棉隆等替代甲基溴防治日光温室根结线虫病研究

近年来日光温室经过多年连茬种植,蔬菜根结线虫病、枯萎病、根腐病等土传病害日益严重,成为制约保护地蔬菜发展的主要障碍。以前多采用甲基溴熏蒸消毒,但由于甲基溴是大气臭氧消耗物质,联合国粮食组织已经把甲基溴列为受控物质。近几年来我们进行了棉隆、硫酰氟熏蒸消毒替代甲基溴技术研究试验,土壤熏蒸消毒效果显著,防治效果可达80%左右,并逐渐被农民接受。     

猪圆环病毒2型H株cap基因原核表达载体的构建与表达

利用PCR技术从临床病料中提取病毒DNA,扩增出猪圆环病毒PCV-2核衣壳蛋白(Cap)基因。将其克隆到原核表达载体pET-32a中,构建了表达载体pET-H2,转化至大肠杆菌BL21中,用ITPG诱导表达。SDS-PAGE分析显示,重组蛋白主要以不溶性包涵体形式表达,与预期大小30 ku相符;Western-blotting分析表明,表达产物能与抗猪PCV2阳性血清发生反应。     

海拔梯度对新疆梯牧草植株形态学特征的影响

以分布于新疆伊犁昭苏沙尔套山海拔1 700–2 200 m处的野生梯牧草(Phleum pratense)为研究对象,通过测定其形态学指标,探讨海拔梯度对各个形态特征的影响,以期为梯牧草种质资源保护及优异种质资源筛选提供科学依据。结果表明,1)不同海拔梯度梯牧草在茎粗、旗叶长、旗叶宽、穗长、小穗宽、小穗数等形态特征指标上存在显著差异(P 0.05),其他形态学指标并未表现出规律性变化;综合表现为海拔1 900 m处植株高大,植株叶片最长,小穗数最多。2)不同海拔之间叶片气孔形态存在显著差异(P 0.05),随海拔升高梯牧草上表皮气孔长度显著增长,气孔数减少。3)综合指标显示,海拔1 900 m左右为梯牧草最适宜的生长环境。     

磁珠富集法开发蕨麻SSR标记引物

微卫星序列(SSR)因具有分布广、共显性遗传、稳定、多态性丰富等优点而被广泛应用于动植物遗传研究中。利用EcoRⅠ,MseⅠ2 种内切酶酶切蕨麻基因组,酶切片段与用生物素标记的探针(AG)₁₅、(GT)₁₅杂交,然后通过链霉亲和素磁珠富集、含有SSR片段的基因组片段被吸附,再经洗脱、PCR扩增、克隆和测序,完成微卫星序列的收集。共获得有效克隆236个,随机挑选其中80个进行测序,结果显示68条序列(85%)为唯一序列,挑选出其中40条含有SSR位点的序列,用引物设计软件Primer 5 成功设计出 40 对引物,经初步筛选,最终获得多态性丰富,可稳定扩增的SSR引物20对,扩增成功率达50%。对20对引物扩增结果做了初步分析,扩增出多态性位点共338个,平均每对引物扩增出17个,平均有效等位基因数(Ne)、多态性信息含量(PIC)、Nei’s 基因多样性指数(H)和Shannon’s 信息指数(I)平均值分别为1.2440、0.8996、0.1768和0.3078。20对SSR引物为蕨麻遗传变异研究提供了新的分子标记工具。     

发酵扶正解毒口服液对肉鸡生产性能、免疫指标及肉品质的影响

本研究旨在探索发酵扶正解毒口服液对肉鸡生产性能、免疫指标及肉品质的影响。利用单因子试验方法,选取1日龄健康肉鸡90只,随机分为3组,分别为：对照组、Ⅰ组（未发酵制剂）和Ⅱ组（发酵制剂）,每组3个重复,每个重复10只鸡。于试验的第21、42日龄测定肉鸡的生长性能和免疫器官发育情况,42日龄测定肉品质。结果显示,与对照组相比,1~42日龄,Ⅰ、Ⅱ组平均日增重分别提高了8.09%和13.76%（P<0.05）,料重比分别降低了2.23%和10.27%（P<0.05）。21、42日龄,Ⅰ、Ⅱ组脾脏指数比对照组分别提高了9.09%（P>0.05）和15.15%（P<0.05）、34.38%和53.13%（P<0.05）,法氏囊指数比对照组分别提高了1.22%（P>0.05）和20.41%（P<0.05）、8.72%和18.97%（P<0.05）,肝脏指数比对照组均有提高;42日龄,Ⅰ、Ⅱ组胸肌的水分、粗蛋白质、粗脂肪含量、红度（a^*值）、肌苷酸分别比对照组提高了0.57%和2.10%（P<0.05）、1.61%（P>0.05）和4.25%（P<0.05）、49.89%和43.85%（P>0.05）、7.88%和58.62%（P>0.05）、24.50%和31.13%（P<0.05）,胸肌的滴水损失、黄度（b^*值）分别比对照组降低了21.91%和32.24%（P<0.05）、4.55%和21.73%（P>0.05）,Ⅱ组腿肌的肌肉水分、粗蛋白质、粗脂肪和肌苷酸含量均比Ⅰ组和对照组显著提高（P<0.05）,滴水损失显著下降（P<0.05）,a^*值均高于Ⅰ组和对照组,亮度（L^*值）、b^*值均低于Ⅰ组和对照组。结果表明,发酵扶正解毒口服液能够显著提高肉鸡生长性能和免疫指标,且能改善其肉品质。     

