过表达ZmIBH1-1提高玉米苗期抗旱性

【目的】干旱是严重影响玉米生长发育进程的一个重要因素。挖掘玉米抗旱相关基因,通过转基因功能验证和转录组分析,解析关键基因在响应干旱胁迫过程中的分子调控机制,为抗旱分子育种和遗传改良提供理论依据。【方法】以玉米自交系B104（WT）为背景材料,利用农杆菌介导方法构建过表达ZmIBH1-1转基因株系（ZmIBH1-1-OE）;通过对转基因植株进行草铵膦抗性筛选、标记基因和目的基因PCR检测,以及运用实时荧光定量PCR检测目的基因的表达情况,鉴定阳性植株和株系;以WT和ZmIBH1-1-OE转基因株系为材料,通过干旱处理（20% PEG6000）,进行表型鉴定和耐旱生理生化指标测定,验证ZmIBH1-1的抗旱功能;通过对干旱胁迫下玉米4叶期转录组的比较分析,鉴定出差异表达的基因（differentially expressed genes,DEGs）;结合DAP-seq（DNA affinity purification sequencing）分析,初步确定ZmIBH1-1蛋白直接调控与抗旱相关的下游靶基因,利用基因组可视化软件IGV（integrative genomics viewer）分析ZmIBH1-1蛋白结合候选靶基因的位置,然后通过Dual-Luciferase试验验证ZmIBH1-1蛋白与靶基因的调控关系。【结果】通过玉米遗传转化获得12个转化事件;T₃代中,能同时检测到标记基因Bar和目的基因ZmIBH1-1的植株有458个,实时荧光定量PCR检测结果表明,ZmIBH1-1-OE中ZmIBH1-1的表达量显著高于WT,株系3和株系8表达量最高,将其自交获得T₄代转基因株系用于后续试验。在干旱胁迫条件下,ZmIBH1-1-OE株系存活率、叶片相对含水量、叶绿素含量、可溶性蛋白含量及其生理生化指标（超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶活性）均显著高于WT,说明玉米中过量表达ZmIBH1-1赋予玉米更高的耐旱性。转录组分析结果表明,WT与ZmIBH1-1-OE株系在干旱胁迫下有1 214个差异表达基因;Gene Ontology（GO）功能富集分析结果表明,差异表达基因主要涉及生物过程、细胞组分和分子功能,如在生物过程中主要涉及到光合作用、应激响应、脱水响应等;KEGG富集分析表明,差异表达基因主要参与植物激素信号传导、新陈代谢等过程。结合转录组显著差异表达基因和DAP-Seq分析所得到ZmIBH1-1蛋白的靶基因,初步确定ZmIBH1-1蛋白直接调控与抗旱相关的11个候选靶基因,包括2个钙信号相关基因、3个半胱氨酸代谢相关基因、1个bHLH转录因子、1个应激响应蛋白、1个谷胱甘肽转移酶、1个氧化还原过程蛋白和2个乙烯响应因子;基因组可视化结果显示ZmIBH1-1蛋白可以结合靶基因启动子区;随后通过Dual-Luciferase试验进一步表明,ZmIBH1-1蛋白可以直接作用于11个候选靶基因,其中,ZmIBH1-1蛋白可以促进ZmCa-M、ZmSYCO、ZmbHLH54、ZmGlu-r1、ZmCLPB3和ZmP450-99A2的表达,抑制ZmAGD12、ZmCYS、ZmCYSB、ZmERF-107和ZmEIN3的表达。此外,在干旱胁迫下NAC、WRKY、MYB等转录因子在ZmIBH1-1-OE和WT株系中也存在差异表达。【结论】ZmIBH1-1的过表达可以增强玉米苗期的耐旱性;ZmIBH1-1蛋白通过直接调控乙烯信号通路中的ZmERF-107和ZmEIN3的表达提高玉米的耐旱性;ZmIBH1-1蛋白通过直接调控钙信号相关基因ZmCa-M和ZmAGD12增强玉米的耐旱性;ZmIBH1-1蛋白可能通过间接调控NAC、WRKY、MYB等转录因子响应干旱胁迫。     

