基于CRISPR-Cas9技术的鸡成纤维细胞系全基因组敲除文库的建立与初步应用

CRISPR-Cas9已被广泛证实是高效强大的第三代基因编辑工具。高通量且系统无偏的靶向全基因组水平编辑技术的应用对充分理解基因功能具有重要的意义。基于CRISPR-Cas9技术的大规模筛选方法已在哺乳动物研究领域取得重要进展,尽管鸡全基因组测序的工作已完成,但至今尚未有关于禽类CRISPR-Cas9文库的研究,严重限制了对其基因功能的解析。本研究利用CRISPR-Cas9技术构建鸡成纤维细胞系(DF-1)细胞全基因组敲除文库,并利用新城疫病毒(NDV)感染DF-1文库细胞,经过高通量测序筛选到sgRNA富集程度排名前10的影响NDV复制的关键宿主因子。该研究首次构建了鸡CRISPR-Cas9文库筛选模型,为进一步研究家禽免疫学、病毒学等提供强大高效的工具。     

鸡血小板衍生生长因子受体α基因的分子克隆及其真核表达蛋白鉴定

鸡血小板衍生生长因子受体α(chPDGFRα)是PDGFRs家族的一种,属于受体酪氨酸激酶(RTKs)家族成员。本研究首先运用RT-PCR技术从鸡骨髓源树突状细胞(chBM-DCs)中分子克隆得到PDGFRα基因,然后将基因片段分别定向克隆至真核表达载体pCMV-HA和p3XFLAG-CMV-14中,构建出重组chPDGFRα表达质粒pHA-PDGFRα和pFLAG-PDGFRα,经酶切鉴定及DNA测序验证正确后,分别瞬时转染至HEK293T细胞,通过Western blot和IFA进行检测。结果表明成功构建了pHA-PDGFRα和pFLAG-PDGFRα重组表达质粒,为深入研究chPDGFRα蛋白在抗病毒免疫中的分子作用机制奠定了基础。     

低碳知识的时空扩散与演变特征研究

基于维普中文科技期刊全文数据库中相关文献的时空分布变化,考量我国低碳知识经济扩散的形式、特征规律。结果发现：低碳知识在我国的时间扩散经历了接收、启动、加速、回落四个时期;低碳知识扩散中,政府是主导者,学者是领先者,企业是跟进者、居民是接受者;北京是我国低碳知识的扩散源,城市地位和文化科研实力是重要保障;低碳知识在我国的空间扩散既符合整体规律又表现出差异化。     

大型立式水泵机组可靠性影响因素分析

大型立式水泵机组在国内最早采用,应用最为广泛,立式泵机组可靠性和工况调节性能最好,技术最为成熟。本文调查了大型立式泵机组的常见故障,分析了立式泵机组可靠性的影响因素,提出了提高水泵机组可靠性的措施,对改善立式水泵机组可靠性运行具有重要参考价值。     

基于C-Vine Copula熵多目标优化模型的水文气象站网优化研究

气候变化背景下水文气象序列的趋势性引发的非平稳特性势必会对水文气象站网优化结果产生一定影响。通过C-Vine Copula熵的多目标站网优化模型和滑动窗口法结合,分别以黄河和淮河流域1992-2018年日降水序列作为研究对象,通过建立的站网优化模型分析了不同窗宽条件下两个典型流域各站点的秩次情况,从而量化分析降雨序列趋势程度对站网优化结果的影响。结果表明：由于Archimedean Copula仅仅适合描述正相关的多变量相依性结构,基于CVine Copula模型估计总相关量更加逼近实际的站网信息冗余量,特别是在高维情形下二者估计的差异性更大;趋势程度较大的淮河流域站网秩次的年际变化相比于趋势程度小的黄河流域站网更加显著,趋势性引发的序列非平稳特性增加了水文气象站网评价结果的不确定性。不同的时间域范围可能会对站网设计结果产生不同的影响,这意味着最佳的站网布设可能只适用于特定的观测时段。因此,研究表明在处理水文气象站网优化时应非常谨慎,因为在其他条件相同情形下,基于固定的全序列剔除或者增加某些台站会导致整个站网系统的水文气象信息损失或信息冗余,为此站网的优化设计应当以使其更适应不断变化的...     

江都第三抽水站反向发电方式比较与效益分析

针对南水北调东线工程源头江都第三抽水站利用上游余水发电、抽水时间远大于发电时间的特点,为了优选出可逆式水泵机组最佳发电方案,介绍了利用水泵机组倒转发电的基本情况及其效益,从技术层面分析了水泵机组倒转发电方式;从经济方面对水泵机组倒转发电方式进行了比较;对江都三站多年发电收益进行了归纳总结,从投资与收益的关系方面,分析比较了3种发电方式的净效益终值.结果表明,大型泵站利用上游余水倒转发电,可以取得良好的经济效益和社会效益,但其发电功能的取舍与发电方式的选择,应考虑抽水与发电的主次关系和综合效益;与建站时采用变极发电方式相比,江都第三抽水站更新改造采用变频发电方式,虽然增加了变频机组,但主电动机成本下降,总设备费用下降,发电功率提高了30%～35%,且不影响水泵机组抽水效率,技术可行,运行可靠,容易实施.     

鄂州市湖泊调蓄作用浅析

随着全球气候影响和快速城市化的发展,近年来暴雨洪水频发。利用1959-2016年鄂州最大日降水量数据,应用皮尔逊Ⅲ分布法计算鄂州市多年一遇的降雨量来确定鄂州20年一遇、50年一遇和100年一遇降雨量,通过分析鄂州梁子湖、鸭儿湖等中型湖泊在不同重现期其削峰和调蓄洪水作用,发现梁子湖对20年一遇、50年一遇、100年一遇洪水的调蓄水量分别为3.29、3.73和4.04亿m~3,调蓄水量分别占入湖水量的87%、83%和80%;上鸭儿湖对20年一遇、50年一遇、100年一遇洪水的调蓄水量分别为0.39、0.22和0.23亿m~3,调蓄水量分别占入湖水量的35%、32%和30%,对比鄂州市防洪排涝标准并讨论鄂州防洪对策。     

气调储粮条件下稻谷呼吸熵探究

粮食是具有生命的活体,其生理活动直接影响粮食的储藏稳定性,充氮气调作为一项新的绿色储粮技术,具有抑制、杀灭储粮害虫的效果,同时能够避免或减少化学污染、有效解决害虫抗药性等特点,正被广泛地应用到实际储粮中[1].但长时间处于低氧条件下,稻谷呼吸产生不完全氧化产物,如醇、醛、酸等,积累量过多会对稻谷的品质产生影响.为探索不同温度和氮气浓度下稻谷种子的呼吸情况,进一步指导绿色气调科学储粮,本试验对不同氮气浓度条件下的稻谷进行了呼吸熵的测定以衡量稻谷的呼吸强度.     

一种救生圈自亮浮灯的设计研究

船舶安全是船舶的生命线。船舶救生设备是船上人员遇险时使用的重要求生设备,其性能的好坏直接影响着海上求生的成败。团队立足现有设备的性能研究,从性能完善出发,设计了一种救生圈自亮灯浮,有效提升了设备性能,为海上人命安全加了一道保险。