杂交玉米制种花期预测和调节技术

玉米杂交制种父母本花期能否相遇是制种成败的关键,决定制种产量和质量。     

香菇代料栽培技术

代料栽培,是利用各种农林业副产物为主要原料,添加适量的辅助材料,制成培养基,来代替传统的栽培材料生产各种食用菌。用来栽培香菇的主要代用料是阔叶树木屑、部分针叶树木屑以及刨花、棉籽壳、甜菜渣、稻草、玉米秆、玉米芯、麦草、高梁壳、花生壳、谷壳等。一般每1000千克木屑或棉籽壳等代料栽培,可收600-700千克鲜菇,经济效益可观。     

甘肃省辣椒疫病菌交配型的测定和其地理分布的研究

对甘肃省不同地区的20株辣椒疫病菌进行了交配型的测定,结果表明:有11株为A1交配型,在采集的大部分地区都有分布,并占主要优势;其次是A0交配型,有7株,分布在河西、庆阳和天水;A2交配型分布较少,在被采集的菌株中仅有2株,分布在酒泉市临水乡和庆阳市镇原县。     

马传贫病毒白细胞弱毒疫苗毒株反转录酶基因克隆及序列？…

本从商品化马传贫弱毒疫苗培养物提纯马传贫疫苗病毒粒子并抽提病毒ＲＮＡ后,采用ＲＴ－ＰＣＲ方法扩增并首次克隆了马传贫驴强毒反转录酶基因。经核苷酸序列测定得出反转录酶工一长１６６８ｂｐ,编码５５６个氨基酸。通过与已发表其它马传贫病毒反转录酶基因序列比较,发现在氨基酸和核苷酸水平差异率分别为１４．０％和１６．６％。变异氨基酸随机分布于整个基因上,无明显规律。在反转录病毒高度保守的酶基因上发现这样大的差异     

编码EIAV反式激活蛋白Tat的cDNA克隆和序列测定

ＥＩＡＶ在繁殖过程中的转录涉及到多种因子的调节,其中ＴＡＴ蛋白是病毒编码的反式激活因子,是病毒复制必须成分。ＴＡＴ是非结构蛋白,由病毒基因组全长转录产物经多次拼接而成。本研究使用ＥＩＡＶ疫苗毒感染驴巨噬细胞培养物,在病毒增殖早期提取细胞总ＲＮＡ,反转录后使用中国ＥＩＡＶ毒株特异引物扩增病毒基因组拼接产物。将扩增产物克隆后经过核苷酸序列分析,和与基因组全序列的比较。确定了编码ＥＩＡＶ反式激活蛋白的转录产物及阅读框架及转录后拼接位点,研究发现至少有两种拼接产物编码ＴＡＴ。     

鸡减蛋综合征的综合防制

鸡减蛋综合征（EDS-76）是一种由腺病毒引起的病毒性传染病,其主要特点是产蛋量骤然下降,蛋壳异常,蛋体畸形,蛋质低劣。鸡减蛋综合征（EDS-76）最早是由VanEck于1976年首先报道该病在荷兰发生,1977年分离到EDS-76病原体（病毒）。该病可使鸡群产蛋率下降10％～50％,蛋的破损率可达38％～40％,无壳蛋,软壳蛋达15％,给养鸡业带来严重的经济损失,被列入鸡四大病毒性传染病之一。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒疫苗和变异株灭活疫苗的免疫效果评价

分别采用猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)CH-1R致弱毒疫苗株和变异毒株灭活疫苗免疫接种40日龄～45日龄仔猪,免疫接种后4周,用高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)HuN-4变异株强毒攻毒,攻毒后21 d剖检,取主要器官作病理组织学观察和病毒抗原定位.结果显示变异毒株灭活疫苗免疫攻毒后导致的病理变化和病毒抗原分布程度均明显高于CH-1R弱毒疫苗免疫组.免疫病理学研究结果表明CH-1R 弱毒疫苗对HU-4株强毒免疫保护效果好于变异毒株灭活疫苗.     

马传贫驴白细胞弱毒疫苗毒和驴强毒全基因核苷酸序列测定

本项研究以马传贫驴白细胞弱毒疫苗毒感染细胞总ＤＮＡ和驴强毒感染驴外周血病毒ＲＮＡ为起始材料,应用ＰＣＲ和ＲＴＰＣＲ的方法,分段扩增出马传贫弱毒疫苗毒前病毒和驴强毒各基因,并将各基因克隆后进行测序。根据与国外发表的马传贫病毒核苷酸序列比较,推导出马传贫疫苗毒和马传贫驴强毒全基因组核苷酸序列。     

猪繁殖-呼吸综合征活疫苗对仔猪的安全性试验

本试验用猪繁殖-呼吸综合征（PRRS）活疫苗和国内分离的PRRS强毒CH—1a株接种PRRS阴性的断奶仔猪，分别在接种后的3、7、14d各剖杀1头，取各脏器分别做冰冻切片和病理切片观察。用间接免疫荧光法检测各脏器PRRS病毒的分布。结果表明，PRRS活疫苗在免疫初期，抗原主要分布在脾脏、淋巴结，其次是肾脏和肺脏，少见于肝脏和心脏，第14d时在脾、淋巴结和肾脏有一定量的抗原，而肺脏相比则数量很少，肝脏和心脏未检到PRRS病毒抗原的存在，表明接种PRRS活疫苗随着时间的推移抗原分布呈下降趋势。而强毒抗原分布以脾脏最多，依次是肾脏、肺脏、淋巴结、肝脏、心脏，接种后第14d仍能在各脏器检到PRRS病毒抗原。病理组织学检测结果表明，活疫苗产生以下颌淋巴结、脾脏增生为特征的免疫应答，组织损伤轻微，对肺的病变较少，且仔猪生长良好。强毒则引起以大面积的肺泡隔增宽为特点的间质性肺炎和微循环障碍的病理变化，淋巴小结、脾脏滤泡发生崩解与周围界限不清，个别淋巴细胞核浓缩，组织损伤严重。本试验表明弱毒疫苗对仔猪是安全的。     

PRRSV国内流行毒株的分离鉴定及结构基因的分析

从国内发病猪场采集的猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）病料中,分离到8株猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）。病毒分离培养表明,JS1-JS5第1代即可适应Marc-145细胞。GD1-GD3经Marc-145细胞3次-4次传代后出现明显的细胞病变。间接免疫荧光试验表明,8个分离毒株与抗PRRSV抗体均可出现特异性的胞浆荧光。它们对氯仿、甲醛、酸和碱均敏感。5-溴-2′-脱氧尿核苷对其无抑制作用。参照GenBank中已发表的PRRSV的序列设计了两对特异性引物,分别对所分离毒株进行部分nsp2基因和结构基因的扩增。发现JS1-JS5nsp2基因发生了部分缺失。选择JS1、JS5、GD3进行nsp2基因和结构基因的扩增和测序。序列分析结果表明,JS1、JS5和2006年以后国内分离到的高致病性PRRSV高度同源。GD3的Nsp2基因虽然没有发生第534位-第562位氨基酸的缺失,但与2006年以后分离的毒株一样,发生了第482位氨基酸的缺失。通过对3个分离毒株与其他国内分离毒株的结构基因序列进行系统进化分析发现,我国的PRRSV流行毒株可大致划分为两个亚型,JS1、JS5、GD3、CH-1a、JXA1、HUN4、SHH等属于一个亚型,BJ-4、CC-1属于另一个亚型。亚型间核苷酸序列同源性为91.2%-91.8%。