新病害羊草蜜穗病病原细菌鉴定

 羊草是我国的主要优质牧草之一。     

棉籽带枯萎病菌检验方法的研究

棉籽带菌是远距离传病的主要途径。病棉株种子带菌率0.01—46.8%。带菌部位以种壳为主,但子叶、胚均带菌。棉籽上除带枯萎病菌外,还带有半棵、串珠、茄病、木贼等几种镰刀菌及其他杂菌,干扰检验。文中介绍一种选择性培养基,其成分为:甲基纤维素1克、KH_2PO_4克、蛋白胨5克、MgSO_4·7H_2O0.5克、K_2S_20.2克、KCl 0.6克,NH_4NO_30.3克、五氯硝基苯0.1克、蔗糖20克、链霉素0.1克、琼脂20克、蒸馏水1000毫升。应用其进行分离培养棉籽,可根据菌落形态特征及颜色反应,较容易地检验出棉花枯萎病菌。     

马铃薯青枯病(成都)病圃的建立及抗性材料的初步评价

青枯病是马铃薯生产上重要病害之一，在我省危害相当严重。建立青枯病专用病圃可有效的评价筛选抗病资源材料，供育种和生产利用。通过两年病圃的初步评价，从我所选育、收集的部分资源材料和常规品种（系）中筛选出为中抗的材料９份。两年平均结果病指相对值大于７０％，属于高抗（Ｒ）的株系为０，病指相对值于４０％～７０％之间为中抗（ＭＲ）的占参试株系的１９．２９％，病指相对值于２０％～４０％属中感（ＭＳ）的占参试株系的３５．０９％，病指相对值小于２０％属感（Ｓ）的占参试株系的４５．６１％。从病圃发病株率和病指可以看出，成都地区马铃薯生长季节青枯病发病情况春季主要集中在５月份，秋季主要集中在１０份，春季病情严重，秋季发病轻。     

小麦品种抗黑颖病鉴定方法研究

研究了各种因素对黑颖病发病的影响,结果表明,最适宜黑颖病的发生和表现典型病状的温度为22℃,发病的适宜光照强度为160000勒克斯·小时,结露和充足的湿度是发病轻、重的主要因素,接种体浓度每毫升含0.75～24.0×10~8个菌体均可。比较了几种接种方法,证明剪叶法简便易行,准确可靠,可做定叶接种、受气象因素影响较小,具有实际应用价值。鉴定了2883个小麦品种的抗病性,表明各品种抗性有明显差异。比较研究了140个不同抗性等级品种的苗期和成株期抗病性的相关性,两者的正相关率为45％,有50％以上的品种苗期抗性较强于成株期抗性,一般成株期抗性比苗期下降1级。苗期抗性鉴定可以用于初筛,对苗期表现高抗和中抗品种,再进一步做成株期抗病性鉴定。     

生防细菌对马铃薯青枯病的防病增产作用研究

将对马铃薯青枯病菌具有抑菌活性的枯草芽孢杆菌 (Bacillus subtilis)菌株0702、GP7-13制成粉状制剂 ,用于马铃薯种薯播前处理。湖北恩施田间小区防病增产试验表明 ,病地上菌株GP7-13对马铃薯青枯病的防效达73.9%～89.7% ,0702菌株达60.9%～88.2%。两生防菌剂在北京郊区南口和河北张北县无病地试验 ,对马铃薯具有促生增产作用 ,菌株GP7-13可增产马铃薯 17.3%～60.3% ;0702增产26.9%～61.2%。     

抗菌蛋白AP1编码基因对马铃薯的转化及其介导的青枯病抗性研究

根据已知马铃薯抗青枯菌蛋白AP1编码基因序列,合成了特异性引物,经PCR扩增、酶切以及连接、转化等分子操作,成功地获得了AP1编码基因植物表达载体pHap1,该载体具有-2E-P35S-12-ap1-结构。以电激法将pHap1导入根癌农杆菌LBA4404,用叶盘法转化马铃薯青枯病感病品种Mira、中-5-1及金冠试管苗,分别获得了卡那霉素(kan)抗性再生苗。经PCR、Southern、Northern检测,表明ap1基因已成功整合到转基因植株染色体上并正确表达。对Mira品种的转基因植株进行了青枯病抗病性鉴定,结果表明,转基因植株的抗病性比非转基因植株对照明显提高,发病或出现萎蔫症状的时间延迟、病情指数降低。     

马铃薯抗青枯病体细胞变异体离体筛选研究初报

本试验证明了青枯菌活菌作为马铃薯细胞变异体离体筛选的选择压力是适宜的。明确了活菌压力的最适浓度、愈伤组织接种的最适龄期和接种的方法。愈伤组织培养皿内继代培养重复接种筛选是快速而有效的筛选方法。从近2万块马铃薯叶圆片愈伤组织中,经重复接种筛选获得了6块抗菌愈伤组织(比率为0.03％左右)。并经过分化诱导培养获得了再生苗。初步的抗性鉴定结果表明,再生苗抗1(PSS—1)比母体(米拉脱毒试管苗)的抗病性有显著提高。     

马铃薯环腐病酶联试剂诊断盒的研制与应用研究

 应用固相吸附技术和免疫酶技术研制成马铃薯环腐病酶联试剂诊断盒。     

植物青枯病原细菌胞外蛋白相关基因的克隆

 用含有转座子Tn5的铜绿假单胞杆菌PAO1826(pMO75∷Tn5,Km^r)诱变我国马铃薯青枯菌小种3号菌株PO41,获得6000多个胞外多糖正常产生的接合子。经SDS-PAGE电泳,筛选出2个胞外蛋白减少9种的突变株PM2644和PM239,其可以引起烟草叶片典型的过敏性反应,致病力比野生型菌株显著降低,皆为原养型菌株。Southern杂交的结果表明,突变株染色体上只有1个转座子插入位点。标记交换证明,9种胞外蛋白缺失与转座子插入相偶联的频率为100%。以聚半乳糖醛酸酶和内葡聚糖酶2种胞外酶为指示蛋白进行定量测定的结果表明,在突变株上清液中和菌体细胞内都没有这2种胞外酶的存在。以突变株PM2644为受体菌,通过基因功能互补的方法,从野生型青枯菌基因文库筛选到2个阳性克隆pPSP1和pPSP2,它们既能恢复2个突变株产生胞外蛋白的能力,也能将2个突变株的致病力恢复到接近野生型菌株的水平。     

利用青枯菌胞外蛋白输出缺失突变体防治西红柿青枯病的研究

作者采用转座子Tn5诱变植物青枯菌获得了世界首例植物青枯菌胞外蛋白输出缺失突变体(简称eep突变体)。该突变体在缺失了许多胞外蛋白(包括有植物细胞壁降解酶、果胶酶类和纤维素酶类)外输功能后,也失去了对寄主的致病力。因此,该类突变体有可能被应用于植物青枯病的生物防治。本文主要是针对eep突变体在番茄上的定埴能力和生防效果进行研究。