检测实验动物弓形虫感染的两种PCR方法的建立和比较

为了建立敏感、稳定、特异的PCR检测体系，用于实验动物弓形虫感染的检测。采用B1基因设计引物，建立常规PCR，用P30基因设计引物，建立巢式PCR；用两种PCR方法检测实验感染弓形虫小鼠血液和腹腔波中的DNA动态变化；用巢式PCR检测自然状态下的普通级豚鼠、教学和科研用兔的弓形虫感染率，并和常规PCR检到结果比较。结果，巢式PCR可检测到1fgDNA含量，比常规PCR敏感lOO倍；对其他微生物DNA无交叉现象，特异性强；对同一样品重复检测3次，阴、阳性结果一致，稳定性好。小鼠感染弓形虫2d后，巢式PCR对小民腹腔液的阳性检出率为83．3％，对血液的阳性检出率为33．3％；感染3d后，腹腔液阳性检出率为100％；而常规PCR在小鼠感染3d和4d后才能在腹腔液和血液中检测到，检出率各为16．7％。受检普通级豚鼠没有感染弓形虫，教学和科研用兔的弓形虫总感染率为14．3％。结论认为，巢式PCR方法可用于实验动物弓形虫早期感染的检测，具有敏感性高、特务性强、稳定性好的特点。     

规模化猪场猪肠道寄生虫病的防治

规模化养猪即集约化养猪，他给养猪业带来了一个新的概念。他显著地提高了养猪劳动效益，为猪只的生产繁殖创造了一个良好的环境条件，并且可以有效控制一些传染病的发生。但另一方面由于密集饲养，畜舍常年温暖潮湿，为某些疾病，特别是寄生虫病的发生和传播创造了有利条件。寄生虫病     

一起猪肉异样病变引起的思考

1基本情况2005年1月9日,县某定点屠宰场进行生猪屠宰作业,县动检站派员进场例行正常的同步检疫工作。其中有一头猪胴体分布米粒大至黄豆大的圆形红斑。实施宰前检疫该猪精神状态无异常,收缴了产地检疫证,宰后应检剖位的淋巴结无异常变化,肌肉、脂肪及内脏均正常,胴体分布上述情况在温热季节发现较多,天冷季节较少见。根据物理感观检验,检疫员判定该猪为湿疹,肉品为可食品,加盖了“肉品检验”印章,准予出场。该肉被某媒体记者发现,并进行了拍照,在报刊公开曝光,认为该肉品为病害肉。这样就引起了市、县各级领导的关注,并对此事进行了详细的了…     

山羊同期发情技术的应用

放置含有0.3g孕酮的阴道栓（CIRD）配合肌肉注射PMSG，对布尔母山羊进行同期发情处理，取栓后36－55h内的同期发情率为100％，第一情期受胎率为53.85%，3个情期受胎率为100％，平均产羔率为254.54%。采用阴道栓配合FSH进行超排处理的布尔山羊供体，48h的同期发情94.5%。放置阴道栓或肌注PG处理的关中奶山羊受体48h内同期发情率为83.94%。     

重组牛皮蝇素A蛋白的免疫试验

用由毕赤酵母表达的皮蝇素A（Hypdermin A，HA）蛋白分别免疫新西兰大白兔和牦牛，了解该蛋白免疫效果。用两种不同分子量的重组HA蛋白分别免疫新西兰大白兔1次和2次，ELISA测其抗体消长规律。结果表明，3周后抗体水平达到峰值，后缓慢下降。50KD蛋白免疫效果较30KD蛋白好，差异非常显著（P〈0．01）。用其中50KD的重组HA蛋白分别在7月和9月免疫自然感染牛皮蝇蛆病牦牛，观察感染率和感染强度，ELISA测其抗体消长规律。结果表明，7月免疫组与9月免疫组感染率分别为83．3％和36．3％（对照组为55．5％）；平均感染强度分别为6．5和4．2（对照组为13．0），差异不显著（P〉0．05）。免疫后，抗体水平上升，3个月后缓慢下降。9月免疫组免疫效果较7月免疫组好，三组抗体水平差异非常显著（P〈0．01）。上述研究结果为防治牛皮蝇蛆病疫苗的深入研究和实践运用提供了参考依据。     

