备及初步应用

为进一步研究鸭腺病毒3型（DAdV-3）Fiber-2蛋白，研究通过PCR扩增fiber-2基因，构建p ET32a-DAdV3-fiber2原核质粒，表达并纯化蛋白，以纯化的蛋白为免疫原，免疫6周龄雌性BALB/c小鼠制备抗Fiber-2单克隆抗体杂交瘤细胞，采用间接免疫荧光试验和免疫印迹试验进行鉴定，并用于DAdV-3 Fiber-2杆状病毒表达产物的鉴定。结果显示：原核表达获得1.77 mg/mL Fiber-2蛋白，筛选获得2株阳性单克隆细胞株2E10E4和4F7F10，两株单克隆抗体均为IgG 1型，轻链类型为κ；DAdV-3感染的LMH细胞中存在特异性荧光，免疫印迹试验确认在约59 ku处出现特异性条带；采用制备的单克隆抗体确认了表达Fiber-2蛋白的重组杆状病毒。研究获得了针对DAdV-3 Fiber-2蛋白的单克隆抗体，为深入探究Fiber-2在DAdV-3感染机制中的作用以及为建立DAdV-3抗原免疫测定技术奠定了基础。     

玉米新品种绥玉48的选育及栽培技术

黑龙江省农业科学院绥化分院玉米研究团队多年来以引入改良创制资源为目标，利用引入的优质自交系，采用系谱法、多代轮回选择，在高密度强压力的育种环境下进行种质筛选，并同时进行杂交组配，在相同积温的地区进行多点、多年鉴定，选育出高产、多抗、适宜机收的优良玉米品种绥玉48,2021年通过黑龙江省审定。该品种适宜在黑龙江省第一积温带≥10℃活动积温2 750℃的区域种植。笔者介绍了绥玉48的选育及其栽培技术。     

印度南瓜高效再生体系的优化

以10个基因型印度南瓜子叶节为外植体，研究了不同激素浓度配比、外植体处理方式、抑菌抗生素种类和浓度等对印度南瓜离体诱导再生的影响。结果表明：印度南瓜离体培养再生率受外源激素浓度配比和基因型的影响较大，较适宜的激素浓度配比为1.0～2.0 mg·L-1 6-BA+0.5 mg·L-1 ABA。外植体的切取时间、切割方式、接种方式等也是影响再生率的重要因素，播种后24～48 h，切取1/2或1/4子叶节，采用斜插法接种的外植体再生率较高。外源添加100 mg·L-1头孢噻肟钠（Cef）能够有效抑制细菌污染。     

潍坊市山区越夏番茄栽培技术

利用潍坊西部山区的气候特点发展越夏番茄,能有效缓解番茄上市淡季,拓宽了当地农民的致富途径.在生产实践的基础上,从越夏番茄适栽品种、播种育苗、定植适期、田间管理和病虫害防治等方面介绍了关键栽培技术,对发展潍坊山区越夏番茄栽培有一定的指导意义.