含刚性沉水植物明渠水流结构的试验研究

【目的】得到含刚性沉水植物明渠的水流结构。【方法】采用粒子图像测速仪(PIV),用有机玻璃棒模拟刚性植物,在不同来水流量、植物密度条件下对明渠水流结构进行了试验研究。【结果】无植物时平均流速沿垂向呈对数分布规律,有植物时则呈现明显的分区分布特性。无植物时紊动强度值沿垂向变化不大,有植物时在植物顶端位置处紊动最剧烈。流量或植物密度越大,植物顶端位置的流速梯度就越大,植物层上方的流速最大值也越大。植物密度越大,植物顶端位置的紊动强度越大,植物密度对水流紊动强度由最大值减小到最小值的区域影响很大。【结论】刚性沉水植物的存在会改变水流结构,增强紊动掺混,增强流体质点交换和能量传递,且上述影响会随着流量或植物密度的增大而增强。     

基于分层MANET的区域云数字图书馆研究

考虑到MANET网络充分的灵活性及高效能的优势,选取其作为云数字图书馆的服务网络：在云数字图书馆的相关理论研究基础上,提出了基于MANET的分层区域云数字图书馆模型,该模型包括了5层,MANET用户层,高速MAN网络层,门户网站层,虚拟数字图书馆接口层,云图书馆运行维护中心层。经过模拟实验,证明了该模型具有高效能,可靠性,安全性,能很好满足用户需求。     

抓具抓取轨迹曲线及其绘制

在设计和研究抓具系统的功能和各种特性时,首先必须对抓具颚爪的抓取曲线进行研究。本文分析和论述了抓具的抓取轨迹曲线、影响抓取轨迹曲线的因素以及抓取曲线的绘制。     

柠檬酸废液深层培养双孢蘑菇菌丝蛋白的研究

柠檬酸工业废液中含有一定有效物质,如糖类、蛋白质、矿物质等,可供微生物利用。本文介绍了利用废液深层培养双孢蘑菇菌丝蛋白的可能性及条件。并用1吨发酵堆进行生产试验,探讨了生产工艺条件,分析了发酵液中底物、产物的动态变化。双孢蘑菇菌丝蛋白培养温度25℃,底物 pH6,发酵周期6天,菌球直径1～3mm,菌球数量4.8×10~3个/ml,菌丝温重达底物量的29.3%。在上述条件下,发酵液中菌球直经、菌丝数量、发酵液粘度受生物剪切作用的影响,粘度大,剪切作用大,菌球直径小,菌球数量则多。本文为新型单细胞蛋白的开发,促进物质的多层次利用,消除环境污染,提供了一个新途径。     

我国物流行业上市公司资本结构影响因素实证研究

采用实证分析和规范分析相结合的方法来研究影响物流行业上市公司资本结构的内外因素，并提出相应的对策与建议，以期能为物流行业上市公司制定合理的资本结构提供实证数据和参考。     

犬瘟热及细小满毒病例消化道呼吸道细菌的分离、培养鉴定及药敏试验

犬瘟热是由犬瘟热病毒引起的犬和许多肉食目动物的一种高度接触性传染病,以早期表现双相热,急性鼻卡他以及随后的支气管炎、卡他性肺炎,严重的胃肠炎和神经症状为特征.     

饲用塑性大豆浓缩磷脂流态化研究

研究了温度和水分含量对饲用大豆浓缩磷脂黏度的影响,发现Na 能提高浓缩磷脂的黏度,而Ca2 能降低浓缩磷脂的黏度。对于水分含量较低的塑性浓缩磷脂,添加0.4%的氯化钙或添加3%大豆油脱臭馏出物能显著降低低水分塑性浓缩磷脂的黏度,使其流态化。但对于高水分塑性浓缩磷脂,其作用不明显。0.3%的氯化钙和3%的大豆油脱臭馏出物复合使用能使塑性浓缩磷脂的黏度降到2000cPa.s以下,而且长时间保持稳定。     

重迎茬亚麻生长发育障碍机制的研究

重迎茬亚麻减产是由多种因素综合作用的结果,亚麻重迎茬可使病害加重是最主要因素,重茬年限越久发病越严重;重迎茬造成了土壤营养元素的单一消耗,随着重迎茬年限的增加,土壤中速效氮、速效磷、速效钾等含量降低。     

亚麻细菌病发生及防治技术研究

从亚麻细菌病的发生、发展、危害及病原茵特性到病害综合防治，进行了系统研究，明确了该病的发生与品种抗性、耕作栽培等诸方面的关系，为病害防治提供了理论依据；明确了种子带茵是该病害主要侵染源和传播途径，同时建立综合防病体系。