用卡片PCR法检测卡耶他环孢子虫

使用FTA卡片法提取卡耶他环孢子虫DNA,利用特异性引物组F1E/R2B、CC719/CRP999进行巢式PCR,得到1条298bp的特异条带。并以柔嫩艾美尔球虫、贝氏隐孢子虫等作为对照,结果显示,除卡耶他环孢子虫外,均无特异性条带。用卡耶他环孢子虫卵囊进行巢式PCR敏感性试验,结果显示敏感度最高达1.0×100个/mL。     

早春节瓜通风性小拱棚及栽培技术研究

从早春栽培节瓜的通风性小拱棚研制入手,包括通风口、材质大小及栽培区管理等,从品种筛选、种子处理、培育壮苗、田间生产管理、采收、建立档案等方面研究珠江滩涂地区早春节瓜小拱棚生产技术,研制的早春节瓜通风性小拱棚及配套栽培技术适合在冬季霜期短、回春快的地区推广应用.     

卷丹LlAGO1基因的克隆及表达分析

以卷丹（Lilium lancifolium）叶腋组织为研究材料,利用RT-PCR和RACE技术克隆得到AGO1基因的cDNA全长,命名为LlAGO1。其全长4 014 bp,开放阅读框长3 687 bp,编码1 228个氨基酸残基,其编码蛋白分子量为135.36 kD,理论等电点（pI）为9.57。氨基酸序列分析表明LlAGO1含有PAZ和Piwi两个AGO1典型的结构域;信号肽预测结果表明LlAGO1蛋白不存在信号肽,为非分泌蛋白;亚细胞定位预测其主要定位于细胞核;与相关同源蛋白高度相似,且与芦笋AGO1a蛋白（XP_020260210.1）亲缘关系最近。qRT-PCR分析结果表明：LlAGO1在卷丹叶腋、鳞片、根、叶等不同组织均有表达,其中在叶腋中的表达量最高,叶片和根中的表达较弱;腋生珠芽形成过程中,LlAGO1仅在可形成珠芽的上部叶腋表达,且在珠芽形成时表达量最高,而在不形成珠芽的下部叶腋几乎不表达,推测LlAGO1可能与卷丹珠芽的形成相关。     

复合维生素对林下养殖模式下清远麻鸡肌肉品质与谷氨酸、肌苷酸及肌内脂肪含量的影响

试验旨在探究复合维生素对林下养殖模式下清远麻鸡肌肉品质与谷氨酸、肌苷酸及肌内脂肪等风味物质含量的影响。选用初始体重相近的60日龄清远麻鸡400只,随机分为实验组和对照组,每组5个重复,每个重复40只鸡。处理组在饮水中添加0.01%的复合维生素,各组鸡只放养在桉树林下,试验为期100 d。结果表明:①复合维生素显著提高了清远麻鸡120～160日龄时体重(P<0.001);②添加复合维生素显著提高试鸡宰后45 min、宰后24 h胸肌的L*值(P<0.05),降低b*值(P<0.05),并降低胸肌的滴水损失与剪切力(P<0.05);③复合维生素增加清远麻鸡胸肌中谷氨酸、肌苷酸及降低肌内脂肪的含量(P<0.05)。添加复合维生素可显著提高林下养殖模式下清远麻鸡的体重,改善肉品质,并增加胸肌中谷氨酸、肌苷酸及肌内脂肪等风味物质的含量,从而改善肌肉风味。     

隐孢子虫检测方法研究进展

本文介绍了近年来用于检测隐孢子虫的方法,包括卵囊分离与纯化方法、卵囊染色镜检方法、免疫学检测方法、分子生物学检测方法。根据文献中表述的不同方法的敏感性和特异性,本文对所述方法的优缺点进行了对比分析,以便广大寄生虫病学工作者参考,在具体实践中选择比较适合的隐孢子虫检测方法。