牛分枝杆菌MPB70蛋白单克隆抗体的制备及检测

为了制备牛分枝杆菌的单克隆抗体,本试验利用制备的原核表达的牛分枝杆菌重要抗原蛋白MPB70作为免疫原皮下多点注射免疫BALB/c小鼠。利用细胞融合技术,经过5次亚克隆与筛选,取已免疫好的小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞在PEG3500的作用下进行细胞融合。筛选得到了2株分泌抗牛分枝杆菌MPB70蛋白的杂交瘤细胞,分别命名为Anti-B-MPB70：8和Anti-B-MPB70：12。采用间接ELISA方法对获得的单克隆抗体进行亲和常数检测、效价分析及亚类鉴定,通过SDS-PAGE凝胶试验对单克隆抗体进行纯度分析,并检测其浓度,通过Western blotting方法对单克隆抗体的反应特性进行鉴定。结果显示,纯化后的MPB70蛋白分子质量大小为20 ku,浓度为0.5 mg/mL。两株单克隆抗体的亲和常数分别为9.95×10⁹和9.53×10⁸;抗体效价分别为1∶102 400和1∶12 800;抗体亚类分别为IgG_2b和IgG₁,轻链类型均为κ型;纯度>90%;浓度分别为3.0和2.2 mg/mL;且具有良好的反应特性。以上研究结果表明,本试验成功制备了抗MPB70蛋白单克隆抗体,可为牛结核病病原和抗体检测技术研究奠定基础。     

狐狸流产奇异变形杆菌的分离鉴定及特征分析

为明确引起狐狸流产的主要原因,确定主要病原体并提出有效防控措施,试验收集了河北地区多个流产狐狸的脾脏和卵巢,利用细菌分离培养、形态观察、药敏试验、16S rRNA基因测序和序列分析及同源性比对等方法对引起狐狸流产的病原体进行分离鉴定,分析其耐药性,筛选有效治疗药物;同时对病原菌的致病力进行检测。结果显示,从流产狐狸病变的脾脏和卵巢中分离到了1株单一的革兰氏阴性菌,命名为FOX-abortion-Hebei。药敏试验结果显示,该菌对头孢哌酮等11类药物敏感,而对妥布霉素等5类抗菌药物中度敏感。动物试验结果显示,该菌株具有较强的致病性,攻毒小鼠和狐狸后均可引起动物死亡。16S rRNA测序和同源性分析结果显示,分离到的革兰氏阴性菌为奇异变形杆菌（Proteus mirabilis,PM）,与已公布序列的同源性为93.6%~99.9%;系统进化树结果显示,该菌与埃及分离到的菌株（AUMC B-199）亲缘关系最近。本研究明确了狐狸流产主要是由奇异变形杆菌感染所致,也是首次在流产狐狸中分离到该菌,且能引起严重的繁殖障碍,需在狐狸养殖中加以防控。     

山东省荣成市狂犬病防治知识KAP调查

了解荣成市农村居民对狂犬病防治知识的知晓情况,实施狂犬病健康知识传播,提升荣成市狂犬病防控KAP水平,提高荣成市犬免疫率,为防控工作提供依据。方法:设计基线调查问卷一和干预后调查问卷二,在荣成市随机抽取5个乡镇,每个乡镇4个村,每个村随机抽取10户居民,共对200名居民进行宣传干预前后2次随机抽样调查。结果:65%被调查者家庭中养有犬只,在农村养犬户中给自家犬打疫苗的仅占33%,问卷一调查显示,居民对狂犬病知识平均得分为8.2分,平均得分率为57.67%,问卷二调查显示,居民对狂犬病知识平均得分为13.45分,平均得分率为89.67%。结论:在农村养犬户中犬免疫率较低,狂犬病防治知识较为缺乏,通过宣传干预,居民对狂犬病防治知识、态度和行为均发生了显著的改变,但仍需要进一步落实综合防控措施,让人们远离狂犬病。     

春季猪呼吸道疾病的原因与防治

<正>1发病原因1.1传染性因素呼吸道疾病主要由1~2种以上的病毒、细菌,或者是其共同感染引发的。其病原体包括猪繁殖与呼吸综合征病毒、肺炎支原体、圆环病毒2型、流感病毒等原发病原体;猪链球菌、多杀性巴氏杆菌、附红细胞体、胸膜肺炎放线杆菌等继发病原体。1.2气候、环境条件猪呼吸道疾病不仅是由原发病原体和继发病原体造成的,还和气候、环境条件的优劣紧密相关。气温较低,温度变化大,昼夜温差大,保暖