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为制备鹅免疫球蛋白特异性抗体,通过主动免疫兔子制备了抗鹅IgY抗血清,并在ELISA中比较分析了该抗血清的应用效果.结果显示,将制备的抗鹅IgY抗血清作为二抗,当抗原包被浓度(16μg/mL)和血清(1∶1600)、抗鹅IgY抗血清(1∶51200)与酶标抗体(1∶2000)稀释到合适浓度时,在ELISA检测鹅抗体水平中呈现出良好效果,其特异性和灵敏度明显好于以兔抗鸡IgY作为替代二抗.结果表明所制备的抗鹅IgY抗血清在鹅相关的酶联免疫研究方法中是合格和有效的. 相似文献
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为调查和了解广东鹅反季节生产中的潜在问题和改进空间,以广东省主导鹅种马岗鹅和狮头鹅为研究对象,观察并分析了反季节生产中两鹅种全年的产蛋性能、种蛋受精、孵化及孵化过程中胚胎死亡等情况.研究结果显示,马岗鹅和狮头鹅的年均产蛋数分别为41.5和29.7枚,受精率为66.3%和73.0%,种蛋孵化率为57.0%和62.2%,受精蛋孵化率为86.1%和86.4%,总死胚率为9.4%和9.0%;种鹅公母比例和气温条件对受精率和孵化率有明显影响;孵化前半段胚胎死亡率高于后半段.结果表明,狮头鹅的反季节生产技术更为成熟,马岗鹅的反季节生产技术还有待提高,环境温度、公母鹅比例等是影响马岗鹅生产性能和孵化效果的主要因素. 相似文献
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【目的】探究G蛋白在狂犬病病毒(Rabies virus,RABV)复制中的作用,以揭示携带双G基因的重组RABV的Hep-dG与亲代毒株rHep-Flury在神经母细胞瘤(NA)细胞中滴度差异的原因,为RABV致病机制的研究奠定基础。【方法】通过病毒吸附、入侵、荧光定量PCR、Western-blot以及中和抗体阻断等试验,检测G蛋白过表达对IFN-β以及相关因子转录的影响。【结果】Hep-dG感染能显著上调NA细胞中IFN-βmRNA的表达,激活了下游因子STAT1的表达与磷酸化,在较低的感染复数(MOI=0.01)下,Hep-dG感染后24 h即可显著促进IFN-β基因的表达,36 h达到最高水平(P0.001)。该病毒进入细胞后,产生了更多的病毒Leader RNA和RIG-I mRNA,且与IFN-βmRNA的表达高度一致。抗体阻断IFN-β后,Hep-dG在NA细胞中的病毒滴度显著上升(P0.01),约为阻断前的7.9倍,且与亲代毒株rHep-Flury无显著差异。与阴性对照比较,5μg的pH-G质粒转染能刺激IFN-β的转录(P0.05),表明真核表达RABV G蛋白能在一定程度上刺激IFN-β的转录。【结论】本研究初步揭示了G蛋白激活先天性免疫应答的原因和作用。RABV G蛋白的过表达,通过促进病毒Leader RNA的转录,激活了RIG-I介导的IFN-β通路,进而抑制了Hep-dG在NA细胞的繁殖。G蛋白的过表达也对干扰素通路起到一定的作用。 相似文献
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旨在探索饲粮中添加白藜芦醇对急性热应激条件下山麻鸭肝抗氧化能力和细胞凋亡的影响,确定添加白藜芦醇对山麻鸭肝组织SIRT1信号通路、抗氧化酶系统及凋亡相关基因的作用。试验选取120只60日龄体重相近且健康的雌性山麻鸭,随机分为2组,每组60只,既对照组(C,饲喂基础饲粮)和白藜芦醇组(RES,饲喂添加400 mg·kg-1白藜芦醇的基础饲粮)。两组动物均在常温(24℃±2℃)下饲养,15 d后,两组动物体重无明显差异。随后分别将每组动物随机分为3组,每组20只,在39℃环控仓中分别放置0、30、60 min。热应激处理后,采集鸭血清样本及肝组织,应用qRT-PCR、Western blot、TUNEL技术对SIRT1信号通路及凋亡相关基因的mRNA、蛋白水平和细胞凋亡数进行检测。采用生化法检测血清及肝中的氧化指标。结果显示,与对照组相比,白藜芦醇组HSP70和HSP90 mRNA表达有所升高。同时,白藜芦醇激活了SIRT1途径,增加了下游PGC-1α、TFAM mRNA表达,显著增加了热应激60 min条件下Nrf1、Nrf2核蛋白的表达。白藜芦醇提高了血清中T-A... 相似文献
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猪伪狂犬病可引起母猪繁殖障碍、仔猪死亡并破坏猪的免疫系统,严重危害养猪业的发展。为了查清山西该病流行情况,对山西11个地市58个规模化种猪场进行了猪伪狂犬病分子流行病学调研。结果表明,山西种猪场猪伪狂犬病广泛存在,用PCR试剂盒检测猪伪狂犬病病毒感染率,最高的地区是朔州,为28.57%,最低的地区是晋中,为2%,平均为9.12%;用猪伪狂犬病病毒gE抗体检测试剂盒检测其感染gE抗体阳性率,最高的地区是朔州,为14.86%,最低的地区是吕梁,为1%,平均为3.20%;山西大部分种猪场都免疫猪伪狂犬病gE基因缺失弱毒疫苗,用猪伪狂犬病病毒gB抗体检测试剂盒检测其疫苗免疫gB抗体阳性率,最高的地区是晋城,为94.82%,最低的地区是长治,为41.26%,平均为79.33%。调研查明,山西种猪场普遍感染猪伪狂犬病病毒,疫苗免疫效果比较理想,但地区之间差异较大,今后要进一步加强该病的防疫免疫工作,有效控制其流行。 相似文献
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鹅GAPDH实时荧光定量PCR方法的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
研究旨在建立鹅GAPDH基因的Real-time PCR技术,为鹅功能基因m RNA表达水平的定量分析提供方法学基础。根据Gen Bank上鸭GAPDH基因的序列设计引物扩增鹅全长基因,以全长基保守区作为模板设计引物,采用SYBR GreenⅠ染料建立了Real-time PCR方法,以阳性重组质粒为标准品,建立标准曲线,并进行了熔解曲线分析。结果表明,所建立的方法具有快速、线性范围广以及重复性高等特点,研究结果为鹅GAPDH作为内参基因用于鹅相关基因定量表达分析奠定了基础。 相似文献
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